研究人員發(fā)現(xiàn),離體培養(yǎng)48小時的全層皮膚可保持屏障特性,且能對不同強度的屏障破壞做出反應(yīng),使用膠帶剝離或4小時十二烷基硫酸鈉(SLS)處理通過破壞皮膚結(jié)構(gòu)、促進炎癥因子IL-6、IL-8的表達破壞皮膚屏障5]。使用1:1(v:v)乙mi:bing酮混合物對離體皮膚進行損傷造模,PPAR-α激動劑RFV3可通過增加神經(jīng)酰胺、絲聚蛋白和轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶1的表達來促進離體皮膚的屏障修護過程[”。離體皮膚模型還被用來評估清潔產(chǎn)品的功效,ZHOU等人通過對沐浴露A和沐浴露B處理的離體皮膚進行免疫熒光染色發(fā)現(xiàn),與水對照和沐浴露A處理相比,經(jīng)沐浴露B處理的離體皮膚在處理7天后,顆粒層和角質(zhì)層中絲聚蛋白的表達明顯減少,證明沐浴露B對皮膚屏障具有破壞作用,此外,使用MTT檢測離體皮膚的組織活力也是用來評價皮膚屏障修護功效的重要指標(biāo)。美白化妝品人體功效測試方法的優(yōu)勢在于其可量化的評估指標(biāo)。防曬護膚品功效評價
斑馬魚尾部脫水皺縮模型是評估化妝品保濕性能的關(guān)鍵工具。其皮膚真皮層含水通道蛋白AQP3,與人類透明質(zhì)酸合成酶HAS3協(xié)同調(diào)控水分平衡。實驗中,將斑馬魚胚胎置于高滲氯化鈉溶液中,尾部因脫水發(fā)生皺縮,通過顯微鏡測量尾部面積變化并檢測aqp3、has3基因表達量。例如,某糙米發(fā)酵濾液可使斑馬魚尾部面積縮小抑制率達65%,同時aqp3基因表達量提升2.3倍,證實其強的效保濕能力。該模型已被江蘇省特殊化妝品質(zhì)量監(jiān)督檢驗中心等機構(gòu)納入標(biāo)準(zhǔn)檢測流程,成為保濕功效宣稱的重要依據(jù)?;瘖y品功效檢測價格通過觀察斑馬魚的皮膚顏色變化,可以評估產(chǎn)品的美白效果和安全性。
環(huán)特人體功效實驗室的人體美白功效測試方案采用“儀器測量+主觀評估”相結(jié)合的多方位測試體系。SolarLight601日光模擬儀通過每日一次、連續(xù)4天的照射,模擬紫外線對皮膚的損傷,為產(chǎn)品提供真實的功效驗證場景;MexameterMX18黑色素測試探頭與ColorimeterCL400膚色測試儀,則在D0、D7、D14、D21、D28五個關(guān)鍵時間點,精細量化皮膚黑色素含量與ITA值的變化。同時,引入視覺評估與臨床評估,由專業(yè)人員使用色卡對膚色進行分級,并觀察灼熱、刺痛等皮膚不良反應(yīng)。這種多維度的數(shù)據(jù)采集方式,既捕捉了皮膚微觀層面的生理變化,又兼顧了使用者的主觀感受,使美白功效評價更加多方面、立體,為化妝品研發(fā)與改進提供深度洞察。
盡管用于化妝品評價的創(chuàng)新模型和技術(shù)在不斷發(fā)展,但無論是斑馬魚模型、體外細胞模型還是皮膚器官芯片等均不能完全模擬體內(nèi)皮膚的真實結(jié)構(gòu)與功能,這使得離體皮膚評價模型逐漸進入人們的視野。離體皮膚也被稱為皮膚外植體,它是由人體來源的皮膚組織經(jīng)體外培養(yǎng)而獲得的模型[26]。離體皮膚通過適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)方式,可在體外維持一定的組織活力,目前,已被廣泛應(yīng)用于化妝品功效測評、傷口愈合、皮膚相關(guān)疾病的研究中。離體皮膚是接近健康和患病皮膚生理機能的模型,包含完整的皮膚細胞類群如角質(zhì)形成細胞、成纖維細胞、黑素細胞、朗格漢斯細胞;含有膠原蛋白、彈性蛋白、糖胺聚糖等細胞外基質(zhì);包含皮膚附屬物如汗腺等叨。本文將在下面章節(jié)重點概述離體皮膚模型及其在化妝品功效評價中的應(yīng)用。根據(jù)化妝品實驗的目的,將斑馬魚胚胎分為實驗組和對照組。
皮膚外用產(chǎn)品的制造、運輸和銷售需要事先進行安全性評估,并評估可能因預(yù)期用途、誤用、或意外皮膚暴露而導(dǎo)致的皮膚反應(yīng)。離體皮膚的另一重要應(yīng)用是評估皮膚外用產(chǎn)品的安全性和功效性,這包括日用品、化妝品、藥品、醫(yī)療器械等。BURGHER等人使用腹部整形手術(shù)獲取的人體皮膚外植體研究了氫氟酸的腐蝕性,他們發(fā)現(xiàn)70%的氯氟酸在作用的5分鐘內(nèi)即可完全穿透皮膚,這與之前研究的意外氫氟酸暴露的臨床結(jié)果是一致的均。研究人員在OECDTG439標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)之上,開發(fā)了使用離體皮膚模型評估化合物是否具有潛在刺激性的方法。通過對120種化妝品刺激離體皮膚的實驗結(jié)果與人體斑貼實驗結(jié)果進行對比,發(fā)現(xiàn)離體皮膚模型檢測的特異性為89.9%,準(zhǔn)確率為89.1%[46]。此外,科研人員還使用彗星實驗對手術(shù)獲得的離體皮膚進行了化合物遺傳毒性的評估,通過將離體皮膚局部暴露于20中化學(xué)物質(zhì)中,他們發(fā)現(xiàn)其遺傳毒性檢測的靈敏度、特異性和準(zhǔn)確性分別為89%、90%和89%切。這些結(jié)果均表明離體皮膚是外用產(chǎn)品刺激性、腐蝕性、遺傳毒性等評價的可靠模型,具有廣泛的應(yīng)用前景。斑馬魚的胚胎發(fā)育過程透明,可以清晰觀察到各種細胞和組織的變化,這對于研究美白化妝品的效果非常有幫助?;瘖y品功效檢測價格
隨著人工智能技術(shù)的發(fā)展,可以利用大數(shù)據(jù)分析和機器學(xué)習(xí)算法,對美白化妝品的功效進行預(yù)測和優(yōu)化。防曬護膚品功效評價
糖化反應(yīng),又稱美拉德反應(yīng),其晚期糖基化產(chǎn)物也被稱為AGEs,AGEs隨著年齡不斷累積,一方面會通過改變真皮ECM的功能使細胞形態(tài)改變,另一方面會通過ji活下游信號通路,影響細胞、組織功能,促進皮膚衰老。具有抗糖基化活性的天然化合物可能具有較大的抗老潛力。糖基化誘導(dǎo)劑甲基乙二醛(MGO)可誘導(dǎo)糖基化產(chǎn)物的產(chǎn)生,在MGO造模的情況下,SHIN等人利用離體皮膚研究了沒食子酸甲酯的抗糖化作用,沒食子酸甲酯通過降低羧甲基賴氨酸(CML)的表達、刺激纖維蛋白I的表達來發(fā)揮其抗糖化作用[57。另一項在離體皮膚中的研究表明,氨基胍、葛根素、綠原酸可促進纖維蛋白1的產(chǎn)生和抑制CML的產(chǎn)生,這表明這些活性成分具備抗氧化和抗糖化的功效[58]。此外,與MGO處理相比,水飛薊花提取物水飛薊賓涂抹8天,可明顯降低皮膚外植體中CML的表達。防曬護膚品功效評價