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PBS是磷酸緩沖鹽溶液的簡(jiǎn)稱,不只偽狂犬病毒要用它稀釋,一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。原因就是它具有鹽平衡、可調(diào)整的適宜pH緩沖作用,蒸餾水不具有鹽平衡作用,可以破壞生物蛋白的結(jié)構(gòu)及生物特性;生理鹽水不具有調(diào)整pH的作用,對(duì)完整的、具有活性的物質(zhì)不能保證其在適條件下參與生物反應(yīng),所以使用PBS是。PBS也不是的,有的生物活性物質(zhì)需要的條件比PBS還要高,就需要在平衡緩沖液中加入更多的成分,維持的條件保證生物活性物質(zhì)保持其完整的特性。瓶上裝有滴管的試劑瓶稱作滴瓶。乙酸鈉緩沖液(0.2mol/L,pH3.6-5.8,無菌)
如何判斷是否是基質(zhì)效應(yīng)呢?第一種方法是采用線性稀釋,一般來講,抗原和捕獲抗體、檢測(cè)抗體之間的結(jié)合作用很強(qiáng),樣品濃度被稀釋并不影響它們的結(jié)合,而造成基質(zhì)效應(yīng)的非特異結(jié)合的力要弱很多,如果不斷稀釋樣品,非特異結(jié)合造成的干擾會(huì)逐步減少,測(cè)量值也更接近真實(shí)值。沒有基質(zhì)效應(yīng)時(shí),無論如何稀釋,測(cè)量值都和真實(shí)值吻合。而有基質(zhì)效應(yīng)時(shí),稀釋會(huì)造成非特異性結(jié)合比例的減少,測(cè)量值也相應(yīng)地產(chǎn)生很大改變。第二種方法是摻入回收率實(shí)驗(yàn),將低、中和高濃度的分析物摻入到已測(cè)定過濃度的樣本中,摻入前后實(shí)測(cè)到的濃度增加部分與摻入濃度之比就是回收率,回收率以百分比的形式呈現(xiàn)?;厥章式橛?0-120%,才符合標(biāo)準(zhǔn)。蔗糖咪唑溶液(0.4mol/L,pH7.0)固體試劑的取用:取固體量較多時(shí)用大匙,較少時(shí)用小匙。
潮霉素 B使用方法:一、 儲(chǔ)存液的配制(50mg/ml)稱取1 g 潮霉素B(CH6362)用PBS(0.01 M)溶液或去離子水溶解,定容20ml。0.22μm濾器過濾除菌,分裝于無菌凍存管,2-8℃冷藏,1年內(nèi)穩(wěn)定?;蛑苯舆x購(gòu)潮霉素B溶液(50mg/ml,CH6361)二、 工作濃度的篩選:潮霉素B用來篩選的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于開始次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定較佳篩選濃度。一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;菌類300-1000μg/mL。
檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)分析:吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的去吸,減少誤差。將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免頭和孔內(nèi)液體接觸,可使頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去(應(yīng)該是加樣的時(shí)候,板上稀釋不算的吧)。液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能(注意是平行晃動(dòng),即上下or左右)。溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)(老辦法是放入濕盒內(nèi),紗布加點(diǎn)無菌水即可)。從試劑瓶取用試劑,用左手持量筒(或試管),并用大姆指指示所需體積刻度處。
丁胺卡那霉素給藥說明:1.患者應(yīng)給予足夠的水分,以減少腎小管損害。2.燒傷患者中本品的半衰期較短(1—1.5小時(shí)),因此可能需用5—75mg/kg,每6小時(shí)一次。3.長(zhǎng)期用藥可能導(dǎo)致耐藥菌過度生長(zhǎng)。4.配制靜脈用藥時(shí),每500mg加入氯化鈉注射液,5%葡萄糖注射液或其他滅菌稀釋液100—200ml,上述溶液用于成人病例應(yīng)在30一60分鐘內(nèi),嬰兒患者于1一2小時(shí)內(nèi)緩慢輸入,并相應(yīng)減少稀釋液量。本品不可直接靜脈推注,以免產(chǎn)生神經(jīng)肌肉阻滯和呼吸克制作用。液體試劑是指藥物以一定形式分散于液體介質(zhì)中所制成的供口服或外用的液體分散體系。蔗糖咪唑溶液(0.4mol/L,pH7.0)
實(shí)驗(yàn)室分裝時(shí),固體只標(biāo)明試劑名稱,液體還須注名明濃度。乙酸鈉緩沖液(0.2mol/L,pH3.6-5.8,無菌)
科研實(shí)驗(yàn)中試劑取用應(yīng)注意事項(xiàng):1. 取用少量的液體—使用膠頭滴管a. 應(yīng)在容器的正上方垂直滴入;膠頭滴管不要接觸容器壁【防止沾污試管或污染試劑】;b. 取液后的滴管,應(yīng)保持橡膠膠帽在上,不要平放或倒置【防止液體倒流,沾污試劑或腐蝕橡膠膠帽】;c. 用過的試管要立即用清水沖洗干凈;但滴瓶上的滴管不能用水沖洗,也不能交叉使用。2. 取用一定量的液體—使用量筒a. 當(dāng)向量筒中傾倒液體接近所需刻度時(shí),停止傾倒,余下部分用膠頭滴管滴加藥液至所需刻度線;b. 讀數(shù)時(shí)量筒必須放平穩(wěn),視線與量筒內(nèi)液體的凹液面的低處保持水平。乙酸鈉緩沖液(0.2mol/L,pH3.6-5.8,無菌)