運用 CRISPR-Cas9 系統(tǒng)時，設計特異性引導 RNA（gRNA）精細靶向 Cdx 基因特定序列，Cas9 蛋白隨即切割 DNA 雙鏈，制造雙鏈斷裂。細胞自主修復過程中，通過插入、缺失或替換堿基，實現(xiàn) Cdx 基因定點突變。這一操作能模擬人類先天性疾病相關基因突變場景，如敲除斑馬魚 Cdx 基因關鍵位點，幼魚精細呈現(xiàn)脊柱發(fā)育不全、腸道畸形等表型，與人類患者病癥高度相似，為探究疾病發(fā)病分子機制提供活的模型。TALEN 技術則利用人工設計的轉錄jihuo樣效應因子核酸酶，同樣精細定位 Cdx 基因，誘導突變。相較于 CRISPR-Cas9，它在某些復雜基因位點編輯上更具優(yōu)勢，脫靶率更低，保障實驗精細性。這些基因編輯技術不僅用于構建疾病模型，還助力解析 Cdx 基因功能網(wǎng)絡，通過逐一敲除上下游調控基因，勾勒完整調控圖譜，明晰胚胎發(fā)育指揮鏈。光照周期會影響斑馬魚的生物鐘，進而改變其行為。斑馬魚性別決定相關基因

PDX（Patient-Derived Xenograft）斑馬魚模型是tumor研究領域的一項重大突破。它將患者來源的tumor組織移植到斑馬魚體內(nèi)，為精細醫(yī)學研究開辟了新途徑。斑馬魚具有獨特的生物學特性，其胚胎透明，便于在顯微鏡下直接觀察腫瘤細胞的生長、侵襲和轉移過程。而且斑馬魚繁殖迅速、子代數(shù)量多，能在短時間內(nèi)提供大量實驗樣本。在 PDX 斑馬魚模型中，tumor組織在斑馬魚體內(nèi)微環(huán)境的作用下不斷發(fā)展，研究人員可以借此深入探究tumor的生物學行為，例如腫瘤細胞與血管生成的關系。通過對不同患者來源tumor的移植研究，能夠篩選出更具針對性的醫(yī)療藥物和方案，提高ancer醫(yī)療的有效性，為攻克ancer難題帶來新的曙光。斑馬魚性別決定相關基因斑馬魚視覺系統(tǒng)發(fā)達，能敏銳感知光線變化與周圍物體移動。

在斑馬魚胚胎發(fā)育的奇妙進程里，cdx基因宛如一位精細無誤的指揮家，把控著關鍵節(jié)奏。cdx基因家族包含多個成員，它們早早就在胚胎中“嶄露頭角”，在受精卵分裂、分化初期便積極“發(fā)號施令”。斑馬魚胚胎要從一團初始的全能細胞逐步構建出復雜有序的軀體結構，cdx起著決定性引導作用。它精細調控中胚層與內(nèi)胚層細胞的命運走向，決定哪些細胞將發(fā)育成肌肉組織、哪些投身腸道構建。研究發(fā)現(xiàn)，當cdx基因功能受干擾時，斑馬魚胚胎后部發(fā)育明顯失常，脊柱彎曲、尾部短小甚至缺失，腸道也蜷縮不成形，蠕動功能大受影響。cdx基因通過jihuo一系列下游靶基因，促使細胞按預定程序分化、遷移，好似精密齒輪組有序運轉，一步步搭建起斑馬魚幼體完整架構，為其后續(xù)健康生長筑牢根基。

斑馬魚實驗模型在藥物研發(fā)過程中具有明顯的優(yōu)勢，為藥物篩選和評價提供了高效、快速和經(jīng)濟的平臺。其繁殖速度快、子代數(shù)量多的特點使得能夠在短時間內(nèi)對大量化合物進行高通量篩選。在藥物篩選實驗中，將斑馬魚胚胎或幼魚暴露于不同的藥物或化合物中，通過觀察斑馬魚的生長發(fā)育、生理功能、行為變化以及疾病模型中的表型改善情況等指標，來評估藥物的有效性和安全性。例如，在抗癲癇藥物研發(fā)中，可以利用斑馬魚癲癇模型，觀察候選藥物對斑馬魚癲癇發(fā)作的抑制作用。如果一種藥物能夠明顯減少斑馬魚的癲癇發(fā)作頻率和強度，并且對斑馬魚的正常生長發(fā)育沒有明顯的不良影響，那么該藥物就具有進一步開發(fā)的潛力。其肝臟在物質代謝等方面承擔重要任務。

看似專注于軀體架構規(guī)劃的斑馬魚cdx基因，實則與神經(jīng)發(fā)育也有著千絲萬縷聯(lián)系。在胚胎腦部及脊髓雛形初現(xiàn)階段，cdx基因悄然施展影響力。它間接調控神經(jīng)干細胞的增殖與分化節(jié)拍，確保生成足量神經(jīng)元，滿足斑馬魚早期感知外界、驅動身體所需。舉例而言，科研人員利用基因編輯技術適度降低cdx表達量后，斑馬魚幼魚出現(xiàn)游泳姿態(tài)異常，頻繁打轉、失衡側翻。深入探究得知，脊髓中運動神經(jīng)元發(fā)育受損，軸突延伸受阻，無法精細連接肌肉纖維，致使肌肉接收指令紊亂。cdx基因還參與構建神經(jīng)回路，協(xié)同其他神經(jīng)發(fā)育關鍵基因，塑造從感覺輸入到運動輸出的信息傳遞路徑，助力斑馬魚神經(jīng)系統(tǒng)精細“布線”，在水中靈動游弋、機敏避險。斑馬魚的骨骼系統(tǒng)雖簡單，但支撐身體和保護內(nèi)臟。斑馬魚cas9敲除

斑馬魚的眼睛位置獨特，視野范圍較廣，利于捕食和防御。斑馬魚性別決定相關基因

利用反義maka啉環(huán)寡核苷酸（Morpholino）特異性阻斷mRNA的翻譯或正確剪切，從而降低基因的表達水平，用于胚胎早期發(fā)育中基因功能研究；利用CRISPR/Cas9技術特異性地瞬時破壞基因的編碼序列，從而降低基因蛋白產(chǎn)物的表達水平來研究基因的功能，用于各個階段的基因功能研究。破壞該基因正常表達，主要用于在動物模型中研究基因的功能等。定點插入外源核酸片段，用于標記基因的精細表達模式、破壞該基因正常表達、構建點突變、實現(xiàn)時間空間上控制基因表達等。斑馬魚性別決定相關基因