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上海小鼠原代肝細(xì)胞培養(yǎng)

來源: 發(fā)布時間:2023-12-29

原代肝細(xì)胞是藥物代謝研究領(lǐng)域非常重要的體外模型。原代肝細(xì)胞作為藥物代謝研究的經(jīng)典模型,在探討藥物在肝中的代謝途徑和藥代動力學(xué)的研究中發(fā)揮著重要作用。將苗頭化合物與懸浮原代肝細(xì)胞共孵育,不但可對化合物在肝細(xì)胞中的代謝穩(wěn)定性進(jìn)行研究,而且還可得到相對多量的高純度的代謝產(chǎn)物,在研究藥物生物轉(zhuǎn)化特征,尋找藥物可能的代謝物方面具有很大的優(yōu)勢。尤其是當(dāng)有證據(jù)顯示化合物的生物轉(zhuǎn)化途徑為二相代謝、水解作用或肝微粒體中非特異性蛋白結(jié)合很高、肝微粒體中代謝不明顯的時候,原代肝細(xì)胞更為不可替代的體外模型。立沃生物的原代肝細(xì)胞可以配套提供多種細(xì)胞凍存設(shè)備支持,包括程序降溫儀,低溫液氮罐等。上海小鼠原代肝細(xì)胞培養(yǎng)

    在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時,通常需要對分離得到的肝細(xì)胞進(jìn)行特殊的處理或篩選,以提高肝細(xì)胞的存活率和純度。以下是一些常見的處理或篩選方法:1.密度梯度離心:密度梯度離心是一種常用的分離和篩選肝細(xì)胞的方法。通過使用密度梯度介質(zhì)(如Percoll或Ficoll),可以將肝細(xì)胞與其他細(xì)胞分離出來,從而提高肝細(xì)胞的純度。2.選擇性貼壁:選擇性貼壁是一種基于肝細(xì)胞和其他細(xì)胞在培養(yǎng)皿上的貼壁特性不同的篩選方法。肝細(xì)胞通常會在培養(yǎng)皿上貼壁生長,而其他細(xì)胞則不會。通過選擇合適的培養(yǎng)條件和時間,可以篩選出貼壁生長的肝細(xì)胞。3.流式細(xì)胞術(shù):流式細(xì)胞術(shù)是一種基于細(xì)胞表面標(biāo)志物的篩選方法。通過使用熒光標(biāo)記的抗體,可以識別和篩選出表達(dá)特定標(biāo)志物的肝細(xì)胞。4.細(xì)胞篩選:細(xì)胞篩選是一種基于細(xì)胞形態(tài)和功能的篩選方法。通過觀察細(xì)胞的形態(tài)和功能特征,可以篩選出符合要求的肝細(xì)胞。以上是一些常見的原代肝細(xì)胞處理或篩選方法,不同的方法適用于不同的實驗需求和研究目的。在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時,需要根據(jù)具體情況選擇合適的處理或篩選方法,以提高肝細(xì)胞的存活率和純度。 河北小鼠原代肝細(xì)胞立沃生物的原代肝細(xì)胞配套提供多種細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)培訓(xùn)服務(wù),包括細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)培訓(xùn)、細(xì)胞培養(yǎng)實驗指導(dǎo)等。

如何提升原代肝細(xì)胞的活率一直是個很大的挑戰(zhàn)。由于原代肝細(xì)胞的特殊性質(zhì),它們的活率和得率往往比一般細(xì)胞低,這給研究工作帶來了很大的挑戰(zhàn)。為了提高原代肝細(xì)胞的活率和得率,我們可以采取以下措施: 1.優(yōu)化細(xì)胞培養(yǎng)條件:原代肝細(xì)胞對培養(yǎng)條件非常敏感,因此我們需要針對不同的細(xì)胞類型和實驗?zāi)康模瑑?yōu)化培養(yǎng)條件,包括培養(yǎng)基配方、培養(yǎng)溫度、CO2濃度等。 2.選擇合適的細(xì)胞來源:原代肝細(xì)胞可以從不同的來源獲得,如人體肝臟組織、動物肝臟組織等,我們需要根據(jù)實驗需要選擇合適的細(xì)胞來源。 3. 優(yōu)化細(xì)胞分離方法:原代肝細(xì)胞的分離方法也會影響細(xì)胞的活率和得率。我們可以采用不同的分離方法,如機(jī)械分離、酶消化等,選擇適合的方法來分離細(xì)胞。 4. 使用適當(dāng)?shù)募?xì)胞培養(yǎng)基:不同的細(xì)胞類型需要不同的培養(yǎng)基,我們需要根據(jù)實驗需要選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基。同時,我們還可以添加一些生長因子和細(xì)胞因子來促進(jìn)細(xì)胞的生長和增殖。 5. 保持細(xì)胞的穩(wěn)定性:定期更換培養(yǎng)基、避免過度培養(yǎng)等。 提高原代肝細(xì)胞的活率和得率需要我們綜合考慮多個因素,包括細(xì)胞培養(yǎng)條件、細(xì)胞來源、細(xì)胞分離方法、培養(yǎng)基配方等。

原代肝細(xì)胞是藥物代謝研究的重要組成。原代肝細(xì)胞(Primaryhepatocytes)是指從動物肝臟直接分離的肝實質(zhì)細(xì)胞,具有不可替代的優(yōu)勢。原代肝細(xì)胞與體內(nèi)環(huán)境保持一致,酶量與輔助因子水平濃度與正常生理濃度貼合,滿足在接近生理狀態(tài)情況下研究藥物代謝和毒性的需求,真實反應(yīng)了體內(nèi)的代謝情況。同時,利用原代肝細(xì)胞在體外進(jìn)行研究,無須擔(dān)心動物實驗的倫理問題,也減少了動物實驗所需的成本開支。目前,原代肝細(xì)胞已廣泛應(yīng)用于藥物研究,包括探討藥物在肝中的代謝途徑和藥物藥代動力學(xué)的研究;預(yù)測并解釋藥物—藥物間的相互作用;研究藥物的細(xì)胞毒性等。立沃生物原代肝細(xì)胞配套提供多種細(xì)胞培養(yǎng)實驗合作服務(wù),包括細(xì)胞培養(yǎng)實驗合作、細(xì)胞培養(yǎng)實驗項目合作等。

    原代肝細(xì)胞的分離方法有很多種,以下是其中幾種常見的方法:1.膠原酶消化法:膠原酶是一種使用廣的細(xì)胞分離酶,可以消化肝細(xì)胞外基質(zhì)中的膠原蛋白,從而使肝細(xì)胞分離出來。該方法通常使用膠原酶消化肝臟組織,然后通過離心和過濾等步驟分離肝細(xì)胞。2.機(jī)械分離法:機(jī)械分離法是一種通過物理方法分離肝細(xì)胞的方法。該方法通常使用攪拌器、濾網(wǎng)或離心等設(shè)備將肝臟組織中的肝細(xì)胞分離出來。3.酶消化結(jié)合機(jī)械分離法:這種方法是將膠原酶消化和機(jī)械分離相結(jié)合的方法。該方法通常先使用膠原酶消化肝臟組織,然后通過機(jī)械分離的方法將肝細(xì)胞分離出來。4.密度梯度離心法:密度梯度離心法是一種通過離心的方法分離肝細(xì)胞的方法。該方法通常使用密度梯度介質(zhì)(如Percoll或Ficoll)將肝細(xì)胞分離出來。以上是幾種常見的原代肝細(xì)胞分離方法,不同的方法適用于不同的實驗需求和研究目的。在選擇分離方法時,需要考慮肝臟組織的來源、肝細(xì)胞的數(shù)量和質(zhì)量、實驗?zāi)康牡纫蛩亍?立沃生物的原代肝細(xì)胞可以提供多種檢測服務(wù),包括細(xì)胞活率、細(xì)胞數(shù)、endotoxin檢測等。廣州豬原代肝細(xì)胞培養(yǎng)步驟

立沃生物同一批次的原代肝細(xì)胞具有高度的穩(wěn)定性和可重復(fù)性,可以為客戶提供穩(wěn)定的實驗結(jié)果。上海小鼠原代肝細(xì)胞培養(yǎng)

貼壁原代肝細(xì)胞是一種非常重要的實驗材料,常用于酶誘導(dǎo)實驗。在進(jìn)行實驗前,需要對細(xì)胞進(jìn)行復(fù)蘇處理,使其恢復(fù)到正常狀態(tài)。復(fù)蘇后,需要使用鋪板培養(yǎng)基進(jìn)行懸浮,調(diào)整細(xì)胞濃度,然后使用膠原包被板進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況下,細(xì)胞可以在4~6小時內(nèi)貼壁。在原代肝細(xì)胞細(xì)胞貼壁后,需要更換維持培養(yǎng)基,繼續(xù)維持18小時,以保證細(xì)胞狀態(tài)能夠盡可能地恢復(fù)。一旦原代肝細(xì)胞細(xì)胞狀態(tài)恢復(fù)良好,就可以開始進(jìn)行酶誘導(dǎo)實驗了。通過檢測代謝活性和mRNA誘導(dǎo)水平,可以了解原代肝細(xì)胞細(xì)胞的生理狀態(tài)和功能。整個周期來看,原代肝細(xì)胞細(xì)胞貼壁后可以維持6~7天的狀態(tài)。但是隨著時間的延長,細(xì)胞貼壁狀態(tài)會變差,細(xì)胞會出現(xiàn)脫落懸浮現(xiàn)象。因此,在進(jìn)行實驗時,需要注意原代肝細(xì)胞細(xì)胞的狀態(tài)和質(zhì)量,及時更換培養(yǎng)基,保持細(xì)胞的正常生長和功能。同時,也需要注意實驗條件的控制,避免對原代肝細(xì)胞細(xì)胞造成不良影響。通過科學(xué)合理的實驗設(shè)計和操作,可以獲得準(zhǔn)確可靠的實驗結(jié)果,為研究原代肝細(xì)胞細(xì)胞生理和病理提供重要的實驗依據(jù)。上海小鼠原代肝細(xì)胞培養(yǎng)