翻譯后修飾蛋白組分析:蛋白質翻譯后修飾是影響蛋白質功能并調節(jié)整個細胞過程的重要方式,幾乎在每個細胞過程中都是不可或缺的。分析和鑒定翻譯后修飾蛋白質對揭示蛋白質的功能和深入了解各種生理現象具有重要意義。大多數翻譯后修飾蛋白以低化學計量和豐度存在,這限制了在分析全細胞裂解液時對其的檢測。蛋白質是各種細胞功能比較重要的執(zhí)行者,其功能正常與否決定著生命活動能否有序、高效的進行,而其中翻譯后修飾起著至關重要的作用。翻譯后修飾改變了蛋白質中不同氨基酸殘基上的生物化學官能團,進而改變其化學性質或結構,使得蛋白質具有更為復雜的結構和更為完善的功能,實現更為精細的調節(jié)。蛋白質的翻譯后修飾過程極其復雜,已知的翻譯后修飾種類有20多種。但其中較為常見的主要是磷酸化、泛素化、SUMO化、酰(含乙酰)化、甲基化以及糖基化。蛋白翻譯后修飾方式的鑒定過程中,蛋白會首先被酶切成肽段,然后進入質譜進行分析。北京蛋白質亞硝基化修飾組學分析價格
甲基化修飾蛋白質組學技術應用領域:基礎醫(yī)學、臨床診斷:生物標志物,疾病機理機制,疾病分型,個性化治理等;生物醫(yī)藥:藥物作用機理,藥效評價,藥物開發(fā)等;農林領域:抗逆脅迫機制,生長發(fā)育機制,育種保護研究等;畜牧業(yè):肉類及乳品質研究,致病機理研究等;微生物領域:致病機理,耐藥機制,病原體-宿主相互作用研究等;海洋水產:漁業(yè)資源,海水養(yǎng)殖,漁業(yè)環(huán)境與水產品安全等。技術優(yōu)勢:采用抗體,特異性高;鑒定通量高, 一次可檢測高可達上千個甲基化修飾位點。貴陽磷酸化修飾蛋白質組學鑒定蛋白質的翻譯后修飾過程極其復雜。
泛素化修飾蛋白質組學技術原理:盡管質譜儀器的分析能力近年來有了長足的發(fā)展,但是由于蛋白翻譯后修飾化學計量值低、復雜性大,直接將蛋白組(如全細胞裂解產物,組織勻漿產物或全血清蛋白)的酶解肽段送入質譜鑒定和定量PTM是非常困難的。因此,很多翻譯后修飾的富集方法會被采用,來提高樣品中PTM肽段的豐度和相對比例,從而提高了質譜對翻譯后修飾位點的鑒定效率。研究發(fā)現在泛素化修飾的蛋白在tyrpsin的作用下都會產生diGly位點。基于這一特異性,利用針對蛋白質翻譯后修飾(PTM)基序(motif)抗體,在肽段水平上免疫親和富集帶有泛素化修飾的肽段,利用液相色譜-串聯質譜(LC-MS/MS)進行定量分析,能夠快速、準確、高通量地分析多種疾病相關信號通路關鍵節(jié)點蛋白修飾的變化,滿足創(chuàng)新性研究、生物標志物鑒定、藥物靶點篩選和評價的需求。
蛋白質翻譯后修飾介紹:蛋白質翻譯后修飾(PTMs)是指蛋白質在翻譯中或翻譯后的化學修飾過程。蛋白質翻譯后修飾(PTMs)通過給蛋白質添加磷酸酯,乙酸酯,酰胺基或甲基等官能團增加蛋白質組的功能多樣性,并影響正常細胞生物學和發(fā)病機理的幾乎所有方面。蛋白質翻譯后修飾在許多細胞過程中起著關鍵作用,如細胞分化、蛋白質降解、信號傳導和調節(jié)過程、基因表達調節(jié)以及蛋白質相互作用。蛋白質翻譯后修飾PTMs通常包括磷酸化,糖基化,泛素化,亞硝基化,甲基化,乙?;?,脂質化和蛋白水解。因此,PTM的特征(包括修飾類別和修飾位點)在細胞生物學以及疾病診斷和預防研究中至關重要。蛋白質的翻譯后修飾調控著底物的酶活性、功能以及三級結構的變化。
泛素化修飾蛋白組學研究:泛素化修飾蛋白組學是一種重要的翻譯后修飾。泛素-蛋白酶體系統(tǒng)介導了真核生物體內80%~85%的蛋白質降解。此外,泛素化修飾還可以直接影響蛋白質的活性和定位,調控包括細胞周期、細胞凋亡、轉錄調控、DNA 損傷修復以及免疫應答等在內的多種細胞活動。由于翻譯后修飾的蛋白質在生物樣本中含量低、動態(tài)范圍廣,質譜分析前需要對修飾進行富集以提高其豐度,然后利用傳統(tǒng)的定量蛋白組分析手段對富集得到的泛素化肽段樣品進行定量分析。泛素化修飾蛋白組學是一種重要的翻譯后修飾。南京泛素化修飾蛋白質組學價格
蛋白質翻譯后修飾組學的特征,雖然具有挑戰(zhàn)性,但提供了對病因學過程下的細胞功能的無價的洞察。北京蛋白質亞硝基化修飾組學分析價格
蛋白質翻譯后修飾組學:翻譯后修飾(Post-translational modification, PTM)是指對翻譯后的蛋白質進行共價加工的過程。它通過在一個或多個氨基酸殘基加上修飾基團,可以改變蛋白質的物理、化學性質,進而影響蛋白質的空間構象和活性狀態(tài)、亞細胞定位、折疊及其穩(wěn)定性以及蛋白質-蛋白質相互作用。蛋白質翻譯后修飾的豐度變化在生命活動研究中具有重大意義,異常的翻譯后修飾會導致多種疾病的發(fā)生。質譜可以分辨蛋白質修飾前和修飾后分子量上的變化,因此只要知道靶蛋白翻譯后修飾前后分子量的變化,就能對翻譯后修飾方式進行鑒定和定量。北京蛋白質亞硝基化修飾組學分析價格