磁珠法核酸提取過程中的常見誤區(qū)--洗滌次數越多,洗滌效果越好提取得到的核酸雜質過多時,使用者會考慮多進行幾次洗滌,以得到更為純凈的核酸。增加洗滌次數確實有利于提純核酸,但考慮到每次洗滌都會損失一定量的核酸,且增加了核酸斷裂水解的可能性,所以一般來說洗滌次數控制在2~4次為宜。商業(yè)化核酸提取試劑盒都是經過嚴格驗證的,在使用時嚴格按照說明書進行洗滌即可,隨意修改洗滌順序、洗滌磁珠、洗滌液的量,很可能會是核酸質量下降。南京正揚生物有自動化核酸提取試劑盒嗎?南京重組腺相關病毒核酸提取原理
磁珠法核酸提取產品,磁珠如何與核酸結合實現提取功能?核酸作為一種生物大分子,之所以能夠在水溶液中穩(wěn)定分散不沉淀,是由于三種非共價作用力的存在:(1)靜電相互作用(2)范德華力(3)氫鍵。核酸分子具有多個磷酸基團,呈現高度負電性,分子間互相排斥從而避免發(fā)生團聚。此外,核酸分子在水溶液中通過氫鍵與范德華力結合了大量的水分子在其周圍,形成一個水化層,也阻止了分子間的聚集。因此,要使得核酸分子結合到磁珠表面,就必須削弱上述作用力,屏蔽溶液中的靜電斥力,同時破壞核酸分子表面的水化層,使其能夠與磁珠表面相接觸,進而產生吸附。寧波宿主細胞殘留DNA提取常見問題宿主細胞核酸提取能用于支原體提取嗎?
CHO宿主細胞殘留DNA檢測中,磁珠法核酸提取回收率偏低的原因有哪些?樣品問題:樣品存在抑制;操作原因:①洗滌液配制操作,外加有機溶劑的體積或純度不正確;②漏加或少加試劑組分;③磁珠保存不當,冷凍過;④在提取過程中將樣品管高速離心或長時間離心;⑤磁力架不匹配,磁性較弱;自動化核酸提取設備原因:①自動化核酸提取設備的磁分離方式設計有問題、設備的磁場弱;②使用自動化設備進行核酸提取時所用的參數設置不合適;其他原因:①耗材非低吸附耗材;②耗材中有抑制物;③實驗室存在抑制物;
磁珠是利用一定的組織包被中心四氧化三鐵而形成的可以被磁鐵吸附,同時有能通過表面包被物吸附(結合)核酸的小珠子。小珠子的用途很大!它可以實現核酸提取的自動化和高通量化,避免人工操作引起的差異及錯誤,結果穩(wěn)定,重復性好。磁珠一般分為三層結構:蕞內層:為支持結構,如聚苯乙烯做的內核;中間層:磁層,作用是與磁力架上的磁鐵相互吸附,從而分離核酸與反應溶液,材料通常為Fe3O4;蕞外層:修飾層,一般為帶負電的基團;南京正揚自主研發(fā)的核酸提取試劑盒的原理是什么?
加標回收率可用于評估核酸提取相關產品的性能,加標回收包括空白加標回收和樣品加標回收??瞻准訕嘶厥眨涸跊]有被測物質的空白樣品基質中加入定量的標準物質,按樣品的處理步驟分析,得到的結果與理論值的比值即為空白加標回收率。樣品加標回收:相同的樣品取兩份,其中一份加入定量的待測成分標準物質;兩份同時按相同的分析步驟分析,加標的一份所得的結果減去未加標一份所得的結果,其差值同加入標準物質的理論值之比即為樣品加標回收率。加標回收率的理論公式:加標回收率=(加標試樣測定值-試樣測定值)÷加標量×100%。支原體核酸提取試劑盒對細胞量有要求嗎?寧波rcAAV核酸提取操作流程
宿主細胞殘留核酸提取試劑盒。南京重組腺相關病毒核酸提取原理
南京正揚生物自主研發(fā)生產的宿主細胞殘留核酸提取試劑盒利用磁珠法的原理,提取純化生物制品中殘留的微量宿主細胞DNA/RNA,產品使用事項包括以下幾點:1.磁珠懸浮液嚴禁冷凍和離心,以免損傷磁珠,磁珠使用前務必充分混勻。2.裂解液結合液、洗滌液A、洗滌液B在低于10℃時可能出現白色結晶,若出現沉淀,請37℃水浴重新溶解后使用。3.請盡量在完成樣本純化處理當天進行后續(xù)的DNA檢測,以保證檢測結果的準確性。4.請務必仔細閱讀本試劑盒說明書,并嚴格按照操作步驟完成操作。南京重組腺相關病毒核酸提取原理