目前dPCR主要有兩種形式，芯片式和液滴式，但基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應器或微滴中，每個反應器的核酸模板數少于或者等于1個。這樣經過PCR循環(huán)之后，有一個核酸分子模板的反應器就會給出熒光信號，沒有模板的反應器就沒有熒光信號。根據相對比例和反應器的體積，就可以推算出原始溶液的核酸濃度?？梢允褂脦追N不同的方法來分配樣品，包括微孔板，毛細管，油乳劑和帶有核酸結合表面的小型化腔室陣列。樣品的分配使人們可以通過假設分子種群遵循泊松分布來估計不同分子的數量，根據泊松分布的原理，反應體系中目標分子的拷貝數可以通過公式A=-ln[(N-X)/N]*N計算，從而解決了多個目標分子存在于單個液滴中的可能性。我國數字PCR市場的整體規(guī)模、公司影響力、行業(yè)話語權等也將迎來進一步提升，從而助推行業(yè)高質量創(chuàng)新發(fā)展。美國賽默飛數字PCR性能特點

Drop-off實驗包括兩個針對相同擴增子的TaqMan探針：與野生型序列互補而與突變位點不發(fā)生互補的Drop-off探針和與突變型和野生型基因都互補的Reference探針（如圖1A）。在野生型等位基因的存在下，Drop-off探針和Reference探針都將與目標雜交，產生雙重陽性信號（如圖1B，藍色群）。相反，如果存在突變的等位基因，即使一個核苷酸的突變也會阻止Drop-off探針與之雜交，因此只有Reference探針對目標基因進行退火，從而得到一個陽性信號。蘇州數字PCR原理全自動數字PCR一體機可以適用于包括醫(yī)療檢測領域在內的多種應用場景。

數字PCR系統(tǒng)的分散方式決定了分散數量，其結果基于統(tǒng)計的方法進行定量，增加反應單元數量（統(tǒng)計樣本量），可以增加其檢測的容量和動態(tài)檢測線性范圍達到和qPCR相近的動態(tài)范圍，同時減小一個反應單元中包含多個分子所造成的誤差，達到提高靈敏度和準確度。影響dPCR定量結果的因素包括：儀器采用的分散方式與數量、溶液稀釋方法、分散體積的準確性以及結果表達方式。分散方式與數量由數字PCR系統(tǒng)決定，分散體積和結果表達方式需要實驗人員在實驗過程中優(yōu)化得到。

相比于cPCR技術和第二代qPCR技術，dPCR技術具有定量，可溯源至SI國際單位制摩爾；基質成分干擾較小[51]；靈敏度高；對抑制劑的敏感性較低；適合多重轉基因檢測[52.53]，可提高分析效率；實驗條件優(yōu)化簡單[54]對實驗條件優(yōu)化的要求較低，適合多重基因檢測等優(yōu)勢，可為轉基因農作物提供準確的量值保證，目前dPCR儀器的價格仍然十分昂貴，但隨著系統(tǒng)加工工藝的改進以及使用較便宜的材料，聚合成更小的體積[556]，其價格將會不斷的降低，使其應用到更多的檢測中。dPCR的結果統(tǒng)計方式有2種，一種是采用標記多種顏色，另一種采用概率統(tǒng)計的數據處理方法。

dPCR的測量結果通常表示為含量，即拷貝數值或轉基因質量百分比，而QPCR結果通常表示為拷貝數的質量分數。目前市場上可購買到大多數轉基因標準物質，以qPCR定值的標準物質是以拷貝數（單倍體基因組當量）的質量分數來表示特性量；以dPCR定值的標準物質直接采用拷貝數比例來表示特性量。不同方法使用不同的表示方式，會造成測量結果不可比。因此質量分數、拷貝數和拷貝數比例之間的關系需要轉化，才能得到單位一致，數值可比的數據。EU聯合研究中心建議使用轉換因子從拷貝數換算到質量分數。在使用dPCR進行轉基因檢測時，通常直接參照qPCR的方法。一體化數字PCR樣品回收

通過數字PCR技術可建立多重熒光體系，用于同時檢測比如非小細胞中常見的MET和HER2耐藥擴增。美國賽默飛數字PCR性能特點

由于現有的商業(yè)化數字PCR設備在物理上只設置了2個檢測通道，所以存在一個明顯的短板：不能同時進行多個位點的檢測。在樣品多位點的檢測中，就需要更多的起始樣品，但臨床上組織的樣品非常有限。相比之下熒光定量PCR儀上就很容易實現多重檢測。為了考察利用數字PCR實現多重檢測的可能性，英國TheInstituteofCancerResearch的研究人員以非小細胞肺相關的KRAS基因為檢測對象，在Bio-Rad的數字PCR系統(tǒng)上通過3個三重ddPCR檢測體系來實現9個KRAS突變位點的檢測。美國賽默飛數字PCR性能特點

廣州雙螺旋科學儀器有限公司位于廣州市黃埔區(qū)銳豐三街4號617房，交通便利，環(huán)境優(yōu)美，是一家服務型企業(yè)。是一家有限責任公司（自然）企業(yè)，隨著市場的發(fā)展和生產的需求，與多家企業(yè)合作研究，在原有產品的基礎上經過不斷改進，追求新型，在強化內部管理，完善結構調整的同時，良好的質量、合理的價格、完善的服務，在業(yè)界受到寬泛好評。公司始終堅持客戶需求優(yōu)先的原則，致力于提供高質量的數字PCR，純水機，病理切片機，倍性分析儀。雙螺旋科學儀器將以真誠的服務、創(chuàng)新的理念、***的產品，為彼此贏得全新的未來！