在現(xiàn)代分子生物學(xué)研究中,聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)已成為不可或缺的工具,廣泛應(yīng)用于基因擴(kuò)增、突變檢測(cè)、基因表達(dá)分析等多個(gè)領(lǐng)域。而一款PCR Master Mix則是確保實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵因素之一。Phusion Master Mix (2×) (Without Dye)憑借其性能和獨(dú)特的產(chǎn)品特點(diǎn),為科研工作者提供了高效、可靠的實(shí)驗(yàn)解決方案。一、酶性能Phusion Master Mix的成分是Phusion DNA聚合酶,這是一種具有高保真性的熱穩(wěn)定酶。它能夠以極高的準(zhǔn)確性復(fù)制DNA模板,錯(cuò)誤率極低,為普通Taq酶的1/500,這使得它在擴(kuò)增長(zhǎng)片段DNA或?qū)π蛄袦?zhǔn)確性要求極高的實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出色。例如,在進(jìn)行基因克隆或構(gòu)建基因文庫(kù)時(shí),Phusion酶能夠確保擴(kuò)增產(chǎn)物的序列與原始模板高度一致,從而提高了后續(xù)實(shí)驗(yàn)的成功率。二、快速擴(kuò)增能力盡管Phusion酶具有高保真性,但其擴(kuò)增速度并未受到影響。它能夠在短時(shí)間內(nèi)完成長(zhǎng)片段DNA的擴(kuò)增,提高了實(shí)驗(yàn)效率。對(duì)于長(zhǎng)度在5kb以內(nèi)的DNA片段,Phusion Master Mix可以在幾分鐘內(nèi)完成擴(kuò)增,這對(duì)于需要快速獲得實(shí)驗(yàn)結(jié)果的研究人員來說是一個(gè)巨大的優(yōu)勢(shì)。例如,在進(jìn)行高通量基因篩查或大規(guī)模樣本分析時(shí),Phusion Master Mix能夠縮短實(shí)驗(yàn)周期,提高工作效率。T4 DNA 聚合酶是一種模板依賴的 DNA 聚合酶,需要特定的 DNA 模板才能進(jìn)行 DNA 合成反應(yīng)。Recombinant Human CD19(His Tag)
高密度設(shè)計(jì),確保樣品沉降6×DNALoadingBuffer是一種六倍濃縮的上樣緩沖液,其主要成分包括甘油或蔗糖等高密度物質(zhì)。這些成分能夠增加樣品的密度,使DNA樣品在加樣后能夠迅速沉入瓊脂糖凝膠的加樣孔底部,避免樣品漂浮,從而確保電泳過程的順利進(jìn)行。雙色指示劑,直觀監(jiān)控電泳進(jìn)程該緩沖液通常含有兩種示蹤染料——溴酚藍(lán)和二甲苯青。溴酚藍(lán)的遷移速度接近300bp的雙鏈DNA,而二甲苯青的遷移速度則接近4-5kb的雙鏈DNA。通過觀察這兩種染料的遷移情況,研究人員可以直觀地判斷電泳的進(jìn)程,從而避免電泳時(shí)間過長(zhǎng)或不足。穩(wěn)定樣品,防止降解6×DNALoadingBuffer中還含有EDTA等成分,能夠螯合鎂離子,防止核酸酶對(duì)DNA的降解,從而保護(hù)DNA樣品的完整性。此外,其配方優(yōu)化后,能夠在電泳過程中維持DNA的穩(wěn)定狀態(tài),確保電泳結(jié)果的可靠性。兼容性強(qiáng),適用范圍廣6×DNALoadingBuffer適用于多種類型的核酸電泳,包括瓊脂糖凝膠電泳和非變性丙烯酰胺凝膠電泳。其優(yōu)化的配方使其在不同濃度的瓊脂糖凝膠中均能表現(xiàn)出良好的性能,且與常見的電泳緩沖液(如TAE和TBE)完全兼容。Recombinant Cynomolgus E-selectin/CD62E Protein,His TagFnCas12a系統(tǒng)的脫靶效應(yīng)較低,這對(duì)于減少非目標(biāo)效應(yīng)和提高物質(zhì)的安全性至關(guān)重要。
在分子生物學(xué)研究中,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,而Pfu Master Mix (2×) (Without Dye) 則是實(shí)現(xiàn)高保真擴(kuò)增的理想選擇。這種預(yù)混液結(jié)合了Pfu DNA聚合酶的高保真特性和優(yōu)化的反應(yīng)體系,為科研人員提供了一個(gè)效率、便捷且可靠的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。Pfu Master Mix (2×) (Without Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,含有Pfu DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液以及必要的輔助成分。Pfu DNA聚合酶以其保真性而聞名,其3'-5'外切酶活性能夠在DNA合成過程中糾正錯(cuò)誤摻入的堿基,從而提高擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性。與Taq DNA聚合酶相比,Pfu酶的錯(cuò)誤率更低,使其成為需要精確擴(kuò)增的實(shí)驗(yàn)(如基因克隆、突變分析和測(cè)序準(zhǔn)備)的優(yōu)先工具。此外,Pfu Master Mix (2×) (Without Dye) 的無染料配方為實(shí)驗(yàn)提供了更大的靈活性。實(shí)驗(yàn)人員可以根據(jù)具體需求選擇后續(xù)的檢測(cè)方法,例如凝膠電泳分析、平末端克隆或測(cè)序,而無需擔(dān)心染料對(duì)結(jié)果的干擾。這種無染料設(shè)計(jì)特別適合需要進(jìn)一步處理的PCR產(chǎn)物,例如用于構(gòu)建重組質(zhì)?;蜻M(jìn)行下游功能分析。Pfu Master Mix (2×) (Without Dye) 的2倍濃度設(shè)計(jì)進(jìn)一步簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作。實(shí)驗(yàn)人員只需加入模板DNA和引物,即可直接進(jìn)行反應(yīng),減少了手動(dòng)配制反應(yīng)體系的步驟和可能出現(xiàn)的誤差。
Ultra-Long Master Mix (2×) (Without Dye) 是一種專為長(zhǎng)片段PCR擴(kuò)增設(shè)計(jì)的即用型預(yù)混液,廣應(yīng)用于基因組學(xué)、分子生物學(xué)以及復(fù)雜模板的擴(kuò)增研究中。該預(yù)混液結(jié)合了經(jīng)過配體修飾的熱穩(wěn)定Taq DNA聚合酶和優(yōu)化的反應(yīng)緩沖體系,能夠高效擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)25 kb的基因組片段。產(chǎn)品特點(diǎn)Ultra-Long Master Mix (2×) (Without Dye) 的重要優(yōu)勢(shì)在于其長(zhǎng)片段擴(kuò)增能力。該預(yù)混液融合了3'-5'校正活性因子,能夠提高擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性和特異性。此外,預(yù)混液中已包含dNTP和Mg2?,使用時(shí)只需加入模板和引物即可進(jìn)行反應(yīng),極大地簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作流程。該預(yù)混液還添加了保護(hù)劑,使其在反復(fù)凍融后仍能保持穩(wěn)定的活性,適合長(zhǎng)期保存。其擴(kuò)增產(chǎn)物的3'端帶有A堿基,可直接連接至T載體,便于后續(xù)克隆操作。應(yīng)用場(chǎng)景Ultra-Long Master Mix (2×) (Without Dye) 適用于多種復(fù)雜的模板類型,包括基因組DNA、cDNA和質(zhì)粒DNA。它能夠高效擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)25 kb的基因組片段、14 kb的cDNA片段以及40 kb的λDNA片段。這種長(zhǎng)片段擴(kuò)增能力使其在基因組組裝、基因克隆和復(fù)雜基因組區(qū)域的擴(kuò)增中表現(xiàn)出色,尤其適合填補(bǔ)基因組缺口和端粒到端粒(T2T)基因組組裝。隨后,泛素分子從E1轉(zhuǎn)移到泛素結(jié)合酶E2,再通過泛素連接酶E3的作用,將泛素分子連接到靶蛋白上。
一、產(chǎn)品特點(diǎn)高純度與高質(zhì)量dNTPMix(25mMeach)采用高純度原料,每種核苷酸(dATP、dCTP、dGTP、dTTP)的濃度均為25mM,純度≥99%(HPLC檢測(cè)),確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。此外,產(chǎn)品經(jīng)過嚴(yán)格檢測(cè),不含DNase、RNase和核酸外切酶,避免了核酸降解的風(fēng)險(xiǎn)。穩(wěn)定性和兼容性該產(chǎn)品在-20°C下可穩(wěn)定保存至少12個(gè)月,且在常規(guī)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出良好的兼容性,適用于多種DNA聚合酶,如Taq酶和高保真酶。操作便捷性dNTPMix為預(yù)混溶液,減少了多次移液帶來的誤差,提高了實(shí)驗(yàn)效率。此外,產(chǎn)品可以直接用于PCR、cDNA合成等實(shí)驗(yàn),無需額外處理。二、性能表現(xiàn)高效擴(kuò)增能力在PCR實(shí)驗(yàn)中,dNTPMix(25mMeach)能夠支持長(zhǎng)片段DNA的高效擴(kuò)增。例如,使用高保真酶時(shí),可輕松擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)20kb的DNA片段。這種高效性使其在基因克隆和復(fù)雜模板擴(kuò)增中表現(xiàn)出色。靈敏度與特異性dNTPMix在qPCR實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出良好的線性關(guān)系,靈敏度可達(dá)到單拷貝水平。此外,其高純度和低雜質(zhì)含量減少了非特異性擴(kuò)增的可能性,提高了實(shí)驗(yàn)的特異性和重復(fù)性。利用牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I的連接原理,可以在無需DNA連接酶的情況下,快速高效地連接DNA片段,實(shí)現(xiàn)克隆。Recombinant Human CD19(His Tag)
這種預(yù)混液結(jié)合了熱啟動(dòng)技術(shù)和優(yōu)化的反應(yīng)體系,為準(zhǔn)確的基因擴(kuò)增提供了強(qiáng)大的支持。Recombinant Human CD19(His Tag)
一、主要特點(diǎn):免提取與高兼容性Blood Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye)是一種專為血液樣本設(shè)計(jì)的高效PCR預(yù)混液,能夠直接從全血或干血斑中擴(kuò)增DNA,無需進(jìn)行繁瑣的DNA提取和純化步驟。這種預(yù)混液含有高保真DNA聚合酶(如HemoTaq?或Q5® Hot Start High-Fidelity DNA Polymerase),這些酶經(jīng)過優(yōu)化,能夠耐受血液中的各種抑制劑,包括抗凝劑(如EDTA、肝素、檸檬酸鈉)和濾紙中的化學(xué)物質(zhì)。此外,該預(yù)混液還具備的模板兼容性,能夠從多種抗凝劑保存的血液樣本中直接擴(kuò)增DNA,適用于人類、小鼠等哺乳動(dòng)物的全血樣本。二、性能:高保真性與長(zhǎng)片段擴(kuò)增Blood Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye)的優(yōu)勢(shì)之一是其高保真性。其DNA聚合酶的保真性高于普通Taq酶,接近Pfu DNA聚合酶,能夠確保擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性。這對(duì)于需要高精度的基因克隆和測(cè)序?qū)嶒?yàn)尤為重要。此外,該預(yù)混液能夠擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)5kb甚至更長(zhǎng)的DNA片段,適用于多種復(fù)雜的基因組分析。例如,它可以輕松擴(kuò)增人類基因組中的長(zhǎng)片段,如IL-6基因的4882bp片段。Recombinant Human CD19(His Tag)