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斑馬魚cas9基因敲除

來源: 發(fā)布時間:2025-04-12

水生環(huán)境日益惡化,斑馬魚Cdx環(huán)境監(jiān)測技術化身靈敏哨兵,守護水域生態(tài)平衡。斑馬魚生存與水環(huán)境緊密相連,Cdx基因作為應激響應關鍵樞紐,對溫度波動、化學污染、病原體入侵等脅迫反應迅速。水溫驟變時,Cdx環(huán)境監(jiān)測技術顯示Cdx基因上調熱休克蛋白基因表達,維持細胞內環(huán)境穩(wěn)定;若水體遭受重金屬、有機污染物污染,Cdx基因jihuo肝臟、腎臟jiedu酶基因,科研人員通過實時定量PCR、基因芯片等技術監(jiān)測Cdx及相關基因轉錄水平變化,量化污染程度。它在水中的呼吸依靠鰓部,水流經鰓時完成氣體交換。斑馬魚cas9基因敲除

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環(huán)特生物提供基于斑馬魚模型的基因編輯服務,利用CRISPR/Cas9技術快速在斑馬魚模型中驗證人類遺傳病、篩選致病基因、研究基因功能及作用通路等,主要研究領域為嬰幼兒發(fā)育畸形、罕見病、神經系統疾病、心腦的血管疾病、血液病、生殖缺陷等。相較于哺乳動物基因編輯的試驗周期長(一般1年以上)、表型不直觀(一般需染色)、研究成功率低等缺點,斑馬魚基因編輯模型主要優(yōu)勢有:1.實驗周期快,快可在2周內進行疾病相關的表型觀察(F0代高效瞬時敲降),3個月內完成穩(wěn)定品系構建(雜合子F1代3個月,純合子F2代6個月,子代數量多);2. 直觀、多維度地活的動態(tài)觀察(可對特定organ組織細胞進行熒光標記,利用透明斑馬魚活的觀察和成像,哺乳動物上很難實現);3. 研究成功率高(與哺乳動物相比較,斑馬魚基因編輯效率高,樣本數量多,可同時測試多個相關基因,比較大化保證研究的成功率)。斑馬魚基因編輯科研課題外包許多藥物研發(fā)初期,會以斑馬魚為模型,測試藥物毒性與功效。

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斑馬魚與人類在基因水平上具有較高的相似度,許多人類疾病相關的基因在斑馬魚中也有保守存在。因此,斑馬魚實驗在人類疾病研究中具有重要的應用價值。在心血管疾病研究方面,斑馬魚的心臟結構和功能與人類心臟有一定的相似性。通過誘導斑馬魚產生心血管系統的基因突變或使用藥物處理,可以模擬人類心血管疾病的發(fā)生過程,如先天性心臟病、心肌病等。研究人員可以觀察斑馬魚心臟的形態(tài)變化、心率異常以及血管的發(fā)育缺陷等表型,進而探究疾病的發(fā)病機制,并篩選潛在的醫(yī)療藥物。例如,一些研究發(fā)現特定的化合物能夠改善斑馬魚因基因突變導致的心臟功能障礙,這為開發(fā)醫(yī)療人類心血管疾病的新藥提供了線索。

在藥物研發(fā)進程中,PDX 斑馬魚模型發(fā)揮著極為關鍵的作用。傳統的藥物研發(fā)模式往往面臨諸多挑戰(zhàn),如藥物在動物模型和人體臨床試驗中的效果差異較大等問題。而 PDX 斑馬魚模型能夠較好地模擬人體tumor的異質性和復雜性。將患者tumor組織移植到斑馬魚后,可以針對特定tumor類型快速測試多種藥物的療效。由于斑馬魚體型小、用藥量少,很大降低了藥物篩選成本。例如,在抗ai藥物研發(fā)中,通過觀察藥物對 PDX 斑馬魚模型中tumor生長的抑制情況,能夠在早期階段淘汰無效藥物,加速有潛力藥物的研發(fā)進程,為患者爭取更多的醫(yī)療時間,同時也提高了藥物研發(fā)的成功率,促進整個制藥行業(yè)的創(chuàng)新與發(fā)展。研究斑馬魚的腦結構有助于理解認知和學習的基礎。

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看似專注于軀體架構規(guī)劃的斑馬魚cdx基因,實則與神經發(fā)育也有著千絲萬縷聯系。在胚胎腦部及脊髓雛形初現階段,cdx基因悄然施展影響力。它間接調控神經干細胞的增殖與分化節(jié)拍,確保生成足量神經元,滿足斑馬魚早期感知外界、驅動身體所需。舉例而言,科研人員利用基因編輯技術適度降低cdx表達量后,斑馬魚幼魚出現游泳姿態(tài)異常,頻繁打轉、失衡側翻。深入探究得知,脊髓中運動神經元發(fā)育受損,軸突延伸受阻,無法精細連接肌肉纖維,致使肌肉接收指令紊亂。cdx基因還參與構建神經回路,協同其他神經發(fā)育關鍵基因,塑造從感覺輸入到運動輸出的信息傳遞路徑,助力斑馬魚神經系統精細“布線”,在水中靈動游弋、機敏避險。某些基因突變會導致斑馬魚身體形態(tài)或生理功能異常。斑馬魚基因編輯科研課題外包

它的腎臟在維持體內水鹽平衡和排泄廢物中起重要作用。斑馬魚cas9基因敲除

斑馬魚通體透明,胚胎發(fā)育全程肉眼可視,但要精細追蹤Cdx基因表達細胞軌跡、實時洞悉其功能動態(tài),熒光標記技術不可或缺。通過基因融合手段,將熒光蛋白基因(如綠色熒光蛋白GFP、紅色熒光蛋白RFP)與Cdx基因相連,構建重組基因導入斑馬魚胚胎。發(fā)育進程中,表達Cdx基因的細胞同步表達熒光蛋白,在熒光顯微鏡下熠熠生輝。科研人員借此可觀察到Cdx基因在胚胎早期哪些細胞里率先jihuo,例如在中胚層、內胚層分化起始階段,熒光標記的Cdx陽性細胞呈現有序遷移、聚集規(guī)律,宛如夜空中閃爍移動的星群,精細勾勒細胞分化路線。斑馬魚cas9基因敲除