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來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-04-23

幾種慢性肝病(CLD),包括慢性病毒性肝炎、酒精性肝病和非酒精性脂肪肝/非酒精性脂肪性肝炎(NAFLD/NASH),引起肝細(xì)胞損傷和壞死,進(jìn)而引發(fā)炎癥和以細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)積累為特征的傷口愈合反應(yīng)。如果損傷是急性的或自限性的,傷口愈合反應(yīng)會(huì)迅速恢復(fù)正常組織穩(wěn)態(tài)和肝臟結(jié)構(gòu)。然而,如果損傷持續(xù)存在,隨之而來(lái)的慢性炎癥和ECM積累會(huì)超過(guò)肝臟再生的能力,導(dǎo)致纖維化并終導(dǎo)致肝硬化,這是一種預(yù)后不佳的肝臟疾病,也是發(fā)展為肝細(xì)胞(HCC)的主要危險(xiǎn)因素。原代肝細(xì)胞的服務(wù)價(jià)格更優(yōu)惠。歡迎來(lái)電咨詢(xún)上海中喬新舟!北京兔肝細(xì)胞新西蘭大白兔原代肝細(xì)胞購(gòu)買(mǎi)

    培養(yǎng)的原代肝細(xì)胞正常時(shí)是什么形狀的?大約要多久才能傳代?原代細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)基有什么特別的要求嗎?(相對(duì)傳代細(xì)胞而言)謝謝!鼠肝臟組織塊法1,斷頭處死鼠,無(wú)菌分離肝組織,在冰浴下將肝組織用4度D-hank‘s也或不含BS的培養(yǎng)液洗凈血污,剝除薄膜及纖維,將肝組織切為約1mm3小塊。2,用上述液體盡量洗去殘留虛無(wú),一次清洗后800rpm離心4min,棄上清,加入消化液I(含1g/l胰蛋白酶,10g/lPVP,),37度孵育12分,再用培養(yǎng)液洗3次以去除胰酶,將消化好的肝組織塊貼于25cm2培養(yǎng)瓶中,加少許漢100ml/lBS培養(yǎng)液置于37度,5%CO22-3h后再補(bǔ)充6ml韓100ml/lBS培養(yǎng)液,待組織周?chē)霈F(xiàn)細(xì)胞“生長(zhǎng)暈”是該為含50ml/lBS培養(yǎng)液。3,細(xì)胞生長(zhǎng)之單層時(shí)加入消化液II。 北京兔肝細(xì)胞新西蘭大白兔原代肝細(xì)胞購(gòu)買(mǎi)原代肝細(xì)胞的服務(wù)價(jià)格。歡迎來(lái)電咨詢(xún)上海中喬新舟!

隨著各型肝炎、肝硬化、肝等慢性肝病的發(fā)病率日益升高,體外培養(yǎng)的肝細(xì)胞也被普遍地用千肝病基礎(chǔ)研究中。盡管細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)不斷改進(jìn)和成熟,國(guó)內(nèi)外也先后建立了多株人肝細(xì)胞系,但體外分離和培養(yǎng)人正常肝細(xì)胞仍是非常有價(jià)值的研究材料。一材料與設(shè)備1.設(shè)備與器材超凈工作臺(tái)、離心機(jī)、CO2培養(yǎng)箱、-70℃冰箱、-20℃冰箱。2.無(wú)菌材料大培養(yǎng)皿、青霉素小瓶、50ml離心管、刻度吸管、彎頭吸管、T25培養(yǎng)瓶、手術(shù)剪、刀、鏤、細(xì)胞篩(100目)、消毒用乙醇棉球、流產(chǎn)胚胎、高糖DMEM培養(yǎng)液、胎牛血清、青/鏈霉素、D-Hanks溶液、0.25%胰蛋白酶/0.03%EDTA消化液。

    原代培養(yǎng):1.取出小鼠后瀝干酒精,放入超凈臺(tái)內(nèi),固定在泡沫板上。2.用鑷子提起皮膚,用解剖剪剪開(kāi)皮膚一個(gè)橫切口,將皮膚向上撕開(kāi),然后剪開(kāi)肌肉等,暴露出腹腔,在左側(cè)找到脾臟,用彎頭眼科鑷取出脾臟,置于無(wú)菌培養(yǎng)皿中。3.用生理鹽水將取出的脾臟清洗多次,并剔除多余無(wú)用的組織。4.將篩網(wǎng)置于平皿中,脾臟置于篩網(wǎng)上,用彎頭鑷鑷住,輕輕在篩網(wǎng)上進(jìn)行碾磨,同時(shí)不停滴加不含血清的培養(yǎng)液沖洗。5.將碾磨好的細(xì)胞懸液吸入至離心管中,離心(1000rpm,5min),吸去上清(去除血液等)。6.加入10ml培養(yǎng)液,吹打混勻,取樣計(jì)數(shù)。7.將稀釋好的細(xì)胞懸液分裝于培養(yǎng)瓶中,輕輕搖晃混勻,在培養(yǎng)瓶上。面做好標(biāo)志,注明細(xì)胞、組別及日期。然后將培養(yǎng)瓶置于二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 原代肝細(xì)胞有什么特點(diǎn)?上海中喬新舟告訴您。

原代培養(yǎng)就是提取的細(xì)胞體外次培養(yǎng)。,當(dāng)原代培養(yǎng)成功以后,隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)和細(xì)胞不斷分裂,一則細(xì)胞之間相互接觸而發(fā)生接觸性抑制,生長(zhǎng)速度減慢甚至停止;另一方面也會(huì)因營(yíng)養(yǎng)物不足和代謝物積累而不利于生長(zhǎng)或發(fā)生中毒。此時(shí)就需要將培養(yǎng)物分割成小的部分,重新接種到另外的培養(yǎng)器皿(瓶)內(nèi),再進(jìn)行培養(yǎng)。這個(gè)過(guò)程就稱(chēng)為傳代,網(wǎng)上有很多解釋?zhuān)话愕膶?shí)驗(yàn)用的到細(xì)胞的都是直接傳代培養(yǎng),別的地方買(mǎi)過(guò)來(lái)細(xì)胞株細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)束直接進(jìn)行。原代肝細(xì)胞的用途?歡迎致電上海中喬新舟!北京兔肝細(xì)胞新西蘭大白兔原代肝細(xì)胞購(gòu)買(mǎi)

原代肝細(xì)胞怎么選?上海中喬新舟告訴您。北京兔肝細(xì)胞新西蘭大白兔原代肝細(xì)胞購(gòu)買(mǎi)

    細(xì)胞復(fù)蘇:①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入(T25瓶)②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化;③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。 北京兔肝細(xì)胞新西蘭大白兔原代肝細(xì)胞購(gòu)買(mǎi)

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1、原代細(xì)胞:ScienCell(中國(guó)區(qū)正規(guī)一級(jí)代理)人源和動(dòng)物源各種原代細(xì)胞。

2、培養(yǎng)基:原代細(xì)胞**低血清、無(wú)血清、無(wú)異源蛋白無(wú)動(dòng)物成分培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清、原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞生長(zhǎng)因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細(xì)胞裂解物等。

4、細(xì)胞系(株):種類(lèi)豐富(1000余種),已通過(guò)STR鑒定;提供細(xì)胞株完全培養(yǎng)基。

5、自研產(chǎn)品:支原體檢測(cè)/qing除試劑盒、端粒酶檢測(cè)試劑盒、人源/動(dòng)物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品。

6、技術(shù)服務(wù):綠/紅色熒光蛋白標(biāo)記、熒光素酶標(biāo)記、慢bing毒介導(dǎo)基因沉默或過(guò)表達(dá)及穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建,細(xì)菌基因敲除、細(xì)胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學(xué)實(shí)驗(yàn)。