貓作為原代肝細(xì)胞的常用供體，近年來在生物醫(yī)藥領(lǐng)域的研究中扮演著越來越重要的角色。相對(duì)于小鼠和大鼠等試驗(yàn)用動(dòng)物，貓的體型更大，便于試驗(yàn)操作和觀察，因此被廣泛應(yīng)用于科研、教育和藥物研發(fā)等領(lǐng)域。據(jù)美國農(nóng)業(yè)部動(dòng)植物衛(wèi)生檢疫局（APHIS）的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，在2017年，美國就使用了約萬只貓進(jìn)行試驗(yàn)研究。而在中國，試驗(yàn)用貓的年使用量也在不斷增加，據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，每年浙江省的藥品質(zhì)量監(jiān)測(cè)就需要使用400-500只試驗(yàn)用貓。 貓的原代肝細(xì)胞和肝微粒體是不可或缺的研究材料。通過對(duì)貓的肝細(xì)胞進(jìn)行體外研究，可以更加準(zhǔn)確地評(píng)估藥物的代謝和毒性，為藥物研發(fā)提供重要的參考依據(jù)。此外，貓的原代肝細(xì)胞還可以用于疾病模型的建立和藥物療效的評(píng)估，為Clinical Treatment提供重要的支持。 然而，試驗(yàn)用貓的使用也引起了一些爭議。一些動(dòng)物保護(hù)組織認(rèn)為，試驗(yàn)用貓的使用會(huì)對(duì)動(dòng)物造成痛苦和傷害，應(yīng)該盡量減少或避免使用。因此，科研人員需要在確保研究質(zhì)量的前提下，盡可能地減少試驗(yàn)用貓的使用，采用替代方法和技術(shù)，以保障動(dòng)物福利和人類健康。原代肝細(xì)胞可以用于研究肝臟的再生和修復(fù)，可以幫助人們更好地了解肝臟移植和liver cance?；葜葚i原代肝細(xì)胞純化

    原代肝細(xì)胞的分離方法有很多種，以下是其中幾種常見的方法：1.膠原酶消化法：膠原酶是一種使用廣的細(xì)胞分離酶，可以消化肝細(xì)胞外基質(zhì)中的膠原蛋白，從而使肝細(xì)胞分離出來。該方法通常使用膠原酶消化肝臟組織，然后通過離心和過濾等步驟分離肝細(xì)胞。2.機(jī)械分離法：機(jī)械分離法是一種通過物理方法分離肝細(xì)胞的方法。該方法通常使用攪拌器、濾網(wǎng)或離心等設(shè)備將肝臟組織中的肝細(xì)胞分離出來。3.酶消化結(jié)合機(jī)械分離法：這種方法是將膠原酶消化和機(jī)械分離相結(jié)合的方法。該方法通常先使用膠原酶消化肝臟組織，然后通過機(jī)械分離的方法將肝細(xì)胞分離出來。4.密度梯度離心法：密度梯度離心法是一種通過離心的方法分離肝細(xì)胞的方法。該方法通常使用密度梯度介質(zhì)（如Percoll或Ficoll）將肝細(xì)胞分離出來。以上是幾種常見的原代肝細(xì)胞分離方法，不同的方法適用于不同的實(shí)驗(yàn)需求和研究目的。在選擇分離方法時(shí)，需要考慮肝臟組織的來源、肝細(xì)胞的數(shù)量和質(zhì)量、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡纫蛩亍?江蘇草魚原代肝細(xì)胞培養(yǎng)方法立沃生物的原代肝細(xì)胞配套有有多種細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)支持，可以為客戶提供多維度的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)支持解決方案。

原代肝細(xì)胞的2D培養(yǎng)模型是一種常用的實(shí)驗(yàn)方法，用于研究肝細(xì)胞的生物學(xué)特性和功能。 原代肝細(xì)胞的2D培養(yǎng)模型具有許多優(yōu)點(diǎn)。首先，該模型可以提供一定量的原代肝細(xì)胞，使研究人員能夠進(jìn)行大規(guī)模的實(shí)驗(yàn)研究。其次，該模型提供了一個(gè)穩(wěn)定的環(huán)境，使研究人員能夠更好地控制原代細(xì)胞的生長和分化，以及研究肝細(xì)胞在不同條件下的反應(yīng)和功能。此外，該模型還提供了一種簡單、快速和經(jīng)濟(jì)的方法，用于評(píng)估藥物的毒性和療效，以及研究原代肝細(xì)胞在不同疾病狀態(tài)下的反應(yīng)和功能。 原代肝細(xì)胞的2D培養(yǎng)模型也存在一些限制。首先，該模型只能提供有限的原代肝細(xì)胞數(shù)量，因?yàn)樵渭?xì)胞在體外的壽命較短，容易失去其生物學(xué)特性和功能。其次，該模型無法完全模擬肝臟在體內(nèi)的復(fù)雜環(huán)境，因此可能無法準(zhǔn)確預(yù)測(cè)原代肝細(xì)胞在體內(nèi)的反應(yīng)和功能。此外，該模型也存在一些技術(shù)挑戰(zhàn)，如原代肝細(xì)胞分離和培養(yǎng)條件的優(yōu)化等。 原代肝細(xì)胞的2D培養(yǎng)模型是一種重要的實(shí)驗(yàn)方法，可以用于研究原代肝細(xì)胞的生物學(xué)特性和功能，以及評(píng)估藥物的毒性和療效。雖然存在一些限制，但該模型仍然是原代肝細(xì)胞研究的重要工具之一。

原代肝細(xì)胞也廣泛應(yīng)用于嵌合體肝模型當(dāng)中。通過將正常人原代肝細(xì)胞移植到患有嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷(SCID)的肝特異uPA轉(zhuǎn)基因小鼠中，可以成功地構(gòu)建嵌合體肝。而轉(zhuǎn)基因小鼠的uPA表達(dá)能夠促使鼠肝細(xì)胞死亡，從而為人原代肝細(xì)胞的移植、重建和增殖提供了一個(gè)適宜的微環(huán)境。在這種重建的嵌合體肝內(nèi)，人肝細(xì)胞占據(jù)了大約75％的比例，并且能夠持續(xù)高水平地表達(dá)人血清蛋白。 通過使用病人血清和病毒核酸影響這種嵌合體小鼠，研究人員發(fā)現(xiàn)在肝內(nèi)可以檢測(cè)到病毒的RNA。然而，病理觀察并未發(fā)現(xiàn)病毒影響所導(dǎo)致的細(xì)胞病變。這一發(fā)現(xiàn)為研究病毒影響的機(jī)制提供了新的途徑，并為開發(fā)解決病毒影響的新方法提供了新的思路。 此外，這項(xiàng)研究還為研究肝細(xì)胞移植和重建提供了新的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?。通過將人原代肝細(xì)胞移植到轉(zhuǎn)基因小鼠中，研究人員可以更好地研究原代肝細(xì)胞的生長、分化和功能，從而為克服肝病提供新的思路和方法。這項(xiàng)研究的結(jié)果具有重要的臨床意義，有望為克服肝病和病毒影響提供新的策略。立沃生物科技有限公司原代肝細(xì)胞是從健康肝臟中提取后體外培養(yǎng)的，保留了肝臟的特性和功能。

貼壁培養(yǎng)是一種常用的細(xì)胞培養(yǎng)方法，可以使原代肝細(xì)胞在培養(yǎng)皿表面附著生長，形成單層細(xì)胞群落。原代肝細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)需要注意以下幾點(diǎn)： 1. 分離和準(zhǔn)備細(xì)胞：從新鮮的動(dòng)物肝臟中分離出原代肝細(xì)胞后，需要進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和質(zhì)量檢測(cè)，確保細(xì)胞數(shù)量和質(zhì)量符合要求。 2. 培養(yǎng)基的選擇：原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)基需要選擇適合其生長和代謝的培養(yǎng)基，常用的培養(yǎng)基包括DMEM、RPMI-1640等。 3. 培養(yǎng)皿的涂層：為了使原代肝細(xì)胞能夠附著生長，需要在培養(yǎng)皿表面涂層一定濃度的膠原蛋白、明膠或者其他細(xì)胞黏附因子。 4. 細(xì)胞接種和培養(yǎng)：將準(zhǔn)備好的原代肝細(xì)胞接種到涂層好的培養(yǎng)皿中，加入適量的培養(yǎng)基，放入恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。需要注意的是，原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)時(shí)間較短，一般在3-5天左右，因此需要及時(shí)更換培養(yǎng)基和進(jìn)行細(xì)胞觀察。 原代肝細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)可以通過在培養(yǎng)皿上加一定的的吸附涂層來達(dá)到讓原代肝細(xì)胞快速貼壁的效果。立沃生物的原代肝細(xì)胞配套提供制度完備的細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù)，為客戶提供個(gè)性化的解決方案。河北人體原代肝細(xì)胞培養(yǎng)技巧

用原代肝臟細(xì)胞進(jìn)行Organoid搭建，還原體內(nèi)肝臟的狀態(tài)，能極大地減少實(shí)驗(yàn)的誤差和傳統(tǒng)藥篩的成本?；葜葚i原代肝細(xì)胞純化

原代肝細(xì)胞的體外培養(yǎng)和研究有著很大的應(yīng)用范圍。原代肝細(xì)胞(Primary hepatocytes)是指從動(dòng)物肝臟取出后立即培養(yǎng)的肝細(xì)胞。原代肝細(xì)胞作為一種體外模型，具有其它體外模型不可替代的優(yōu)點(diǎn)：1.與體內(nèi)環(huán)境保持一致，酶量和輔助因子水平都是正常的生理濃度，可以在接近生理狀態(tài)的的情況下研究藥物的代謝和毒性；2.較好保留和維持了肝細(xì)胞的完整形態(tài)和肝細(xì)胞體外代謝活性，真實(shí)反應(yīng)了體內(nèi)的代謝情況。3.隨著技術(shù)水平的不斷提高，原代培養(yǎng)的動(dòng)物和人肝細(xì)胞已廣泛應(yīng)用于藥物研究：4.探討藥物在肝中的代謝途徑和藥物藥代動(dòng)力學(xué)的研究；5.評(píng)價(jià)藥物和外源性物質(zhì)對(duì)肝臟中細(xì)胞色素P450酶誘導(dǎo)作用并探討其誘導(dǎo)機(jī)制；6.預(yù)測(cè)和解釋藥物與藥物之間的相互作用；7.研究藥物的細(xì)胞毒性等。因此了解或者掌握原代肝細(xì)胞體外培養(yǎng)和研究的相關(guān)技術(shù)對(duì)于提升相關(guān)試驗(yàn)的成功率非常有幫助?；葜葚i原代肝細(xì)胞純化