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大小鼠肺動(dòng)脈高壓PH動(dòng)物模型多少錢?

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-07-29

大小鼠肺動(dòng)脈高壓PH動(dòng)物模型多少錢?方法不同價(jià)格不同


01 野百合堿誘導(dǎo)模型

野百合堿(MCT)是從野百合種子中提取的一種吡、咯、烷生物堿,它能夠引起肝毒性和肺動(dòng)脈高壓。


MCT模型的特征在于內(nèi)皮細(xì)胞凋亡和血管周圍炎癥,這與人肺動(dòng)脈高壓發(fā)病的生理病理機(jī)制類似。MCT模型能夠更好地幫助我們了解肺血管重塑的過程以及炎癥反應(yīng)在其發(fā)病機(jī)制的重要作用。且模型具有技術(shù)簡單、可重復(fù)、時(shí)間短、穩(wěn)定性好、低成本等優(yōu)點(diǎn)。

造模步驟

1、將雄性SD大鼠(200~250g)隨機(jī)分為空白對照組和野百合堿實(shí)驗(yàn)組。


2、將野百合堿組大鼠一次性皮下注射MCT (60mg/kg體重),根據(jù)體重向?qū)φ战M大鼠注射等量的無菌生理鹽水。


3、將兩組大鼠置于相同環(huán)境SPF飼養(yǎng)室中,保證飲水和糧食,自由采食, 并每天檢查一次。


4、分別在注射完MCT后兩周和四周取材,每個(gè)時(shí)間點(diǎn)各取出6只進(jìn)行 采樣表征研究。


超聲檢測結(jié)束后,右心導(dǎo)管檢測顯示野百合堿肺動(dòng)脈高壓組右心室收縮壓較對照組明顯升高;隨后稱量實(shí)驗(yàn)大鼠右心室質(zhì)量、左心室及室間隔質(zhì)量,結(jié)果顯示與對照組相比,野百合堿肺動(dòng)脈高壓組 RV/(LV +S) 比值升高。



實(shí)驗(yàn)組大鼠肺組織 HE 染色檢測


相對于對照組,模型組大鼠肺組織形態(tài)學(xué)指標(biāo)出現(xiàn)明顯變化,出現(xiàn)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷,細(xì)胞分布不均,動(dòng)脈管壁明顯增厚伴玻璃樣變,小動(dòng)脈管腔狹窄,肌化明顯,肺組織有大量炎性細(xì)胞浸潤,肺血管密度變小。


02 低氧誘導(dǎo)模型


低氧性肺動(dòng)脈高壓是臨床常見的一類,常由慢性呼吸系統(tǒng)疾病,如慢性阻塞性肺疾病、睡眠呼吸暫停、高原病等導(dǎo)致。慢性缺氧會(huì)引起內(nèi)皮細(xì)胞損傷,以致相關(guān)舒縮因子失衡,增加肺血管收縮反應(yīng)并促進(jìn)血管重塑,*終發(fā)展為肺動(dòng)脈高壓。近年來缺氧性肺血管收縮和肺動(dòng)脈重塑的研究主要側(cè)重于內(nèi)皮素-1、一氧化氮、環(huán)氧合酶和腺嘌呤核苷酸途徑。


大小鼠造模步驟


1、將低氧箱氧氣濃度預(yù)設(shè)為10%,選擇成年雄性C57小鼠/SD大鼠 作為本次試驗(yàn)的對象,分別設(shè)置空白組和低氧組 。

2、將低氧組小鼠/大鼠置于低氧箱中,并打開籠蓋以便充分保證箱內(nèi)空氣循環(huán),保證充足飲食。并在箱內(nèi)放置除濕盒和鈉石灰,以保證箱內(nèi)空氣正常濕度和CO2濃度。

3、每天檢查一次小鼠狀況,每周更換墊料、除濕盒和鈉石灰。對照組動(dòng)物置于相同環(huán)境常氧飼養(yǎng)室,除氧氣條件外,其他環(huán)境相同。

4、保證12h定時(shí)光照和黑 暗環(huán)境,分別在缺氧暴露三周(大鼠)和四周(小鼠)后,將動(dòng)物取出,對動(dòng)物肺動(dòng)脈高壓病理發(fā)展進(jìn)行評價(jià)。


>>>>小鼠肺小動(dòng)脈病理HE染色結(jié)果


與空白組比較,模型組小鼠的肺小動(dòng)脈壁明顯增厚,管腔狹窄,組織間隙變小,血管周圍有明顯炎性細(xì)胞浸潤,有血管重塑表現(xiàn);WT%、WA%均***升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。


>>>>小鼠免疫熒光法檢測肺組織 α-SMA 蛋白表達(dá)水平


與空白組比較,模型組小鼠肺組 織的 α-SMA 熒光強(qiáng)度明顯增強(qiáng),肺小動(dòng)脈平滑肌層增厚;完全肌化肺小血管比例***升高,差異有統(tǒng) 計(jì)學(xué)意義。


>>>>大鼠肺小動(dòng)脈病理HE染色結(jié)果


隨低氧時(shí)間的延長大鼠肺小動(dòng)脈壁逐漸增厚( 圖中黑色箭頭所示) ,尤其是中間平滑肌細(xì)胞增殖明顯。


>>>>大鼠右心室比重和平均肺動(dòng)脈壓


隨著低氧處理時(shí)間的延長大鼠平均肺動(dòng)脈壓( m***) 明顯增加,且右心室占全心的比重 RV/( LV+S) 也明顯增加。


03 肺栓塞模型


肺栓塞(pulmonary embolism,PE)是由內(nèi)源或外源性栓子阻塞肺動(dòng)脈,引起肺循環(huán)和右心功能障礙的臨床綜合征 。

慢性血栓栓塞型肺動(dòng)脈高壓( chronic thrombo embolic pulmonary hypertension,CTEPH)是PH 的一種獨(dú)特形式,是急性肺栓塞或肺動(dòng)脈原位血栓形成的長期后果,表現(xiàn)為肺動(dòng)脈增大、內(nèi)膜受損及周圍血管阻塞 。


操作方法:注射血栓或者異物。


血栓模型:是從自體或供體(異源)動(dòng)物獲得血液樣本在體外凝結(jié)成血栓,然后再將其注入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中

注射血栓可較好表現(xiàn)急性肺栓塞的病理生理情況,但是由于離體血凝塊的大小和體積均不規(guī)則,難以保證肺血管阻塞的程度和持續(xù)性,而且自體PE模型還需要進(jìn)行2次手術(shù),在大鼠、兔或豬中會(huì)產(chǎn)生循環(huán)休克,操作復(fù)雜。


注射異物:將惰性材料注入頸靜脈的方法來模擬肺栓塞,包括大鼠、兔、狗、羊、貓、豬都可以建立慢性血栓栓塞肺動(dòng)脈高壓模型。


將體質(zhì)量(35-0-500g的大鼠,通過右頸靜脈注射聚苯乙、烯、微球(15-25 μm,130萬-195萬個(gè)珠/100g)。該方法可以控制進(jìn)入肺部的微球數(shù)量,較準(zhǔn)確地增加肺血管阻力,還避免發(fā)生免疫反應(yīng)、大鼠纖維蛋白溶解率高等問題。


04 手術(shù)分流模型


外科分流術(shù)主要分為兩種: 大中動(dòng)脈與肺動(dòng)脈之間的分流,動(dòng)靜脈之間的分流。


由于大、中動(dòng)脈壓力大于肺動(dòng)脈壓力,在大、中動(dòng)脈與肺動(dòng)脈之間建立分流可以使體循環(huán)的血液分流肺循環(huán),從而使得肺循環(huán)血液增多。該造模方法多選取豬、羊、犬等大型動(dòng)物。



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