原代肝細(xì)胞研究歷史可以追溯到20世紀(jì)初。當(dāng)時(shí),科學(xué)家們開始對(duì)肝臟的結(jié)構(gòu)和功能進(jìn)行深入研究,并嘗試從肝臟中分離出原代肝細(xì)胞進(jìn)行研究。早期的研究方法是通過肝臟切片的方式來分離出肝細(xì)胞,但是這種方法存在很多局限性,比如細(xì)胞的存活率很低,細(xì)胞的數(shù)量也很有限。 隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步,科學(xué)家們開始嘗試使用酶解法來分離原代肝細(xì)胞。這種方法可以有效地提高細(xì)胞的存活率和數(shù)量,但是由于酶的質(zhì)量和濃度的不同,細(xì)胞的質(zhì)量和純度也存在很大的差異。 在20世紀(jì)50年代,科學(xué)家們開始使用離心法來分離原代肝細(xì)胞。這種方法可以有效地提高細(xì)胞的純度和數(shù)量,但是由于離心過程中細(xì)胞受到的力的不同,細(xì)胞的形態(tài)和功能也會(huì)發(fā)生改變。 隨著細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的不斷發(fā)展,科學(xué)家們開始嘗試使用原代肝細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)。這種方法可以使細(xì)胞在體外繼續(xù)生長和分化,從而更好地研究肝細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能。但是由于原代肝細(xì)胞的生長和分化受到很多因素的影響,比如培養(yǎng)基的成分、pH值、溫度等,因此細(xì)胞的生長和分化也存在很大的差異。 隨著技術(shù)的不斷發(fā)展,相信原代肝細(xì)胞研究會(huì)越來越深入,為人類健康事業(yè)做出更大的貢獻(xiàn)。原代肝細(xì)胞衍生的Organoid既能提供需要的擁肝毒模型,也能體現(xiàn)肝細(xì)胞在應(yīng)對(duì)病原體時(shí)的生理反應(yīng)。天津中國人原代肝細(xì)胞培養(yǎng)步驟
原代肝細(xì)胞是指從動(dòng)物或人體肝臟中分離出來的原始肝細(xì)胞,它們沒有經(jīng)過傳代培養(yǎng),保留了肝細(xì)胞的天然特性和功能。原代肝細(xì)胞在生物醫(yī)學(xué)研究中具有重要的應(yīng)用價(jià)值,例如:1.藥物代謝和毒性研究:原代肝細(xì)胞可以用于評(píng)估藥物的代謝和毒性,以及藥物對(duì)肝細(xì)胞的影響。2.肝臟疾病研究:原代肝細(xì)胞可以用于研究肝臟疾病的發(fā)生機(jī)制、病理生理學(xué)和治療方法。3.生物制藥:原代肝細(xì)胞可以用于生產(chǎn)生物制藥,例如肝細(xì)胞生長因子和肝細(xì)胞的再生因子等。原代肝細(xì)胞的分離和培養(yǎng)技術(shù)比較復(fù)雜,需要嚴(yán)格的操作和控制條件,以確保肝細(xì)胞的存活率和功能。河北雞原代肝細(xì)胞圖片懸浮肝細(xì)胞主要應(yīng)用于藥物代謝研究,一般使用多供體混合懸浮肝細(xì)胞,適用于試驗(yàn)周期比較短的實(shí)驗(yàn)。
原代肝細(xì)胞是藥物的毒性研究的重要組成部分。藥物通過肝臟代謝后,大多數(shù)藥物的毒性被消除,但同時(shí)也有一些無毒或低毒的物質(zhì)通過生物轉(zhuǎn)化后轉(zhuǎn)變成有毒甚至毒性更大的物質(zhì),因此肝臟便必然成為研究藥物毒性的重要target organ。原代肝細(xì)胞即為一個(gè)較好的篩選模型,尤其是在檢測結(jié)構(gòu)相關(guān)化合物時(shí),原代肝細(xì)胞的角色更為重要。 人原代肝細(xì)胞是重要的體外模型。人原代肝細(xì)胞在較大程度上保留了細(xì)胞在體內(nèi)organ里的功能,各種物質(zhì)代謝功能和酶活性與體內(nèi)的肝細(xì)胞極其相似,是較為接近臨床的一種標(biāo)準(zhǔn)體外短期培養(yǎng)模型。人原代肝細(xì)胞通常從肝或肝組織中獲得,一般在肝切除手術(shù)中或者肝移植后排斥的肝組織中獲取,隨后即時(shí)進(jìn)行研究或者凍存待用。 原代肝細(xì)胞是肝臟疾病的研究以及相應(yīng)藥物的開發(fā)的重要載體。比如一些對(duì)于乙肝病毒的研究需要對(duì)肝細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng);一些嚴(yán)重肝臟疾病的細(xì)胞移植研究也要涉及到對(duì)原代肝細(xì)胞進(jìn)行大量擴(kuò)增。因此,原代肝細(xì)胞的體外培養(yǎng)和研究是一直以來科學(xué)家們關(guān)注的熱點(diǎn)。
在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),是否需要添加血清?在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常需要添加血清。血清是一種含有多種營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子的液體,可以提供細(xì)胞生長所需的營養(yǎng)和生長因子,促進(jìn)細(xì)胞的生長和增殖。血清中含有多種蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素、礦物質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì),可以為細(xì)胞提供能量和營養(yǎng),促進(jìn)細(xì)胞的生長和增殖。此外,血清中還含有多種生長因子,如胰島素、表皮生長因子等,可以促進(jìn)肝細(xì)胞的分化和增殖。然而,血清中也含有一些雜質(zhì)和微生物,可能會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長和功能產(chǎn)生不利影響。因此,在使用血清時(shí),需要選擇高質(zhì)量的血清,并對(duì)血清進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制和檢測,以確保血清的質(zhì)量和安全性。此外,在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),也可以使用無血清培養(yǎng)基或低血清培養(yǎng)基。無血清培養(yǎng)基或低血清培養(yǎng)基中不含有或含有較少的血清成分,可以減少血清對(duì)細(xì)胞的影響,提高細(xì)胞的純度和穩(wěn)定性。但是,無血清培養(yǎng)基或低血清培養(yǎng)基的成本較高,需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮徒?jīng)濟(jì)條件來選擇。總之,在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常需要添加血清。在選擇血清時(shí),需要選擇高質(zhì)量的血清,并對(duì)血清進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制和檢測。此外,也可以選擇無血清培養(yǎng)基或低血清培養(yǎng)基,以減少血清對(duì)細(xì)胞的影響。 貼壁原代肝細(xì)胞主要用于肝臟再生研究、肝臟3D打印、肝臟疾病研究、HBV、HCV病毒研究等。
原代肝細(xì)胞培養(yǎng)中去除endotoxin是十分重要的。原代肝細(xì)胞培養(yǎng)是一種常用的實(shí)驗(yàn)方法,但在培養(yǎng)過程中,細(xì)胞可能會(huì)受到endotoxin的污染,這會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。 endotoxin是一種由細(xì)菌產(chǎn)生的有毒物質(zhì),可以引起炎癥反應(yīng)和細(xì)胞損傷。在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)中,endotoxin可能來自于培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)器具或細(xì)胞本身。因此,需要采取一些措施來去除endotoxin。 一種常用的方法是使用endotoxin去除劑,例如聚陽離子樹脂(Polyclonal Cationic Resin,PCR)或聚乙烯醇(Polyvinyl Alcohol,PVA)。這些去除劑可以吸附endotoxin,從而減少其對(duì)細(xì)胞的影響。使用endotoxin去除劑的方法比較簡單,只需要將其加入培養(yǎng)基中,然后將細(xì)胞培養(yǎng)在其中即可。 可以使用endotoxin檢測試劑盒來檢測培養(yǎng)基中的endotoxin含量。如果檢測結(jié)果顯示endotoxin含量較高,可以考慮更換培養(yǎng)基或使用endotoxin去除劑。 除了使用去除劑和檢測試劑盒外,還可以采取一些預(yù)防措施來減少endotoxin的污染。例如,使用無菌技術(shù)操作、定期更換培養(yǎng)器具和培養(yǎng)基、避免過度攪拌和振蕩等。 去除endotoxin是原代肝細(xì)胞培養(yǎng)中必須注意的問題。采取適當(dāng)?shù)拇胧┛梢詼p少endotoxin的污染,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。立沃生物的原代肝細(xì)胞配套有有多種細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)支持,可以為客戶提供多維度的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)支持解決方案。北京貓?jiān)渭?xì)胞提取
立沃生物的原代肝細(xì)胞活力高,貼壁效果好,現(xiàn)貨供應(yīng),周期短,滿足基礎(chǔ)研究與藥物開發(fā)的個(gè)性化需求。天津中國人原代肝細(xì)胞培養(yǎng)步驟
原代肝細(xì)胞是簡單有效的生物體外模型。相比于其他類型誘導(dǎo)產(chǎn)生的肝臟細(xì)胞或是cancer細(xì)胞系,原代肝細(xì)胞在造模的同時(shí)不需要復(fù)雜的對(duì)細(xì)胞進(jìn)行重編程,以及誘導(dǎo)分化,可以更方便更快速的進(jìn)行高通量藥理研究。此外和另外兩種方式相比,原代肝細(xì)胞能夠更準(zhǔn)確的反應(yīng)體內(nèi)的真實(shí)情況,有數(shù)據(jù)表明,原代肝細(xì)胞比iPSC誘導(dǎo)產(chǎn)生的肝細(xì)胞內(nèi)的堿基取代少數(shù)倍,同時(shí)這些細(xì)胞還保留了捐獻(xiàn)者的特有特征,是較為理想的研究模型。另一個(gè)優(yōu)勢(shì)在于,原代肝細(xì)胞衍生的Organoid可以提供獨(dú)特的肝毒模型,因?yàn)樵?xì)胞保留了患者特有的I期II期藥物代謝情況。原代細(xì)胞不僅擁有捐贈(zèng)者特有的生理特性,同時(shí)也具備其他兩種肝細(xì)胞在應(yīng)對(duì)病原體時(shí)的生理反應(yīng)。天津中國人原代肝細(xì)胞培養(yǎng)步驟
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