液體固體試劑正確取用試劑的方法過程:液體試劑的取用方法試劑瓶取用試劑,用左手持量筒(或試管),并用大姆指指示所需體積刻度處。右手持試劑瓶(注意:試劑標(biāo)簽應(yīng)向手心避免試劑沾污標(biāo)簽),慢慢將液體注入量筒到所指刻度。讀取刻度時,視線應(yīng)與液體凹面的低處保持水平倒完后,應(yīng)將試劑瓶口在容器壁上靠一下,再將瓶子豎直醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理,以免試劑流至瓶的外壁。如果是平頂塞子,取出后應(yīng)倒置桌上,如瓶塞頂不是扁平的,可用食指和中指(或中指和無名指)將瓶塞夾住(或放在潔凈的表面皿上),切不可將它橫置桌上。ELISA檢測試劑盒是用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎病毒抗體ELISA檢測。磷酸鹽緩沖液(pH7.8)
嚴(yán)控反應(yīng)時間。反應(yīng)時間過長,酶失活;反應(yīng)時間過短,酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結(jié)合,生成物結(jié)構(gòu)松散不牢固,容易洗掉,都可能造成假陰性。注意檢測試劑盒保存期,過保存期的試劑不能使用。評估試劑的實用性。試劑的穩(wěn)定與否,對準(zhǔn)確率的高低到頭重要。在試劑啟用前,應(yīng)進(jìn)行陰、陽對照及樣品反復(fù)比照試驗,判定試劑符合要求后方可使用。嚴(yán)格掌握顯色時間。顯色時間過短,加入終止液反應(yīng)終止后,底物結(jié)合物的量過少,易出現(xiàn)假陰性。超過顯色要求時間后顯色,應(yīng)判為假陽性,這可能與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后立即顯色,不可報陽性,這可能是本底顯色的結(jié)果。焦油紫染色液(0.1%)淋巴細(xì)胞分離液是一種根據(jù)細(xì)胞密度差異,借助離心產(chǎn)生的重力加速度,進(jìn)行細(xì)胞的分離純化的常用試劑。
用pH計測定配制好的鹽溶液的pH值,使其在6.4~7.0之間。一般鹽霧標(biāo)準(zhǔn)中要求試驗過程中的鹽霧收集液pH值在6.5~7.2之間。當(dāng)pH值不在上述范圍時,應(yīng)用氫氧化鈉(NaOH)或者冰乙酸(CH3COOH)進(jìn)行調(diào)節(jié)。氫氧化鈉可以使pH值升高,冰乙酸使pH值降低。通常只需要加入少量的即可調(diào)節(jié)pH值。在氯化鈉溶液中加入少量冰乙酸,攪拌均勻,并用pH計測量溶液的pH值,直至其為3.0-3.1之間,試驗過程中收集液的PH值應(yīng)在3.1-3.3之間。配制好乙酸鹽霧溶液后,加入氯化銅,其濃度為0.26g/L±0.02g/L(即0.205g/L±0.015g/L無水氯化銅)。調(diào)節(jié)溶液的pH值,直至其為3.0-3.1之間,試驗過程中收集液的PH值應(yīng)在3.0-3.1之間。
檢測試劑盒冷凍后的質(zhì)量會受損嗎?檢測試劑盒可以冷凍,但不能反復(fù)凍融,如果您在一周之內(nèi)做實驗,可以2-8℃保存。如果在一周至一個月之內(nèi)做實驗,可以-20℃保存。如果在一個月以上做實驗,可以-80℃保存。但是值得注意的是,凍融一次比2-8℃保存損失更大,主要是因為蛋白的降解,凍融一次蛋白都有降解。檢測試劑盒實驗標(biāo)本要求:標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。液體試劑常用量筒量取,量筒的容量為:5mL、10mL、50mL、500mL等數(shù)種。
科研實驗中試劑取用應(yīng)注意事項:1. 取用少量的液體—使用膠頭滴管a. 應(yīng)在容器的正上方垂直滴入;膠頭滴管不要接觸容器壁【防止沾污試管或污染試劑】;b. 取液后的滴管,應(yīng)保持橡膠膠帽在上,不要平放或倒置【防止液體倒流,沾污試劑或腐蝕橡膠膠帽】;c. 用過的試管要立即用清水沖洗干凈;但滴瓶上的滴管不能用水沖洗,也不能交叉使用。2. 取用一定量的液體—使用量筒a. 當(dāng)向量筒中傾倒液體接近所需刻度時,停止傾倒,余下部分用膠頭滴管滴加藥液至所需刻度線;b. 讀數(shù)時量筒必須放平穩(wěn),視線與量筒內(nèi)液體的凹液面的低處保持水平。檢測試劑盒吸附性能好。PB磷酸鹽粉劑(0.2mol/L,pH7.2-7.4)
利福平溶液怎么配制:稱取2.5g 利福平置于50ml塑料離心管中。磷酸鹽緩沖液(pH7.8)
方便快捷的LSMTM淋巴細(xì)胞分離液:早期分離白細(xì)胞的方法,會用一種化合物混合血液。此化合物能夠聚集紅細(xì)胞,只輕微影響白細(xì)胞。通過離心,紅細(xì)胞由于密度增加而聚集沉淀,同時從離心管內(nèi)上層收集白細(xì)胞。后來,B?yum提出的以Ficoll?-甲泛影鈉溶液為介質(zhì)進(jìn)行離心。稀釋的血液在Ficoll?-甲泛影鈉溶液中分層,之后低速短時離心。紅細(xì)胞和多形核粒細(xì)胞沉降到管底,單個淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和血小板可以從兩個分層間的分界面處收集。而MP Biomedicals出品的淋巴細(xì)胞分離液,不同于B?yum的配方,由于LSM中含有聚蔗糖和泛影酸鹽,能夠形成特定的密度梯度1.077 g/mL(20℃)。只需要將血液樣品輕置于淋巴細(xì)胞分離液上層,經(jīng)過簡單的一步離心(400 xg,30分鐘),就能夠分離獲得淋巴細(xì)胞。磷酸鹽緩沖液(pH7.8)