原代肝細(xì)胞是藥物的毒性研究的重要組成部分。藥物通過(guò)肝臟代謝后,大多數(shù)藥物的毒性被消除,但同時(shí)也有一些無(wú)毒或低毒的物質(zhì)通過(guò)生物轉(zhuǎn)化后轉(zhuǎn)變成有毒甚至毒性更大的物質(zhì),因此肝臟便必然成為研究藥物毒性的重要target organ。原代肝細(xì)胞即為一個(gè)較好的篩選模型,尤其是在檢測(cè)結(jié)構(gòu)相關(guān)化合物時(shí),原代肝細(xì)胞的角色更為重要。 人原代肝細(xì)胞是重要的體外模型。人原代肝細(xì)胞在較大程度上保留了細(xì)胞在體內(nèi)organ里的功能,各種物質(zhì)代謝功能和酶活性與體內(nèi)的肝細(xì)胞極其相似,是較為接近臨床的一種標(biāo)準(zhǔn)體外短期培養(yǎng)模型。人原代肝細(xì)胞通常從肝或肝組織中獲得,一般在肝切除手術(shù)中或者肝移植后排斥的肝組織中獲取,隨后即時(shí)進(jìn)行研究或者凍存待用。 原代肝細(xì)胞是肝臟疾病的研究以及相應(yīng)藥物的開發(fā)的重要載體。比如一些對(duì)于乙肝病毒的研究需要對(duì)肝細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng);一些嚴(yán)重肝臟疾病的細(xì)胞移植研究也要涉及到對(duì)原代肝細(xì)胞進(jìn)行大量擴(kuò)增。因此,原代肝細(xì)胞的體外培養(yǎng)和研究是一直以來(lái)科學(xué)家們關(guān)注的熱點(diǎn)。立沃生物的原代肝細(xì)胞可以提供樣品細(xì)胞凍存服務(wù),以保證客戶試驗(yàn)周期內(nèi)同批次細(xì)胞的需求。新西蘭兔原代肝細(xì)胞圖片
原代肝細(xì)胞的分離技術(shù)是一項(xiàng)非常復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)技術(shù),需要特定的實(shí)驗(yàn)室條件和高超的技術(shù)。在實(shí)驗(yàn)室中,必須嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室管理和質(zhì)量控制的要求,確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。同時(shí),由于涉及到人體組織的使用,還需要遵守倫理和法律規(guī)定,確保實(shí)驗(yàn)的合法性和道德性。 在實(shí)驗(yàn)室中,分離原代肝細(xì)胞需要使用一系列的試劑和設(shè)備,如胰蛋白酶、膽汁酸、離心機(jī)等。這些試劑和設(shè)備必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量控制,確保其純度和有效性。同時(shí),實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境條件也必須符合要求,如溫度、濕度、潔凈度等,以保證實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性和可重復(fù)性。 在分離原代肝細(xì)胞的過(guò)程中,還需要進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞鑒定等步驟。這些步驟需要高超的技術(shù)和經(jīng)驗(yàn),以確保細(xì)胞正常的生長(zhǎng)和增殖。同時(shí),還需要進(jìn)行細(xì)胞的鑒定和檢測(cè),以確認(rèn)細(xì)胞的純度和活性。 分離原代肝細(xì)胞是一項(xiàng)非常復(fù)雜和高難度的實(shí)驗(yàn)技術(shù),只有在符合這些要求的前提下,才能夠獲得高質(zhì)量的原代肝細(xì)胞,為肝臟疾病的研究和treatment提供有力的支持。猴原代肝細(xì)胞種類原代肝細(xì)胞衍生的Organoid既能提供需要的擁肝毒模型,也能體現(xiàn)肝細(xì)胞在應(yīng)對(duì)病原體時(shí)的生理反應(yīng)。
原代肝細(xì)胞也可以用于Organ-on-a-chip的構(gòu)建。Organ-on-a-chip是一項(xiàng)創(chuàng)新性的科技成果,它在載玻片大小的芯片上構(gòu)建了一個(gè)完整的生理組織微系統(tǒng),其中包含有原代肝細(xì)胞、肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞、生物流體和機(jī)械力所需微環(huán)境的關(guān)鍵要素。這個(gè)微型肝臟模型可以在體外模擬人體肝臟的主要結(jié)構(gòu)功能特征和復(fù)雜的組織間聯(lián)系,為藥物藥效評(píng)價(jià)、藥物安全性評(píng)價(jià)、化妝品安全性評(píng)價(jià)、食品安全性評(píng)價(jià)、環(huán)境保護(hù)評(píng)價(jià)等提供了一種全新的方法和手段。 這個(gè)微型肝臟模型的研發(fā),是在對(duì)傳統(tǒng)的肝臟模型進(jìn)行改進(jìn)和創(chuàng)新的基礎(chǔ)上實(shí)現(xiàn)的。傳統(tǒng)的肝臟模型通常是基于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)或體外細(xì)胞培養(yǎng)的方法,但這些方法存在著很多的局限性和缺陷。例如,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)不僅存在著倫理和道德問(wèn)題,而且還存在著種屬差異、生理反應(yīng)差異等問(wèn)題;而體外細(xì)胞培養(yǎng)則存在著細(xì)胞失活、細(xì)胞分化等問(wèn)題。因此,Organ-on-a-chip的出現(xiàn),填補(bǔ)了這些傳統(tǒng)方法的空白,為科學(xué)研究和工業(yè)應(yīng)用提供了更加可靠和有效的手段。
原代肝細(xì)胞培養(yǎng)中去除endotoxin是十分重要的。原代肝細(xì)胞培養(yǎng)是一種常用的實(shí)驗(yàn)方法,但在培養(yǎng)過(guò)程中,細(xì)胞可能會(huì)受到endotoxin的污染,這會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。 endotoxin是一種由細(xì)菌產(chǎn)生的有毒物質(zhì),可以引起炎癥反應(yīng)和細(xì)胞損傷。在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)中,endotoxin可能來(lái)自于培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)器具或細(xì)胞本身。因此,需要采取一些措施來(lái)去除endotoxin。 一種常用的方法是使用endotoxin去除劑,例如聚陽(yáng)離子樹脂(Polyclonal Cationic Resin,PCR)或聚乙烯醇(Polyvinyl Alcohol,PVA)。這些去除劑可以吸附endotoxin,從而減少其對(duì)細(xì)胞的影響。使用endotoxin去除劑的方法比較簡(jiǎn)單,只需要將其加入培養(yǎng)基中,然后將細(xì)胞培養(yǎng)在其中即可。 可以使用endotoxin檢測(cè)試劑盒來(lái)檢測(cè)培養(yǎng)基中的endotoxin含量。如果檢測(cè)結(jié)果顯示endotoxin含量較高,可以考慮更換培養(yǎng)基或使用endotoxin去除劑。 除了使用去除劑和檢測(cè)試劑盒外,還可以采取一些預(yù)防措施來(lái)減少endotoxin的污染。例如,使用無(wú)菌技術(shù)操作、定期更換培養(yǎng)器具和培養(yǎng)基、避免過(guò)度攪拌和振蕩等。 去除endotoxin是原代肝細(xì)胞培養(yǎng)中必須注意的問(wèn)題。采取適當(dāng)?shù)拇胧┛梢詼p少endotoxin的污染,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。立沃生物的原代肝細(xì)胞配套提供制度完備的細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù),為客戶提供個(gè)性化的解決方案。
原代肝細(xì)胞的研究一直是科學(xué)家們關(guān)注的焦點(diǎn)之一。原代肝細(xì)胞作為肝臟的主要細(xì)胞類型,對(duì)于肝臟生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究具有重要的意義。 原代肝細(xì)胞的研究需要多學(xué)科的合作,包括生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和化學(xué)等。生物學(xué)家們需要對(duì)肝臟的解剖結(jié)構(gòu)、生理功能和細(xì)胞分化等方面進(jìn)行深入研究,以便更好地理解原代肝細(xì)胞的生物學(xué)特性。醫(yī)學(xué)家們則需要將原代肝細(xì)胞的研究與臨床實(shí)踐相結(jié)合,探索其在肝臟疾病診斷中的應(yīng)用價(jià)值。而化學(xué)家們則需要開發(fā)出更加高效的原代肝細(xì)胞培養(yǎng)和分離技術(shù),以便更好地保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。 原代肝細(xì)胞的研究還需要不斷地更新和改進(jìn)技術(shù)和方法。隨著科技的不斷進(jìn)步,越來(lái)越多的高通量技術(shù)和基因編輯技術(shù)被應(yīng)用到原代肝細(xì)胞的研究中,這些技術(shù)的應(yīng)用不僅可以提高實(shí)驗(yàn)效率,還可以更好地揭示原代肝細(xì)胞的生物學(xué)特性。此外,還需要加強(qiáng)對(duì)原代肝細(xì)胞的質(zhì)量控制和標(biāo)準(zhǔn)化管理,以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可重復(fù)性和可比性。 原代肝細(xì)胞的研究是一項(xiàng)復(fù)雜而又重要的工作,需要相關(guān)的科學(xué)家們持續(xù)探索不斷創(chuàng)新。相信在不久的將來(lái),原代肝細(xì)胞的研究將會(huì)取得更加豐碩的成果,為肝臟疾病的預(yù)防提供更加有效的手段和方法。原代肝細(xì)胞不能傳代和長(zhǎng)期培養(yǎng),會(huì)丟失肝細(xì)胞分化特性與功能,通過(guò)誘導(dǎo)去分化做成肝祖細(xì)胞可以傳代培養(yǎng)。猴原代肝細(xì)胞種類
立沃生物原代肝細(xì)胞可以用于肝臟疾病研究、藥物代謝和藥物毒性、篩選藥物和測(cè)試藥物的毒性等方面的研究。新西蘭兔原代肝細(xì)胞圖片
原代肝細(xì)胞是簡(jiǎn)單有效的生物體外模型。相比于其他類型誘導(dǎo)產(chǎn)生的肝臟細(xì)胞或是cancer細(xì)胞系,原代肝細(xì)胞在造模的同時(shí)不需要復(fù)雜的對(duì)細(xì)胞進(jìn)行重編程,以及誘導(dǎo)分化,可以更方便更快速的進(jìn)行高通量藥理研究。此外和另外兩種方式相比,原代肝細(xì)胞能夠更準(zhǔn)確的反應(yīng)體內(nèi)的真實(shí)情況,有數(shù)據(jù)表明,原代肝細(xì)胞比iPSC誘導(dǎo)產(chǎn)生的肝細(xì)胞內(nèi)的堿基取代少數(shù)倍,同時(shí)這些細(xì)胞還保留了捐獻(xiàn)者的特有特征,是較為理想的研究模型。另一個(gè)優(yōu)勢(shì)在于,原代肝細(xì)胞衍生的Organoid可以提供獨(dú)特的肝毒模型,因?yàn)樵?xì)胞保留了患者特有的I期II期藥物代謝情況。原代細(xì)胞不僅擁有捐贈(zèng)者特有的生理特性,同時(shí)也具備其他兩種肝細(xì)胞在應(yīng)對(duì)病原體時(shí)的生理反應(yīng)。新西蘭兔原代肝細(xì)胞圖片
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