原代肝細(xì)胞研究歷史可以追溯到20世紀(jì)初。當(dāng)時(shí),科學(xué)家們開始對(duì)肝臟的結(jié)構(gòu)和功能進(jìn)行深入研究,并嘗試從肝臟中分離出原代肝細(xì)胞進(jìn)行研究。早期的研究方法是通過肝臟切片的方式來分離出肝細(xì)胞,但是這種方法存在很多局限性,比如細(xì)胞的存活率很低,細(xì)胞的數(shù)量也很有限。 隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步,科學(xué)家們開始嘗試使用酶解法來分離原代肝細(xì)胞。這種方法可以有效地提高細(xì)胞的存活率和數(shù)量,但是由于酶的質(zhì)量和濃度的不同,細(xì)胞的質(zhì)量和純度也存在很大的差異。 在20世紀(jì)50年代,科學(xué)家們開始使用離心法來分離原代肝細(xì)胞。這種方法可以有效地提高細(xì)胞的純度和數(shù)量,但是由于離心過程中細(xì)胞受到的力的不同,細(xì)胞的形態(tài)和功能也會(huì)發(fā)生改變。 隨著細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的不斷發(fā)展,科學(xué)家們開始嘗試使用原代肝細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)。這種方法可以使細(xì)胞在體外繼續(xù)生長(zhǎng)和分化,從而更好地研究肝細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能。但是由于原代肝細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化受到很多因素的影響,比如培養(yǎng)基的成分、pH值、溫度等,因此細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化也存在很大的差異。 隨著技術(shù)的不斷發(fā)展,相信原代肝細(xì)胞研究會(huì)越來越深入,為人類健康事業(yè)做出更大的貢獻(xiàn)。立沃生物的原代肝細(xì)胞配套提供液氮運(yùn)輸服務(wù),以及發(fā)貨細(xì)胞的定位跟蹤,全力保護(hù)客戶所需細(xì)胞安全。廣州小鼠原代肝細(xì)胞鑒定
原代肝細(xì)胞培養(yǎng)中去除endotoxin是十分重要的。原代肝細(xì)胞培養(yǎng)是一種常用的實(shí)驗(yàn)方法,但在培養(yǎng)過程中,細(xì)胞可能會(huì)受到endotoxin的污染,這會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。 endotoxin是一種由細(xì)菌產(chǎn)生的有毒物質(zhì),可以引起炎癥反應(yīng)和細(xì)胞損傷。在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)中,endotoxin可能來自于培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)器具或細(xì)胞本身。因此,需要采取一些措施來去除endotoxin。 一種常用的方法是使用endotoxin去除劑,例如聚陽(yáng)離子樹脂(Polyclonal Cationic Resin,PCR)或聚乙烯醇(Polyvinyl Alcohol,PVA)。這些去除劑可以吸附endotoxin,從而減少其對(duì)細(xì)胞的影響。使用endotoxin去除劑的方法比較簡(jiǎn)單,只需要將其加入培養(yǎng)基中,然后將細(xì)胞培養(yǎng)在其中即可。 可以使用endotoxin檢測(cè)試劑盒來檢測(cè)培養(yǎng)基中的endotoxin含量。如果檢測(cè)結(jié)果顯示endotoxin含量較高,可以考慮更換培養(yǎng)基或使用endotoxin去除劑。 除了使用去除劑和檢測(cè)試劑盒外,還可以采取一些預(yù)防措施來減少endotoxin的污染。例如,使用無菌技術(shù)操作、定期更換培養(yǎng)器具和培養(yǎng)基、避免過度攪拌和振蕩等。 去除endotoxin是原代肝細(xì)胞培養(yǎng)中必須注意的問題。采取適當(dāng)?shù)拇胧┛梢詼p少endotoxin的污染,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。豬原代肝細(xì)胞懸浮原代肝細(xì)胞是一種從新鮮肝臟組織中分離出來的細(xì)胞,具有高度的生物學(xué)活性和生理功能。
原代肝細(xì)胞由于其敏感性和易受外界環(huán)境影響,細(xì)胞活率較低,成為制約其應(yīng)用的瓶頸之一。 適當(dāng)?shù)姆椒梢蕴岣咴渭?xì)胞培養(yǎng)活率。首先,選擇合適的動(dòng)物或人體來源是提高原代肝細(xì)胞細(xì)胞活率的關(guān)鍵。一般來說,年齡較小、健康狀態(tài)良好的動(dòng)物或人體組織中的原代肝細(xì)胞活性較高,因此應(yīng)盡可能選擇這些來源。 其次,分離和培養(yǎng)過程中的細(xì)胞處理方法也會(huì)影響原代肝細(xì)胞的細(xì)胞活率。在分離過程中,應(yīng)盡可能減少機(jī)械或化學(xué)損傷,避免對(duì)細(xì)胞造成不可逆的傷害。在培養(yǎng)過程中,應(yīng)注意細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)和生長(zhǎng)環(huán)境,包括培養(yǎng)基的配方、溫度、濕度、氧氣濃度等因素,以保證細(xì)胞的正常生長(zhǎng)和代謝。 此外,添加適當(dāng)?shù)纳L(zhǎng)因子和細(xì)胞因子也可以提高原代肝細(xì)胞的細(xì)胞活率。例如,添加肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子、肝細(xì)胞生長(zhǎng)抑制因子等可以促進(jìn)細(xì)胞的增殖和生長(zhǎng),提高細(xì)胞的存活率。 綜上所述,提高原代肝細(xì)胞的細(xì)胞活率需要從多個(gè)方面入手,包括選擇合適的動(dòng)物或人體來源、優(yōu)化細(xì)胞處理方法、調(diào)節(jié)培養(yǎng)環(huán)境和添加適當(dāng)?shù)纳L(zhǎng)因子等。這些措施可以有效提高原代肝細(xì)胞的細(xì)胞活率,為其在肝臟生理和病理研究中的應(yīng)用提供了更好的條件。
貼壁培養(yǎng)的原代肝細(xì)胞是酶誘導(dǎo)研究的重要模型。這種模型可以通過倍數(shù)變化方法來評(píng)估藥物是否為酶的誘導(dǎo)劑。具體來說,研究人員可以使用已知的陽(yáng)性和陰性對(duì)照藥物來校準(zhǔn)體外系統(tǒng),然后將研究藥物與細(xì)胞共孵育,測(cè)定孵育后CYP酶的mRNA表達(dá)水平倍數(shù)變化,以評(píng)估藥物是否為酶的誘導(dǎo)劑。這種方法可以幫助研究人員更好地了解藥物相互作用的機(jī)制,從而更好地指導(dǎo)臨床用藥。 酶誘導(dǎo)是一種藥物相互作用的現(xiàn)象,指某些化合物能夠提高肝臟藥物代謝酶的活性,從而導(dǎo)致合用的藥物代謝速率加快,使得原藥的血藥濃度下降,進(jìn)而使其療效降低或喪失。這種現(xiàn)象在臨床上非常常見,因?yàn)樵S多藥物都需要通過肝臟代謝酶來進(jìn)行代謝,而酶誘導(dǎo)會(huì)影響這些代謝酶的活性,從而影響藥物的代謝。 酶誘導(dǎo)的機(jī)制是通過影響肝臟細(xì)胞內(nèi)的CYP酶的表達(dá)和活性來實(shí)現(xiàn)的。CYP酶是肝臟細(xì)胞內(nèi)重要的藥物代謝酶之一,它能夠代謝許多藥物和毒物,從而使它們被代謝出體外。當(dāng)某些化合物進(jìn)入體內(nèi)后,它們會(huì)與CYP酶結(jié)合并使它們的特異性表達(dá),從而使得CYP酶能夠更快地代謝藥物和毒物,使其被代謝出體外。 原代肝細(xì)胞依舊是目前理想的體外模型,是藥物代謝研究的重要組成部分。立沃生物原代肝細(xì)胞提供動(dòng)物源肝細(xì)胞供體數(shù)定制服務(wù),滿足客戶在不同實(shí)驗(yàn)用途和不同實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景下的需求。
原代肝細(xì)胞的體外培養(yǎng)一直是困擾學(xué)者們開展肝病研究的難題。為了研究肝臟的生理和病理過程,學(xué)者們一直在努力開發(fā)體外培養(yǎng)原代肝細(xì)胞的方法。 一般來說,原代肝細(xì)胞體外培養(yǎng)可以維持7-14天左右,7天以后細(xì)胞的狀態(tài)和活率會(huì)逐漸開始下降。 為了克服這些局限性,科學(xué)家們開始嘗試將肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞和肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞共同培養(yǎng)。根據(jù)鄧宏魁教授的5C文章,將肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞和肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞共同培養(yǎng)時(shí),肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞和肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞可以相互作用,形成更加復(fù)雜的細(xì)胞群體,從而更好地模擬肝臟的生理和病理過程,通過這種方法可以將原代肝細(xì)胞體外培養(yǎng)128天。 當(dāng)然,共同培養(yǎng)方法也存在一些局限性,比如如何控制細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化、如何保持細(xì)胞的穩(wěn)定性等。但是,隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步,相信這種方法將會(huì)越來越成熟,為研究肝臟生理和病理提供更加有效的手段。立沃生物的原代肝細(xì)胞的分離技術(shù)門檻很高,需要特定的實(shí)驗(yàn)室條件和技術(shù),嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室管理和質(zhì)量控制。廣州小鼠原代肝細(xì)胞鑒定
立沃原代肝細(xì)胞配套提供多種細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)服務(wù),包括細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)、細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析等。廣州小鼠原代肝細(xì)胞鑒定
原代肝細(xì)胞也可以用于Organ-on-a-chip的構(gòu)建。Organ-on-a-chip是一項(xiàng)創(chuàng)新性的科技成果,它在載玻片大小的芯片上構(gòu)建了一個(gè)完整的生理組織微系統(tǒng),其中包含有原代肝細(xì)胞、肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞、生物流體和機(jī)械力所需微環(huán)境的關(guān)鍵要素。這個(gè)微型肝臟模型可以在體外模擬人體肝臟的主要結(jié)構(gòu)功能特征和復(fù)雜的組織間聯(lián)系,為藥物藥效評(píng)價(jià)、藥物安全性評(píng)價(jià)、化妝品安全性評(píng)價(jià)、食品安全性評(píng)價(jià)、環(huán)境保護(hù)評(píng)價(jià)等提供了一種全新的方法和手段。 這個(gè)微型肝臟模型的研發(fā),是在對(duì)傳統(tǒng)的肝臟模型進(jìn)行改進(jìn)和創(chuàng)新的基礎(chǔ)上實(shí)現(xiàn)的。傳統(tǒng)的肝臟模型通常是基于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)或體外細(xì)胞培養(yǎng)的方法,但這些方法存在著很多的局限性和缺陷。例如,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)不僅存在著倫理和道德問題,而且還存在著種屬差異、生理反應(yīng)差異等問題;而體外細(xì)胞培養(yǎng)則存在著細(xì)胞失活、細(xì)胞分化等問題。因此,Organ-on-a-chip的出現(xiàn),填補(bǔ)了這些傳統(tǒng)方法的空白,為科學(xué)研究和工業(yè)應(yīng)用提供了更加可靠和有效的手段。廣州小鼠原代肝細(xì)胞鑒定