魯士藍染色(Prussian Blue Staining)是一種常用的組織化學染色方法,主要用于檢測和定位組織中的鐵沉積。這種染色方法能夠?qū)⑷齼r鐵離子(Fe3?)還原為二價鐵離子(Fe2?),并與亞鐵**鉀反應生成不溶性的藍色沉淀物——普魯士藍(Prussian Blue)。這種方法在病理學、血液學和神經(jīng)科學等領域有廣泛應用。魯士藍染色的基本原理1. 鐵離子的還原:?在酸性條件下,三價鐵離子(Fe3?)被還原成二價鐵離子(Fe2?)。2. 與亞鐵**鉀反應:?二價鐵離子(Fe2?)與亞鐵**鉀(K?[Fe(CN)?])反應,生成不溶性的普魯士藍沉淀物。?反應方程式:[ \text{Fe}^{2+} + K_4[\text{Fe(CN)}_6] \rightarrow \text{Fe}_4[\text{Fe(CN)}_6]_3 + 4K^+ ]Picrosirius紅染色用于顯示心臟和腎臟中的膠原纖維。普魯士藍染色 效果
病理染色方法主要分為兩種:石蠟切片法和冰凍切片法。1.石蠟切片法:?原理:石蠟切片法通過將組織樣本固定在石蠟中,以保持其微細結(jié)構(gòu)。固定后的組織被切成極薄的切片,然后進行染色處理。?優(yōu)點:這種方法能夠提供高質(zhì)量的組織切片,適合長期保存和詳細的顯微鏡觀察。它可以顯示組織和細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu),并通過不同的染色技術(shù)揭示細胞內(nèi)的化學成分。?應用:石蠟切片法廣泛應用于病理學研究和臨床診斷,特別是在**診斷中,通過觀察組織切片中的病變細胞,病理學家可以做出準確的診斷。1.冰凍切片法:?原理:冰凍切片法是在低溫條件下快速冷卻組織樣本,使其達到一定硬度,然后進行切片。這種方法能夠較好地保存細胞膜表面和細胞內(nèi)的酶活性以及抗原的免疫活性。?優(yōu)點:冰凍切片法制作過程快捷簡便,適合需要快速診斷的情況。它能夠在短時間內(nèi)提供病理信息,幫助外科醫(yī)生在手術(shù)過程中做出及時的決策。?應用:這種方法常用于手術(shù)中的快速病理診斷,通過快速制作和染色切片,病理學家可以在手術(shù)過程中提供即時的病理評估,指導手術(shù)操作。普魯士藍染色 效果Masson染色用于顯示膠原纖維的分布。
組織病理染色切片是病理學中的一項關鍵技術(shù),用于對生物組織和細胞進行詳細的形態(tài)學和化學成分分析。這項技術(shù)主要包含兩種服務:石蠟包埋及切片和冰凍包埋及切片。以下是這兩種服務的詳細描述:1. 石蠟包埋及切片基本原理:?固定:首先使用固定劑(如福爾馬林)處理生物組織樣本,以保持其微細結(jié)構(gòu)。?脫水:通過一系列酒精梯度逐步去除組織中的水分。?透明化:使用二甲苯等透明劑將脫水后的組織透明化。?浸蠟:將透明化的組織浸入熔化的石蠟中,使石蠟滲入組織間隙。?包埋:將浸蠟后的組織放入模具中,待石蠟冷卻凝固后形成硬塊。?切片:使用石蠟切片機(如Leica HistoCore MULTICUT)將包埋好的組織切成4-5微米厚的薄片。染色方法:?HE染色:最常見的染色方法之一,使用蘇木精和伊紅染色。蘇木精使細胞核染成藍色,伊紅使細胞質(zhì)染成粉紅色。?特殊染色:根據(jù)研究目的選擇不同的特殊染色方法,如Masson三色染色、PAS染色等,以顯示特定的組織成分或結(jié)構(gòu)。?免疫組化染色:利用抗體標記特定的蛋白質(zhì)或其他生物分子,幫助確定細胞內(nèi)或組織內(nèi)的特定標志物。
病理染色切片過程中值得注意的是1%伊紅水溶液是理想的胞漿染液。要選擇好水溶性的伊紅染料使胞質(zhì)鮮艷一些,切片不但漂亮且利于觀片。(9)切片染色后的脫水要充分,每道乙醇脫水的時間不要過短,尤其是三道無水乙醇更為如此。無水乙醇要勤更換。(10)切片經(jīng)***一次無水乙醇后盡快地放人二甲苯中。在夏季室內(nèi)濕度較大的環(huán)境中更是如此。如切片在濕度大的空氣中停留時間過長就會在封片時產(chǎn)生霧氣,而不能現(xiàn)片。其原因是無水乙醇吸收了空氣中的水汽,在二甲苯中難以分離析出,當用中性樹膠封片后,二甲苯揮發(fā),而水汽留在膠中產(chǎn)生霧氣。(11)封片所使蓋玻片需大小合適、清潔。樹膠用量視蓋玻片大小而定,要求不發(fā)生溢膠或缺如。(12)不提倡切片經(jīng)無水乙醇,然后干燥,直接用中性樹膠封固。這樣會產(chǎn)生人為的細小黑點,與細胞核相似。(13)封片要在通風廚中進行,防止二甲苯污染工作間,危害技師的身體。CD34染色用于標記血管內(nèi)皮細胞。
TTC(2,3,5-三苯基四氮唑氯化物)染色是一種常用的組織學染色方法,主要用于檢測組織中的活性心肌細胞和腦組織的缺血性損傷。TTC染色在實驗研究中特別有用,尤其是在評估心肌梗死和腦卒中模型中的缺血區(qū)域。TTC染色的基本原理TTC是一種無色的水溶性化合物,在活細胞中通過線粒體內(nèi)的脫氫酶的作用被還原成紅色的不溶性產(chǎn)物——甲臜(formazan)。這種紅色產(chǎn)物只在有代謝活性的細胞中形成,而在壞死或缺血的細胞中則不會被還原,因此這些區(qū)域保持無色或白色。應用領域1. 心肌梗死模型:?在心肌梗死的研究中,TTC染色用于區(qū)分正常的心肌組織和梗死區(qū)域。正常的心肌組織會被染成紅色,而梗死區(qū)域則呈現(xiàn)白色。?通過測量梗死區(qū)域與總心肌面積的比例,可以定量分析心肌梗死的程度。特殊染色技術(shù)用于檢測特定的細胞成分。江蘇切片染色公司
病理染色切片用于顯微鏡下觀察組織結(jié)構(gòu)。普魯士藍染色 效果
染色是指用組織化學試劑或染料對組織切片進行處理,使組織中的不同成分被染上相應的顏色或產(chǎn)生不同的折射率,以利于后續(xù)的觀察和分析,幫助觀察者更好地識別和分辨細胞和組織結(jié)構(gòu)。常用的染色手段包括化學染色、免疫組化和免疫熒光。以下是幾種常見的組織切片染色方法的介紹:1.H&E染色(蘇木精-伊紅染色):?原理:蘇木精染色細胞核,呈現(xiàn)藍紫色;伊紅染色細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì),呈現(xiàn)粉紅色。?應用:***用于常規(guī)組織學和病理學檢查,幫助識別組織結(jié)構(gòu)和病變。普魯士藍染色 效果