在分子生物學(xué)實驗中,PCR技術(shù)是基因擴增的重要工具,而Hot-Start Taq Master Mix (2×) (With Dye) 則是提升PCR特異性和便捷性的理想選擇。這種預(yù)混液結(jié)合了熱啟動技術(shù)和熒光染料,為效率、準(zhǔn)確的基因擴增提供了強大的支持。Hot-Start Taq Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,包含Hot-Start Taq DNA聚合酶、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液、dNTPs、增強劑以及熒光染料。其優(yōu)點在于熱啟動技術(shù)的應(yīng)用。通過在常溫下抑制Taq酶活性,該預(yù)混液有效避免了非特異性擴增和引物二聚體的形成,從而提高了PCR反應(yīng)的特異性和靈敏度。這種特性尤其適用于復(fù)雜模板(如高GC含量或低豐度基因)的擴增,以及對特異性要求較高的實驗場景。熒光染料的加入是該預(yù)混液的另一大亮點。這種染料在PCR過程中能夠?qū)崟r監(jiān)測DNA的擴增情況,通過熒光信號的強度變化反映目標(biāo)基因的擴增程度。這種“即用型”預(yù)混液不僅節(jié)省了實驗時間,還減少了人為操作帶來的污染風(fēng)險,尤其適合高通量的基因檢測和定量分析。此外,該預(yù)混液的2倍濃度設(shè)計進一步簡化了實驗操作。實驗人員只需加入模板DNA和引物,即可直接進行反應(yīng),減少了手動配制反應(yīng)體系的步驟和可能出現(xiàn)的誤差。Endo H 相對比較嬌貴,需要在特定的條件下保存才能保持其活性,一般需要在 - 20℃或更低溫度下保存。畢赤酵母表達(dá)重組腸激酶
One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus):高效、特異且防污染的RNA定量檢測解決方案One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus) 是一種為RNA模板設(shè)計的一步法實時熒光定量PCR(qPCR)試劑盒,結(jié)合了SYBR Green I熒光染料和UDG防污染系統(tǒng),能夠在同一反應(yīng)管中完成逆轉(zhuǎn)錄和qPCR反應(yīng),操作簡便且高效。產(chǎn)品特點高靈敏度與特異性:采用優(yōu)化的逆轉(zhuǎn)錄酶和熱啟動Taq DNA聚合酶,結(jié)合SYBR Green I染料,能夠高效檢測低豐度RNA模板,同時減少非特異性擴增。UDG防污染系統(tǒng):含有dUTP和UDG酶,可在反應(yīng)前降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,有效防止氣溶膠污染。操作簡便:逆轉(zhuǎn)錄和qPCR反應(yīng)在同一管中完成,減少了操作步驟和污染風(fēng)險。兼容性強:適用于多種qPCR儀器,支持快速反應(yīng)程序。應(yīng)用場景基因表達(dá)分析:用于定量檢測特定基因的表達(dá)水平。病毒檢測:適用于RNA病毒的快速檢測,如流感病毒、病毒等。高通量樣本分析:適合多樣本的單基因檢測。One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus) 以其高效、特異和防污染的特點,成為分子生物學(xué)研究和臨床檢測中的重要工具,尤其適用于需要快速、準(zhǔn)確檢測RNA樣本的場景。Recombinant Human SFRP1/SARP2 Protein,His Tag由于Pfu DNA Polymerase 對引物的質(zhì)量要求較高,使用純度高的引物可以減少由于引物錯誤導(dǎo)致的非目標(biāo)突變。
在分子生物學(xué)實驗中,PCR技術(shù)是基因擴增的重要工具,而Hot-Start Taq Master Mix (2×) (Without Dye) 則是提升PCR特異性和效率的關(guān)鍵試劑。這種預(yù)混液結(jié)合了熱啟動技術(shù)和優(yōu)化的反應(yīng)體系,為準(zhǔn)確的基因擴增提供了強大的支持。Hot-Start Taq Master Mix (2×) (Without Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,包含了Hot-Start Taq DNA聚合酶、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液、dNTPs以及增強劑。其優(yōu)點在于熱啟動技術(shù)的應(yīng)用。通過在常溫下抑制Taq酶活性,該預(yù)混液有效避免了非特異性擴增和引物二聚體的形成,從而提高了PCR反應(yīng)的特異性和靈敏度。這種特性尤其適用于復(fù)雜模板(如高GC含量或低豐度基因)的擴增,以及對特異性要求較高的實驗場景。此外,該預(yù)混液不含染料,為實驗提供了更大的靈活性。實驗人員可以根據(jù)具體需求選擇后續(xù)的檢測方法,例如凝膠電泳分析、DNA測序或克隆。這種無染料設(shè)計也使得預(yù)混液適用于多種下游應(yīng)用,而不會對結(jié)果產(chǎn)生干擾。Hot-Start Taq Master Mix (2×) (Without Dye) 的2倍濃度設(shè)計進一步簡化了實驗操作。實驗人員只需加入模板DNA和引物,即可直接進行反應(yīng),減少了手動配制反應(yīng)體系的步驟和可能出現(xiàn)的誤差。這種效率、便捷的特性使其成為分子生物學(xué)實驗室的理想選擇。
Taq DNA聚合酶:分子生物學(xué)的“明星酶”Taq DNA聚合酶是一種從嗜熱菌Thermus aquaticus中分離得到的耐熱性DNA聚合酶,因其獨特的耐高溫特性和高效的DNA合成能力,成為分子生物學(xué)領(lǐng)域不可或缺的工具。該酶在PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)中發(fā)揮著重要作用,極大地推動了基因擴增、測序和診斷技術(shù)的發(fā)展。Taq DNA聚合酶具有5'→3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性,但缺乏3'→5'外切酶活性,這使得它在DNA合成過程中能夠快速延伸引物,同時在PCR產(chǎn)物的3'端添加一個突出的A堿基,便于后續(xù)的克隆操作。此外,Taq酶的耐熱性使其能夠在PCR的高溫變性步驟中保持穩(wěn)定,從而實現(xiàn)高效的循環(huán)擴增。近年來,科學(xué)家們通過對Taq DNA聚合酶的改造和優(yōu)化,開發(fā)出多種突變體,以滿足不同的實驗需求。例如,Klentaq1突變體具有更高的耐熱性和保真性,適用于長片段PCR擴增。此外,Taq酶的5'外切酶活性還被用于開發(fā)新型的多重PCR檢測技術(shù),如“MeltArray”技術(shù),實現(xiàn)了在單次反應(yīng)中檢測多個靶點。Taq DNA聚合酶的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用不僅極大地簡化了DNA擴增的流程,還為基因診斷、遺傳病檢測和個性化醫(yī)療等領(lǐng)域提供了強大的技術(shù)支持。Phusion Master Mix (2×) (Without Dye)的無染料配方為實驗設(shè)計提供了更大的靈活性從而獲得更準(zhǔn)確的實驗數(shù)據(jù)。
Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Bacterium) 是一種來源于嗜冷海洋細(xì)菌的熱敏型尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG/UNG)。該酶能夠特異性地催化水解含有尿嘧啶的DNA鏈中的尿嘧啶堿基,釋放游離尿嘧啶,并在DNA中產(chǎn)生無堿基位點(AP位點),從而防止PCR產(chǎn)物的氣溶膠污染。產(chǎn)品特點與傳統(tǒng)UDG酶相比,熱敏UDG酶在室溫下即可高效發(fā)揮作用,且對溫度極為敏感,可在50℃下10分鐘內(nèi)完全失活。這種特性使其在PCR和RT-PCR反應(yīng)中表現(xiàn)出色,尤其適用于需要快速滅活的場景。此外,該酶對單鏈和雙鏈DNA均具有活性,但對RNA或不含尿嘧啶的DNA無作用。其高純度和低殘留特性使其在高投入量下也不會對檢測體系產(chǎn)生抑制。應(yīng)用場景去除PCR產(chǎn)物污染:通過降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,防止氣溶膠污染導(dǎo)致的假陽性。RT-qPCR防污染:在RT-qPCR反應(yīng)中,熱敏UDG酶可在逆轉(zhuǎn)錄前去除殘留的PCR產(chǎn)物。單鏈或雙鏈DNA處理:用于去除DNA中的尿嘧啶堿基。在使用過程中,建議將酶液存放在冰盒內(nèi)或冰浴上,使用完畢后立即放回-20℃保存。此外,熱敏UDG酶在RT-qPCR反應(yīng)中表現(xiàn)出良好的兼容性,即使在高投入量下也不會對反應(yīng)產(chǎn)生抑制。Phusion DNA Polymerase廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)研究中,尤其是在需要高保真度和快速擴增的場景中。Recombinant Human SFRP1/SARP2 Protein,His Tag
Ultra-Long DNA Polymerase能夠擴增包含多個外顯子的長基因片段,有助于揭示疾病的分子機制。畢赤酵母表達(dá)重組腸激酶
在現(xiàn)代分子生物學(xué)研究中,實時熒光定量PCR(qPCR)已成為基因表達(dá)分析、病毒檢測和基因定量的重要工具。其中,One Step RT-qPCR SYBR Green Kit憑借其獨特的優(yōu)勢,成為眾多科研工作者的優(yōu)先試劑盒。簡化操作流程,降低污染風(fēng)險One Step RT-qPCR SYBR Green Kit采用一步法反應(yīng)體系,將逆轉(zhuǎn)錄(RT)和qPCR反應(yīng)集成在同一反應(yīng)管中完成。這種設(shè)計不僅簡化了實驗操作步驟,減少了人為誤差,還有效降低了因反復(fù)開蓋導(dǎo)致的樣品污染風(fēng)險。例如,傳統(tǒng)的兩步法需要分別進行逆轉(zhuǎn)錄和qPCR反應(yīng),操作復(fù)雜且污染風(fēng)險較高,而一步法試劑盒則避免了這些問題。高靈敏度與高特異性該試劑盒使用高效的逆轉(zhuǎn)錄酶和熱啟動Taq DNA聚合酶,結(jié)合優(yōu)化的反應(yīng)緩沖體系,能夠顯著提高反應(yīng)的靈敏度和特異性。其檢測靈敏度可達(dá)極低濃度的RNA樣本,例如在某些實驗中,即使RNA濃度低至0.1 pg,也能實現(xiàn)精細(xì)檢測。此外,試劑盒中添加了抑制非特異性擴增的組分,確保熔解曲線呈現(xiàn)單峰,進一步提高了檢測的準(zhǔn)確性。畢赤酵母表達(dá)重組腸激酶