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上海獼猴原代肝細(xì)胞實驗

來源: 發(fā)布時間:2024-02-02

原代肝細(xì)胞也廣泛應(yīng)用于嵌合體肝模型當(dāng)中。通過將正常人原代肝細(xì)胞移植到患有嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷(SCID)的肝特異uPA轉(zhuǎn)基因小鼠中,可以成功地構(gòu)建嵌合體肝。而轉(zhuǎn)基因小鼠的uPA表達(dá)能夠促使鼠肝細(xì)胞死亡,從而為人原代肝細(xì)胞的移植、重建和增殖提供了一個適宜的微環(huán)境。在這種重建的嵌合體肝內(nèi),人肝細(xì)胞占據(jù)了大約75%的比例,并且能夠持續(xù)高水平地表達(dá)人血清蛋白。 通過使用病人血清和病毒核酸影響這種嵌合體小鼠,研究人員發(fā)現(xiàn)在肝內(nèi)可以檢測到病毒的RNA。然而,病理觀察并未發(fā)現(xiàn)病毒影響所導(dǎo)致的細(xì)胞病變。這一發(fā)現(xiàn)為研究病毒影響的機(jī)制提供了新的途徑,并為開發(fā)解決病毒影響的新方法提供了新的思路。 此外,這項研究還為研究肝細(xì)胞移植和重建提供了新的實驗?zāi)P?。通過將人原代肝細(xì)胞移植到轉(zhuǎn)基因小鼠中,研究人員可以更好地研究原代肝細(xì)胞的生長、分化和功能,從而為克服肝病提供新的思路和方法。這項研究的結(jié)果具有重要的臨床意義,有望為克服肝病和病毒影響提供新的策略。原代肝細(xì)胞可以用于藥物代謝和毒性測試、肝細(xì)胞疾病研究、肝細(xì)胞移植等,為人類健康做出了重要的貢獻(xiàn)。上海獼猴原代肝細(xì)胞實驗

保存溫度是影響原代肝細(xì)胞存活和功能的關(guān)鍵因素之一。一般來說,原代肝細(xì)胞的保存溫度為4℃,但是在這種溫度下,細(xì)胞的代謝活動仍然會繼續(xù)進(jìn)行,導(dǎo)致細(xì)胞的壽命有限。因此,為了延長原代肝細(xì)胞的壽命,可以將其保存在低溫下,如-80℃或液氮中。這種保存方式可以有效地減緩細(xì)胞的代謝活動,延長細(xì)胞的壽命,但是在保存過程中需要注意加入凍存液,防止細(xì)胞凍結(jié)損傷。 原代肝細(xì)胞的運輸也是一個重要的問題。在運輸過程中,細(xì)胞可能會受到振動、溫度變化、氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)的缺乏等不利因素的影響,導(dǎo)致細(xì)胞失活或功能受損。為了保證細(xì)胞的完整性和功能性,可以采用液氮運輸?shù)姆绞?,即在低溫下運輸細(xì)胞。在運輸前給細(xì)胞提供充足的營養(yǎng)和氧氣,也可以增強(qiáng)其抵抗不利因素的能力。珠海雞原代肝細(xì)胞購買立沃生物的原代肝細(xì)胞配套有多種細(xì)胞培養(yǎng)試劑,包括細(xì)胞培養(yǎng)基、細(xì)胞因子等,為后續(xù)研究保駕護(hù)航。

貼壁培養(yǎng)是一種常用的細(xì)胞培養(yǎng)方法,可以使原代肝細(xì)胞在培養(yǎng)皿表面附著生長,形成單層細(xì)胞群落。原代肝細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)需要注意以下幾點: 1. 分離和準(zhǔn)備細(xì)胞:從新鮮的動物肝臟中分離出原代肝細(xì)胞后,需要進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)和質(zhì)量檢測,確保細(xì)胞數(shù)量和質(zhì)量符合要求。 2. 培養(yǎng)基的選擇:原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)基需要選擇適合其生長和代謝的培養(yǎng)基,常用的培養(yǎng)基包括DMEM、RPMI-1640等。 3. 培養(yǎng)皿的涂層:為了使原代肝細(xì)胞能夠附著生長,需要在培養(yǎng)皿表面涂層一定濃度的膠原蛋白、明膠或者其他細(xì)胞黏附因子。 4. 細(xì)胞接種和培養(yǎng):將準(zhǔn)備好的原代肝細(xì)胞接種到涂層好的培養(yǎng)皿中,加入適量的培養(yǎng)基,放入恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。需要注意的是,原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)時間較短,一般在3-5天左右,因此需要及時更換培養(yǎng)基和進(jìn)行細(xì)胞觀察。 原代肝細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)可以通過在培養(yǎng)皿上加一定的的吸附涂層來達(dá)到讓原代肝細(xì)胞快速貼壁的效果。

細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)成分可以讓原代肝細(xì)胞在培養(yǎng)皿中貼壁效果更好。例如膠原蛋白、基質(zhì)膠或人纖維鏈接蛋白,這些成分可以模擬細(xì)胞在人體內(nèi)所處的微環(huán)境,從而提升細(xì)胞的狀態(tài)和生長能力。 膠原蛋白是一種重要的細(xì)胞外基質(zhì)成分,它可以提供細(xì)胞所需的支撐和結(jié)構(gòu)。在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)中,加入膠原蛋白可以讓原代肝細(xì)胞更好地附著在培養(yǎng)皿上,從而促進(jìn)原代肝細(xì)胞的生長和分化。 基質(zhì)膠是一種含有多種細(xì)胞外基質(zhì)成分的復(fù)合物,它可以提供更加復(fù)雜和多樣化的細(xì)胞外環(huán)境。在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)中,加入基質(zhì)膠可以模擬細(xì)胞在人體內(nèi)所處的復(fù)雜環(huán)境,從而提高細(xì)胞的適應(yīng)性和生長能力。此外,基質(zhì)膠還可以促進(jìn)細(xì)胞間的相互作用和信號傳遞,從而增強(qiáng)原代肝細(xì)胞的功能和穩(wěn)定性。 人纖維鏈接蛋白是一種重組的細(xì)胞外基質(zhì)成分,它可以提供細(xì)胞所需的支撐和結(jié)構(gòu)。 加入細(xì)胞外基質(zhì)成分可以可以模擬細(xì)胞在人體內(nèi)所處的微環(huán)境,讓原代肝細(xì)胞在培養(yǎng)皿中更好地生長和分化,從而提高細(xì)胞的狀態(tài)和穩(wěn)定性。原代肝細(xì)胞擁有肝臟的特性和功能,可以用于研究肝臟疾病的細(xì)胞信號傳導(dǎo)和細(xì)胞增殖,是有效的體外實驗?zāi)P汀?/p>

原代肝細(xì)胞是簡單有效的生物體外模型。相比于其他類型誘導(dǎo)產(chǎn)生的肝臟細(xì)胞或是cancer細(xì)胞系,原代肝細(xì)胞在造模的同時不需要復(fù)雜的對細(xì)胞進(jìn)行重編程,以及誘導(dǎo)分化,可以更方便更快速的進(jìn)行高通量藥理研究。此外和另外兩種方式相比,原代肝細(xì)胞能夠更準(zhǔn)確的反應(yīng)體內(nèi)的真實情況,有數(shù)據(jù)表明,原代肝細(xì)胞比iPSC誘導(dǎo)產(chǎn)生的肝細(xì)胞內(nèi)的堿基取代少數(shù)倍,同時這些細(xì)胞還保留了捐獻(xiàn)者的特有特征,是較為理想的研究模型。另一個優(yōu)勢在于,原代肝細(xì)胞衍生的Organoid可以提供獨特的肝毒模型,因為原代細(xì)胞保留了患者特有的I期II期藥物代謝情況。原代細(xì)胞不僅擁有捐贈者特有的生理特性,同時也具備其他兩種肝細(xì)胞在應(yīng)對病原體時的生理反應(yīng)。原代肝細(xì)胞衍生的Organoid既能提供需要的擁肝毒模型,也能體現(xiàn)肝細(xì)胞在應(yīng)對病原體時的生理反應(yīng)。佛山大鼠原代肝細(xì)胞價格

原代肝細(xì)胞是從新鮮的肝臟組織中分離出來的細(xì)胞。上海獼猴原代肝細(xì)胞實驗

原代肝細(xì)胞的細(xì)胞形態(tài)有許多獨特的形態(tài)特征。原代肝細(xì)胞是指從新鮮肝臟組織中分離出來的一種細(xì)胞類型,呈多邊形或多角形形狀,大小約為20-30微米。原代肝細(xì)胞具有明顯的細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì),核小而高亮,細(xì)胞核呈圓形或橢圓形,也有雙核情況存在。原代肝細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含有豐富的細(xì)胞器和細(xì)胞骨架,濃稠且顏色較深。此外,原代肝細(xì)胞表面具有許多微絨毛和微細(xì)突起,這些結(jié)構(gòu)有助于細(xì)胞之間的黏附和交流。同時,原代肝細(xì)胞具有高度的代謝活性和生物合成能力,能夠合成和分泌多種生物活性物質(zhì),如蛋白質(zhì)、hormone、細(xì)胞因子等。這些獨特的形態(tài)特征使得原代肝細(xì)胞成為研究肝臟生理和病理過程的重要模型細(xì)胞。上海獼猴原代肝細(xì)胞實驗