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外泌體可以傳遞生物分子,例如蛋白質(zhì)、DNA、mRNA等,影響接收器細(xì)胞的表現(xiàn)型和生理活性。外泌體可通過特定的組裝和功能修飾,提高其對宿主細(xì)胞的選擇性靶向性。核酸是在外泌體中發(fā)現(xiàn)的另一組主要顆粒,即DNA和RNA,它們可以在細(xì)胞中發(fā)揮功能作用。在源自小鼠和人類肥大細(xì)胞的外泌體中發(fā)現(xiàn)了約1300種mRNA、121種miRNA和>100種小RNA,但未檢測到DNA和rRNA。在外泌體中發(fā)現(xiàn)的其他miRNA是lin-4和let-7,以及母乳中的miR-181a和miR-155。小鼠外泌體對人類細(xì)胞的刺激可以導(dǎo)致人類細(xì)胞中小鼠蛋白質(zhì)的合成。此外,外泌體和受體細(xì)胞的mRNA譜不同,表明mRNA被主動分選為MVB。外泌體膜表面富含糖基化蛋白和糖基化脂質(zhì),這種糖基化在外泌體相互作用和定位中具有重要作用。南京尿液外泌體分離穩(wěn)定性好
外泌體的作用機理:細(xì)胞受損從而會引起各種肌膚問題,如痘痘、斑、細(xì)紋、毛孔、紅血絲等等,外泌體相當(dāng)于人體內(nèi)細(xì)胞的信使,是將沒有細(xì)胞核的細(xì)胞,有效的作用于受損細(xì)胞,從而來補充受損細(xì)胞的完整性,來改善肌膚問題。外泌體與中胚層相比的優(yōu)勢:外泌體屬于內(nèi)源性抵衰,作用于細(xì)胞,從源頭解決皮膚問題,修復(fù)與再生細(xì)胞,重返20-25歲時期的細(xì)胞活力,恢復(fù)年輕態(tài),光速起效(2-10天,白,嫩,滑,閉口消失),極速恢復(fù)(36小時-72小時,肉眼可見速度在愈合)提高皮膚疫力,相當(dāng)于抵老“疫苗”(現(xiàn)有產(chǎn)品解決的是當(dāng)下和延緩衰老,而外泌體聚焦的是現(xiàn)在與未來)。南京尿液外泌體分離穩(wěn)定性好外泌體被發(fā)現(xiàn)在各種生物體中,包括哺乳動物、植物和微生物。
外泌體分離方法優(yōu)缺點對比:差速離心法:差速離心法仍是實驗中常用的外泌體分離技術(shù)。主要步驟如下:1.使用離心機低速離心來去除細(xì)胞與細(xì)胞碎片。2.而后增加轉(zhuǎn)速通過離心來消除樣本中較大的細(xì)胞囊泡。3.再使用高速離心機進行高速離心,通過離心沉淀的方式提取外泌體。在這里,需要注意的是生物流體的粘度與分離的外泌體的純度有較強的相關(guān)性。所以,對于高粘度的生物樣品需要超速離心機進行較長時間的離心操作。外泌體分離方法之免疫分離法:免疫芯片方法基于表面外泌體受體,用于根據(jù)來源分離外泌體。獲得的外泌體可直接分析或用于DNA或總RNA分離。外泌體胞內(nèi)蛋白可用作分離外泌體的特異性標(biāo)志物。此外,基于ELISA的ExoTEST也可以用于有效分離外泌體。其原理是:使用涂有外泌體抗體的ExoTEST板,可以從各種生物體液中分離出外泌體。該方法適用于常見和細(xì)胞類型特異性外泌體蛋白的檢測、分析和定量。
什么是外泌體?外泌體的作用。簡單來說,它就是我們皮膚肌底細(xì)胞的分泌物,但是這個分泌物是除了細(xì)胞核外,把其他所有的營養(yǎng)物質(zhì)都能涵蓋,所以它是取之于人類細(xì)胞用之于人類細(xì)胞,成分安全。外泌體不是干細(xì)胞,是干細(xì)胞較精華的部分,生物**為了獲取外泌體囊泡,將臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞進行分離、純化、培養(yǎng)、增殖等一系列復(fù)雜先進工藝制備而成的外泌體混懸液,他是干細(xì)胞得以存活的精華,細(xì)胞是靠它生長的,**對干細(xì)胞的獲取很容易的,但外泌體就比較難了,全球醫(yī)學(xué)**都在為研究外泌體的醫(yī)學(xué)應(yīng)用而付出努力,目前只有少數(shù)國家的細(xì)胞庫能夠成功獲取這一成果,其含有許多信號蛋白,核糖核酸,細(xì)胞生命DNA的密碼,一個細(xì)胞里95%是水,還有5%就是外泌體成分,其復(fù)雜特殊性比干細(xì)胞的培養(yǎng)時間長四五倍,精貴了一百倍他是干細(xì)胞的精華部分,保證了“干細(xì)胞”的所有功能并且具備干細(xì)胞未具備的功能———它能準(zhǔn)時抵達指定位置及時準(zhǔn)確治著替代衰老病變細(xì)胞。部分外泌體分離方法可能存在對外泌體結(jié)構(gòu)和元素的影響。
外泌體分離方法之尺寸排阻色譜分離法:尺寸排阻色譜(SEC)用于根據(jù)尺寸而非分子量分離大分子。該技術(shù)應(yīng)用了一種填充有多孔聚合物珠子的柱子,該珠子含有多個孔和隧道。分子根據(jù)它們的直徑穿過珠子。小半徑分子通過色譜柱的孔遷移需要更長的時間,而大分子從色譜柱中洗脫得較早。尺寸排阻色譜可以精確分離大分子和小分子。此外,該方法可以應(yīng)用不同的洗脫溶液。與離心機離心方法相比,色譜分離具有較多的優(yōu)勢,因為通過色譜分離的外泌體不受剪切力的影響,避免了因剪切力所造成的囊泡結(jié)構(gòu)改變。目前,SEC是一種普遍接受的分離血液和尿液中存在的外泌體的技術(shù)。此外,SEC方法與超濾相結(jié)合已用于分離和分析尿源性外泌體。此外,流場-流分餾結(jié)合紫外分析儀和光散射檢測器已被應(yīng)用于分析外泌體的大小和純度。流場-流分餾結(jié)合拋物線和交叉流來分離外泌體。獲得的外泌體已通過電子顯微鏡和質(zhì)譜檢測。外泌體分離是外泌體研究中的重要步驟。青島血液RNA外泌體報價表
分離前的細(xì)胞培養(yǎng)和收集條件也能對外泌體分離結(jié)果產(chǎn)生重要影響。南京尿液外泌體分離穩(wěn)定性好
外泌體的表征方法之光學(xué)方法:目前,光學(xué)方法是外泌體表征的主要方法,即動態(tài)光散射(DLS)、多角度光散射(MALS)和納米粒子跟蹤分析(NTA)。這些方法允許對尺寸(DLS0.5–200nm;MALS10–500nm;NTA10–1000nm)、尺寸分布和濃度進行高分辨率測量。DLS和MALS的結(jié)合增加了測量范圍(0.5–500nm)和精度。光學(xué)方法比較受歡迎的,但缺點是靈敏度低、試劑消耗高以及需要昂貴的設(shè)備。在使用納米粒子跟蹤分析NTA方法過程中,熒光染料的加入也提高了分辨率,并允許通過使用熒光標(biāo)記來表征表面免疫表型。從而確定標(biāo)記物存在。南京尿液外泌體分離穩(wěn)定性好