配制ph計(jì)的3mol/L的KCL溶液 ph計(jì)的ph電極在使用前都是被護(hù)套里的保護(hù)液保護(hù)著,是為了保持其原有的ph電勢平衡不變,為了測量時(shí)會更加精確。這里面就是PH電極的保護(hù)液,即 3mol/L的KCL溶液。所以要自己學(xué)會如何配置,使ph電極浸泡在保護(hù)液里,這樣就能快速回復(fù)其活性,又能很好的測量了。配制ph計(jì)保護(hù)液——3mol/L的KCL溶液步驟: 1、計(jì)算:KCL摩爾質(zhì)量74.5g/moL, 則KCL質(zhì)量=3mol×74.5g/mol=223.5g; 2、 稱量:用分析天平稱量KCL=223.5g,注意分析天平的使用; 3、 溶解:在燒杯中用100ml蒸餾水使之完全溶解,并用玻璃棒攪拌; 4、 轉(zhuǎn)移,洗滌:把溶解好的溶液移入1000ml容量瓶,用容量瓶瓶口較細(xì)的。青霉素和鏈霉素的終濃度分別為100 U/mL和100 U/mL,置于4℃冰箱保存。Taq稀釋緩沖液
液體試劑是指藥物以一定形式分散于液體介質(zhì)中所制成的供口服或外用的液體分散體系。具有分散度大,吸收快;給藥途徑多,可以內(nèi)服,外用;易于分劑量,服用方便;減少某些藥物的刺激性等優(yōu)點(diǎn)。是一種應(yīng)用普遍的制劑類型。液體試劑(liquid pharmacokinetical preparations)是指藥物分散在液體分散介質(zhì)中組成的內(nèi)服或外用的液態(tài)制劑。液體試劑也是其他劑型(如注射劑、軟膠囊、軟膏劑、栓劑、氣霧劑等)的基礎(chǔ)劑型,在這些劑型中,普遍使用液體試劑的基本原理,因此液體試劑在藥劑學(xué)上的應(yīng)用具有普遍意義。Taq稀釋緩沖液挑選ELISA檢測試劑盒的方法:靈敏度。反應(yīng)的是檢測試劑盒檢出被檢物質(zhì)的低量的才行。
檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)分析:洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干(報(bào)紙就免了吧?。O匆翰粔驎r(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存(洗液先用現(xiàn)配不費(fèi)多少事的)。底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配(同前,避光?。z測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸(終止液為硫酸,小心毀容)。待檢樣品要澄清,否則會影響結(jié)果。溫浴時(shí)間應(yīng)遵守檢測試劑盒規(guī)定。應(yīng)盡量做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
人外周血單核細(xì)胞(PBMC)分離:PBMC(peripheral blood mononuclear cell),外周血單個核細(xì)胞,顧名思義,其主要細(xì)胞類型為血液里邊具有單個核的細(xì)胞,主要包括淋巴細(xì)胞(T/B),單核細(xì)胞,吞噬細(xì)胞,樹突狀細(xì)胞和其他少量細(xì)胞類型。其中淋巴細(xì)胞占很大一部分。分離PBMC的主要目的是為了將多核細(xì)胞和紅細(xì)胞去除,收集單個核細(xì)胞,從而能夠很方便地模擬體外的血液免疫環(huán)境。臍帶血單個核細(xì)胞(MNC)分離臍血是指胎兒出生時(shí)臍帶內(nèi)及胎盤近胎兒一側(cè)血管內(nèi)的血液,含有豐富的干細(xì)胞和祖細(xì)胞,主要包含造血干細(xì)胞和間充質(zhì)干細(xì)胞。臍血MNC能治好多種病種,包括:神經(jīng)系統(tǒng)疾病,呼吸系統(tǒng)疾病,消化系統(tǒng)疾病,心臟疾病,內(nèi)分泌疾病以及小兒腦癱等。用于簡便、高效地提取臍血單個核細(xì)胞。氨芐青霉素溶液配置:0.22μm濾膜過濾除菌,小份分裝(1ml/管)后,置于-20℃保存。
潮霉素 B使用方法:一、 儲存液的配制(50mg/ml)稱取1 g 潮霉素B(CH6362)用PBS(0.01 M)溶液或去離子水溶解,定容20ml。0.22μm濾器過濾除菌,分裝于無菌凍存管,2-8℃冷藏,1年內(nèi)穩(wěn)定?;蛑苯舆x購潮霉素B溶液(50mg/ml,CH6361)二、 工作濃度的篩選:潮霉素B用來篩選的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于開始次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定較佳篩選濃度。一般而言,哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;菌類300-1000μg/mL。每一種試劑都貼有標(biāo)簽以表明試劑的名稱、濃度、純度。碳酸氫鈉溶液(7.5%)
殺滅曲線的建立:根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適的濃度梯度。Taq稀釋緩沖液
Tricine加樣緩沖液(2×)使用說明書 說明書:①試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。②實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。③使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。④加入試劑的順序,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。⑤按說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。Tricine加樣緩沖液(2×):產(chǎn)品規(guī)格:5ml。分類:電泳蛋白。儲存條件:—20℃,12個月。用途:又稱三羥甲基甘氨酸加樣緩沖液,Tris-tricine緩沖系統(tǒng)的PAGE電泳。注意事項(xiàng):主要由Tris-HCl、DTT、G-250等組成。Taq稀釋緩沖液