10 mg/mL EB(溴化乙錠)溶液:凝膠電泳中的經(jīng)典染料溴化乙錠(Ethidium Bromide,簡(jiǎn)稱EB)是一種廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的熒光染料,尤其在DNA和RNA凝膠電泳中用于染色和可視化DNA或RNA條帶。10 mg/mL的EB溶液是實(shí)驗(yàn)室中常用的高濃度儲(chǔ)備液,能夠方便地稀釋至工作濃度,用于各種電泳實(shí)驗(yàn)。產(chǎn)品特點(diǎn)高靈敏度:EB能夠特異性地嵌入DNA雙鏈的堿基對(duì)之間,在紫外光下發(fā)出強(qiáng)烈的熒光,使得DNA條帶在凝膠中清晰可見。適用范圍廣:適用于瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠電泳,可檢測(cè)DNA片段、質(zhì)粒、基因組DNA以及RNA。即用型設(shè)計(jì):10 mg/mL的EB溶液為高濃度儲(chǔ)備液,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求稀釋至工作濃度(通常為0.5-1 μg/mL),使用方便。穩(wěn)定性高:常溫保存,穩(wěn)定性好,無需特殊處理。應(yīng)用場(chǎng)景DNA凝膠電泳:用于檢測(cè)PCR產(chǎn)物、質(zhì)粒DNA、限制性酶切片段等。RNA凝膠電泳:用于分析RN片段大小、完整性以及降解情況。核酸染色:在Southern blot、Northern blot等實(shí)驗(yàn)中,用于核酸的預(yù)染或后染。10 mg/mL的EB溶液是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中不可或缺的工具,廣用于DNA和RNA的凝膠染色。其高靈敏度和穩(wěn)定性使其成為實(shí)驗(yàn)室中的經(jīng)典染料。在基因編輯中,Pfu DNA Polymerase 可用于目的基因或編輯工具的克隆,減少克隆過程中的非目標(biāo)突變。Recombinant Human IL-28A Protein
Hot-Start Taq DNA Polymerase 是一種經(jīng)過改良的Taq DNA聚合酶,專為提高PCR反應(yīng)的特異性和靈敏度而設(shè)計(jì)。它通過結(jié)合一種溫度敏感的抑制劑(如核酸適配體或抗體)來實(shí)現(xiàn)熱啟動(dòng)功能。在室溫下,抑制劑與酶結(jié)合,阻止Taq酶的活性,從而避免因引物錯(cuò)配或二聚體形成導(dǎo)致的非特異性擴(kuò)增。當(dāng)反應(yīng)體系升溫至PCR循環(huán)條件時(shí),抑制劑釋放,酶活性被啟動(dòng),確保反應(yīng)在高溫下特異性進(jìn)行。與普通Taq酶相比,Hot-Start Taq DNA Polymerase 的優(yōu)勢(shì)在于其提高了PCR的特異性和重復(fù)性,同時(shí)減少了因非特異性擴(kuò)增導(dǎo)致的背景信號(hào)。這種酶還支持在室溫下配制反應(yīng)體系,無需額外的高溫啟動(dòng)步驟,簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作。此外,Hot-Start Taq DNA Polymerase 適用于多種復(fù)雜的PCR應(yīng)用場(chǎng)景,包括常規(guī)PCR、多重PCR、高GC含量模板擴(kuò)增以及甲基化分析等。例如,某些版本的Hot-Start Taq酶經(jīng)過優(yōu)化,能夠擴(kuò)增經(jīng)過亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化的DNA,這對(duì)于表觀遺傳學(xué)研究具有重要意義??傊?,Hot-Start Taq DNA Polymerase 通過其獨(dú)特的熱啟動(dòng)機(jī)制,為PCR反應(yīng)提供了更高的特異性和靈敏度,是分子生物學(xué)研究和診斷應(yīng)用中的理想選擇。SomatostatinPhusion DNA Polymerase 應(yīng)在后面加入反應(yīng)體系中,以避免其3'-5'外切酶活性降解引物。
Uracil-DNA Glycosylase (E. coli) (5U/μl):高效去除尿嘧啶的分子生物學(xué)工具Uracil-DNA Glycosylase(UDG)是一種來源于大腸桿菌的重組酶,能夠高效催化DNA鏈中尿嘧啶(dU)堿基與脫氧核糖骨架之間的N-糖苷鍵水解,釋放游離尿嘧啶。這種酶對(duì)單鏈和雙鏈DNA均有效,但對(duì)RNA或短于6個(gè)堿基的DNA寡核苷酸無活性。產(chǎn)品特點(diǎn)UDG酶的主要特點(diǎn)是能夠在PCR反應(yīng)中有效防止產(chǎn)物污染。通過在PCR反應(yīng)中摻入dUTP替代dTTP,生成含有dU的DNA產(chǎn)物,UDG可以特異性降解這些含dU的DNA,從而避免PCR產(chǎn)物的交叉污染。此外,UDG酶在較寬的pH范圍內(nèi)具有活性,適pH為8.0,且不需要二價(jià)陽離子。應(yīng)用場(chǎng)景UDG酶廣泛應(yīng)用于以下領(lǐng)域:PCR產(chǎn)物防污染:通過降解含dU的PCR產(chǎn)物,防止氣溶膠污染導(dǎo)致的假陽性結(jié)果。單核苷酸多態(tài)性檢測(cè):用于檢測(cè)基因組中的單核苷酸變異?;蚓庉嬇c位點(diǎn)特異性突變:用于制備和處理含有dU的DNA模板。蛋白質(zhì)-DNA相互作用研究:通過去除尿嘧啶,研究DNA修復(fù)機(jī)制。在PCR反應(yīng)中,UDG酶的推薦使用濃度為0.01U/μl,通常在反應(yīng)體系中加入適量的UDG Buffer以確保比較好活性。此外,UDG酶在RT-PCR中需謹(jǐn)慎使用,因?yàn)槠淇赡芟潞铣傻腸DNA。
racil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Cod) (1U/μl):高效防污染的熱敏型酶Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Cod) 是一種來源于鱈魚的熱敏型尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG/UNG),能夠特異性地催化水解DNA鏈中的尿嘧啶堿基,釋放游離尿嘧啶,從而防止PCR產(chǎn)物的氣溶膠污染。產(chǎn)品特點(diǎn)該酶對(duì)單鏈和雙鏈DNA均具有活性,但對(duì)RNA無作用。其比較大特點(diǎn)是熱敏感性,可在55℃下10分鐘內(nèi)完全失活,避免了常規(guī)UDG酶滅活后可能殘留的活性對(duì)含dU擴(kuò)增產(chǎn)物的降解作用。這種特性使其在PCR和RT-qPCR反應(yīng)中表現(xiàn)出色,尤其適用于需要快速滅活的場(chǎng)景。應(yīng)用場(chǎng)景去除PCR產(chǎn)物污染:通過降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,防止氣溶膠污染導(dǎo)致的假陽性結(jié)果。RT-qPCR防污染:在逆轉(zhuǎn)錄前去除殘留的PCR產(chǎn)物,避免假陽性。單鏈或雙鏈DNA處理:用于去除DNA中的尿嘧啶堿基。在PCR反應(yīng)中,建議在反應(yīng)體系中加入1 U/50 μL的UDG/UNG,以確保完全去除含dU的模板。此外,該酶在多數(shù)PCR反應(yīng)緩沖液中均有活性,但在高離子強(qiáng)度(>200 mM)下會(huì)被抑制。激發(fā)的泛素被轉(zhuǎn)移到泛素結(jié)合酶E2的活性位點(diǎn)半胱氨酸殘基上,形成E2-泛素硫酯中間體。
Taq DNA聚合酶:分子生物學(xué)的“明星酶”Taq DNA聚合酶是一種從嗜熱菌Thermus aquaticus中分離得到的耐熱性DNA聚合酶,因其獨(dú)特的耐高溫特性和高效的DNA合成能力,成為分子生物學(xué)領(lǐng)域不可或缺的工具。該酶在PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)中發(fā)揮著重要作用,極大地推動(dòng)了基因擴(kuò)增、測(cè)序和診斷技術(shù)的發(fā)展。Taq DNA聚合酶具有5'→3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性,但缺乏3'→5'外切酶活性,這使得它在DNA合成過程中能夠快速延伸引物,同時(shí)在PCR產(chǎn)物的3'端添加一個(gè)突出的A堿基,便于后續(xù)的克隆操作。此外,Taq酶的耐熱性使其能夠在PCR的高溫變性步驟中保持穩(wěn)定,從而實(shí)現(xiàn)高效的循環(huán)擴(kuò)增。近年來,科學(xué)家們通過對(duì)Taq DNA聚合酶的改造和優(yōu)化,開發(fā)出多種突變體,以滿足不同的實(shí)驗(yàn)需求。例如,Klentaq1突變體具有更高的耐熱性和保真性,適用于長(zhǎng)片段PCR擴(kuò)增。此外,Taq酶的5'外切酶活性還被用于開發(fā)新型的多重PCR檢測(cè)技術(shù),如“MeltArray”技術(shù),實(shí)現(xiàn)了在單次反應(yīng)中檢測(cè)多個(gè)靶點(diǎn)。Taq DNA聚合酶的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用不僅極大地簡(jiǎn)化了DNA擴(kuò)增的流程,還為基因診斷、遺傳病檢測(cè)和個(gè)性化醫(yī)療等領(lǐng)域提供了強(qiáng)大的技術(shù)支持。Hot-Start Taq DNA Polymerase 是一種經(jīng)過改良的Taq DNA聚合酶,為提高PCR反應(yīng)的特異性和靈敏度而設(shè)計(jì)。Somatostatin
實(shí)驗(yàn)人員無需額外添加染料或進(jìn)行復(fù)雜的后處理,即可直接在PCR儀上觀察擴(kuò)增曲線,從而實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確的定量分析。Recombinant Human IL-28A Protein
Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(5U/μl):高效除PCR污染的關(guān)鍵酶在分子生物學(xué)研究中,PCR技術(shù)的應(yīng)用極為廣,但PCR產(chǎn)物的交叉污染問題一直是影響實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性和可靠性的關(guān)鍵因素之一。Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(UDG)作為一種高效的酶工具,憑借其獨(dú)特的性能和廣的應(yīng)用,已成為解決這一問題的理想選擇。一、產(chǎn)品特點(diǎn)高效水解尿嘧啶Uracil-DNAGlycosylase(UDG)能夠特異性地催化DNA中尿嘧啶(dU)堿基與脫氧核糖之間的N-糖苷鍵水解,釋放游離尿嘧啶。這種酶對(duì)單鏈和雙鏈DNA均有效,但對(duì)RNA或長(zhǎng)度不超過6個(gè)堿基的DNA寡核苷酸無活性。防止PCR產(chǎn)物污染UDG的主要應(yīng)用之一是防止PCR產(chǎn)物的交叉污染。通過在PCR反應(yīng)中使用dUTP替代dTTP,生成含有dU的PCR產(chǎn)物,UDG可以特異性地切割這些含有dU的DNA,從而防止其在后續(xù)反應(yīng)中作為模板被擴(kuò)增。反應(yīng)條件兼容性UDG在pH8.0左右表現(xiàn)出活性,且不需要二價(jià)陽離子,可在較寬的pH范圍內(nèi)工作。它對(duì)高離子強(qiáng)度(>200mM)敏感,因此在使用時(shí)需注意反應(yīng)體系的離子濃度。Recombinant Human IL-28A Protein