外泌體可以傳遞生物分子，例如蛋白質(zhì)、DNA、mRNA等，影響接收器細(xì)胞的表現(xiàn)型和生理活性。外泌體可通過特定的組裝和功能修飾，提高其對(duì)宿主細(xì)胞的選擇性靶向性。核酸是在外泌體中發(fā)現(xiàn)的另一組主要顆粒，即DNA和RNA，它們可以在細(xì)胞中發(fā)揮功能作用。在源自小鼠和人類肥大細(xì)胞的外泌體中發(fā)現(xiàn)了約1300種mRNA、121種miRNA和>100種小RNA，但未檢測(cè)到DNA和rRNA。在外泌體中發(fā)現(xiàn)的其他miRNA是lin-4和let-7，以及母乳中的miR-181a和miR-155。小鼠外泌體對(duì)人類細(xì)胞的刺激可以導(dǎo)致人類細(xì)胞中小鼠蛋白質(zhì)的合成。此外，外泌體和受體細(xì)胞的mRNA譜不同，表明mRNA被主動(dòng)分選為MVB。外泌體通過它們攜帶的間質(zhì)基質(zhì)組分，在宿主細(xì)胞中誘導(dǎo)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化等重要的生物學(xué)反應(yīng)。武漢快速提取外泌體

外泌體分離方法之尺寸排阻層析法：尺寸排阻層析法也被稱為凝膠過濾層析法，這種方法是基于凝膠孔的大小和外泌體的大小，大于凝膠孔徑的顆粒被洗脫；反之，小于凝膠孔徑的顆粒將被抑制。凝膠過濾層析分離法總體上能獲得較高的純度和產(chǎn)量。建議與超濾相結(jié)合，這種方法可提供更少的蛋白質(zhì)污染和更高的外泌體回收率。凝膠過濾層析分離法的缺點(diǎn)是凝膠的成本過高。外泌體分離方法之聲學(xué)流體分離：聲學(xué)流體分離技術(shù)利用聲場(chǎng)根據(jù)粒子的大小、密度和可壓縮性來分離粒子。生物樣品在此過程中不會(huì)受到損壞，并且分離的本身是非接觸式、高效的和無標(biāo)記的。武漢快速提取外泌體外泌體的構(gòu)成：外泌體富含膽固醇和鞘磷脂。

CHO細(xì)胞外泌體的分離和表征：CHO細(xì)胞是一種普遍用于生物制藥蛋白質(zhì)生產(chǎn)的宿主。CHO細(xì)胞中分離外泌體主要采用聚合物的沉淀(PBP)技術(shù)從分批培養(yǎng)中分離和富集細(xì)胞外泌體囊泡。分離后的外泌體可以通過多種方法來檢測(cè)和表征分離的囊泡，這些分析包括動(dòng)態(tài)光散射(DLS)和Zeta電位測(cè)量、電子顯微鏡(EM)和外泌體標(biāo)記物分析、RNA和脂質(zhì)分析等。根據(jù)制造商的指南，使用TEI總外泌體分離試劑盒（Invitrogen）從培養(yǎng)基中分離外泌體。將細(xì)胞培養(yǎng)基以2000×g離心30分鐘以去除細(xì)胞和任何碎片；隨后將上清液小心移至離心管管中，加入0.5倍體積的TEI試劑，充分混合并在4°C下孵育過夜。然后將樣品在4°C下以10,000×g離心1小時(shí)，然后在棄去上清液后，將富含外泌體的顆粒重新懸浮在75μlPBS緩沖液中。然后將樣品儲(chǔ)存在-20°C下，直到需要進(jìn)行后續(xù)分析。

外泌體通常被認(rèn)為是細(xì)胞間信號(hào)分子，包含許多蛋白質(zhì)、核酸、細(xì)胞因子、轉(zhuǎn)錄因子和其他細(xì)胞來源的顆粒。外泌體不只可以向局部環(huán)境傳遞信息，還可以向距離很遠(yuǎn)的細(xì)胞和組織傳遞信息。這可能作為一般信號(hào)和通信通路，但也可能參與致病基因擴(kuò)散和惡性疙瘩進(jìn)一步惡化。迄今為止，已證實(shí)外泌體存在于體液中，例如羊水、血清、母乳、附睪液、唾液、尿液、腹水和胸腔積液、支氣管肺泡灌洗液、滑液和體外細(xì)胞培養(yǎng)上清液中。細(xì)胞排出的外泌體也可作為去除不必要的蛋白質(zhì)和核酸的一種方式，例如，在細(xì)胞成熟（網(wǎng)織紅細(xì)胞）或排泄系統(tǒng)（腎的內(nèi)臟和小管）期間的外泌體。外泌體與胚胎學(xué)密切相關(guān)，參與人類胚胎發(fā)育和胚胎起始過程中的各種調(diào)節(jié)作用。

外泌體分離方法之親和層析分離法：在親和層析分離法方面，主要使用凝集素和合成Vn(venceremin)肽。凝集素將結(jié)合存在于外泌體表面的糖基化蛋白質(zhì)，從而使外泌體沉淀。Vn肽分離技術(shù)基于其對(duì)含有HSP的細(xì)胞外顆粒的高親和力。然而，這種方法比較容易使提取物被膜表面上含有上述標(biāo)記物的細(xì)胞和其他顆粒污染。外泌體分離方法之介電泳分離法：介電泳分離法主要利用不同大小的粒子在不均勻電場(chǎng)中的位置差異。外泌體被吸引到高電區(qū)域，而較大的顆粒將位于低電區(qū)域。該方法速度快，適合用于高通量篩選，但缺點(diǎn)是需要加熱。外泌體在疙瘩微環(huán)境中的參與，反映了其具有的高度的異質(zhì)性和復(fù)雜性。泉州組織提取外泌體分離多少錢

外泌體的轉(zhuǎn)移涉及細(xì)胞因子、基質(zhì)降解酶和細(xì)胞外基質(zhì)重塑等多種調(diào)節(jié)步驟。武漢快速提取外泌體

分離外泌體的方法之靜水過濾透析：它主要有助于將整個(gè)EV從高度稀釋的溶液中分離出來，而無需超速離心過程。280Musante等人展示了用于從尿液樣本中分離EV的HFD方案。在HFD的初始步驟中，用2000×g離心樣品以去除細(xì)胞，細(xì)菌和碎片作為沉淀。然后，將上清液保存在透析膜（1000kPa）中，1000kPa或更小的顆粒相應(yīng)地以靜水壓差通過膜。較后，通過離心將外泌體囊泡沉降40,000×g。在HFD分離過程中，外泌體級(jí)分在早期階段恢復(fù)，與多步離心相比，這被認(rèn)為是一個(gè)優(yōu)勢(shì)。與超速離心相比，HFD也被認(rèn)為是一種有效的方法。武漢快速提取外泌體