本發(fā)明涉及細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域，特別涉及一種血小板裂解液的制備方法及其應(yīng)用，用于替代動(dòng)物來(lái)源的血清，為間充質(zhì)干細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn)提供的營(yíng)養(yǎng)。該制備方法包括：將血小板在20～24℃振蕩保存1～5d,采用反復(fù)凍融法和超聲法進(jìn)行處理,離心,收集上清液,去除纖維蛋白,獲得血小板裂解液.本發(fā)明提供的血小板裂解液的制備方法可明顯提高血小板裂解液中細(xì)胞因子含量,且可進(jìn)行細(xì)胞因子的定量平衡,有利于減少產(chǎn)品批間的差異,可達(dá)到穩(wěn)定的促進(jìn)人源性細(xì)胞生長(zhǎng)的作用。更多關(guān)于血小板裂解液相關(guān)產(chǎn)品信息，歡迎咨詢(xún)上海曼博生物！人源血小板裂解液適合應(yīng)用在多種來(lái)源的間充質(zhì)原代干細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程。灝洋血小板裂解液授權(quán)代理商

血小板裂解液主要成分為人血小板裂解液,含有較高濃度的生長(zhǎng)因子等細(xì)胞培養(yǎng)必須物質(zhì),在體外細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞zhiliao中可代替胎牛血清和自體血清。人源血小板裂解液就是直接將人類(lèi)來(lái)源血小板細(xì)胞經(jīng)過(guò)連續(xù)的反復(fù)凍融裂解后，進(jìn)一步提純這些血小板脫顆粒的商品。血小板裂解液（platelet lysate，PL）是自體或異體血小板富集物經(jīng)細(xì)胞裂解后的產(chǎn)物，已經(jīng)被諸多研究推薦作為胎牛血清（fetal bovine serum，F(xiàn)BS）的替代品，應(yīng)用于間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cells，MSC）的大規(guī)模擴(kuò)增培養(yǎng)。 更多關(guān)于Sexton人血小板裂解液的相關(guān)產(chǎn)品問(wèn)題，歡迎咨詢(xún)上海曼博生物！達(dá)科為血小板裂解液沉淀哪家公司可以進(jìn)口血清替代?

使用胎牛血清（FBS）和MSC的離體擴(kuò)增其他動(dòng)物衍生的已氣餒由監(jiān)管機(jī)構(gòu)，以減少發(fā)送朊病毒和其他動(dòng)物傳染病的危險(xiǎn)，并且避免在所述異種免疫反應(yīng)主辦。然而，由于缺乏FBS制劑標(biāo)準(zhǔn)化導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)性能 不一致性和FBS生產(chǎn)已經(jīng)到來(lái)，因?yàn)閯?dòng)物福利問(wèn)題很初提出血小板裂解液（PL）作為動(dòng)物血清的替代物，用于由Doucet等人體外擴(kuò)增MSC。 包含在PL的生物活性分子和生長(zhǎng)因子支持的MSC從骨髓（BM） 導(dǎo)出的膨脹，臍帶血（UCB） ，和脂肪組織（AT） ，與FBS相比顯示出有利的結(jié)果。此外，間充質(zhì)干擴(kuò)大了與PL-富集介質(zhì)已被用于zhiliao患有jisu難治性急性移植物抗宿主病（GVHD）造血干細(xì)胞移植后患者和患有幾種骨科疾病的患者，主要是中度至重度的膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎 。

為了排除肝素對(duì)于細(xì)胞增長(zhǎng)的抑制作用可能與防腐劑（這里采用芐醇作為防腐劑添加到UFH或LMWH中）有關(guān)。我們對(duì)不添加防腐劑的肝素進(jìn)行了相同實(shí)驗(yàn)，結(jié)果對(duì)AT-MSC和BM-MSC細(xì)胞增殖抑制趨勢(shì)相同。在隨后的傳代培養(yǎng)到3代中的累積的群體中，兩種肝素UFH和LMWH對(duì)MSC增殖的影響也變得明顯，血小板裂解液中肝素濃度較低時(shí)累積細(xì)胞群體倍增指數(shù)(cPD) 較高。CFU-F的塑料粘附生長(zhǎng)性能是MSCs培養(yǎng)的先決條件，在96孔板中通過(guò)有限稀釋的方法結(jié)合泊松統(tǒng)計(jì)進(jìn)行CFU-F試驗(yàn)，顯示集落形成率CFU-F在高濃度UFH時(shí)中度降低，而在高濃度Enoxaparin（LMWH）時(shí)明顯降低。這些結(jié)果表明高濃度的LMWH減少了CFU-F的形成，這與已報(bào)道的其他研究結(jié)論一致。血小板裂解液(platelet lysate,PL)是自體或異體血小板富集物經(jīng)細(xì)胞裂解后的產(chǎn)物。

在已有的上百篇文獻(xiàn)中，報(bào)道了Sexton公司的Stemulate和nliven已經(jīng)被確定為間充質(zhì)干細(xì)胞MSC的良好生長(zhǎng)補(bǔ)充劑，并且支持各種組織來(lái)源包括脂肪、骨髓、軟骨、牙髓和臍帶中的MSCs的擴(kuò)增培養(yǎng)。Sexton公司標(biāo)準(zhǔn)型和PR處理的血小板裂解液始終優(yōu)于輻照胎牛血清，幫助用戶(hù)優(yōu)化MSCs的生產(chǎn)。用戶(hù)通過(guò)使用Sexton公司的血小板裂解液培養(yǎng)基生長(zhǎng)劑，降低時(shí)間和花費(fèi)的成本，可帶來(lái)更快的倍增時(shí)間，既可以減少潔凈室生產(chǎn)時(shí)間，也可以減少試劑的使用量，實(shí)現(xiàn)總成本的降低。更多關(guān)于人血小板裂解液/血清替代相關(guān)產(chǎn)品信息，歡迎咨詢(xún)上海曼博生物！也歡迎關(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-bio血小板裂解液的添加比例是多少？臨床用血小板裂解液中國(guó)代理權(quán)

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MSCs培養(yǎng)擴(kuò)增的過(guò)程優(yōu)化包含了很多關(guān)鍵變量，目的是為有效的MSCs生產(chǎn)篩選出一個(gè)穩(wěn)健和可重復(fù)的擴(kuò)增培養(yǎng)過(guò)程。同樣用戶(hù)必須考慮此過(guò)程對(duì)其總體生產(chǎn)成本的影響。Sexton的hPL解決方案減少了所需細(xì)胞數(shù)量的翻番時(shí)間，同時(shí)比較大限度地減少原材料的使用，比較終減少了細(xì)胞產(chǎn)品制造工藝的總成本。此外，生產(chǎn)材料的成分和結(jié)構(gòu)的一致性不僅有利于細(xì)胞生產(chǎn)性能，而且是CGMP生產(chǎn)的一個(gè)明確目標(biāo)。減少生產(chǎn)工藝涉及成分的種類(lèi)不僅提高成功率,還減少失敗的風(fēng)險(xiǎn)和隨后的調(diào)查工作量。灝洋血小板裂解液授權(quán)代理商