RV沙氏增菌肉湯廣泛應(yīng)用于食品、環(huán)境樣本和臨床樣本中沙門氏菌的檢測(cè)與分離。其高度選擇性的特性使其成為從復(fù)雜樣本中分離沙門氏菌的理想工具。在食品檢測(cè)中,RV肉湯常用于檢測(cè)肉類、蛋類、乳制品和加工食品中的沙門氏菌。在環(huán)境微生物學(xué)中,RV肉湯可用于檢測(cè)水樣、土壤樣本中的沙門氏菌。在臨床檢測(cè)中,RV肉湯可用于檢測(cè)糞便樣本中的沙門氏菌,幫助診斷沙門氏菌。在實(shí)驗(yàn)操作中,RV肉湯的制備過(guò)程簡(jiǎn)單:將27.1g干粉溶解于1000mL蒸餾水中,加熱攪拌至完全溶解后,分裝試管并進(jìn)行115℃高壓滅菌20分鐘。這種制備方式不僅保證了培養(yǎng)基的無(wú)菌性,還確保了其成分的均勻分布。在實(shí)際應(yīng)用中,RV肉湯還可直接用于糞便樣本的沙門氏菌分離,無(wú)需預(yù)增菌,但需控制接種量。需要注意的是,RV肉湯不適用于分離傷寒沙門氏菌,此時(shí)需采用其他選擇性增菌培養(yǎng)基。RV肉湯的使用方法也較為靈活。在檢測(cè)食品樣本時(shí),通常將樣本經(jīng)過(guò)預(yù)處理后,接種到RV肉湯中,然后在42±1℃的條件下培養(yǎng)18-24小時(shí)。培養(yǎng)后,通過(guò)觀察培養(yǎng)液的渾濁度和顏色變化,初步判斷沙門氏菌的存在。隨后,可將培養(yǎng)液劃線接種到選擇性平板上儲(chǔ)存穩(wěn)定,常溫保存不易變質(zhì),開(kāi)瓶后性能持久,減少浪費(fèi),為科研項(xiàng)目持續(xù)開(kāi)展提供有力保障。L-半胱氨酸鹽酸溶液
RV沙氏增菌肉湯的保存條件對(duì)其性能至關(guān)重要。干粉培養(yǎng)基應(yīng)在2-30℃的環(huán)境中避光保存,制備好的液體培養(yǎng)基則需在2-8℃下避光保存。在使用過(guò)程中,操作人員需注意避免攝入、吸入或皮膚接觸培養(yǎng)基成分,尤其是在配制時(shí)應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行,佩戴口罩、手套和護(hù)目鏡。此外,RV肉湯的液體形態(tài)為孔雀藍(lán)色透明溶液,使用前需檢查其澄清度和顏色是否正常。這些細(xì)節(jié)的把控能夠確保RV肉湯在實(shí)驗(yàn)中的穩(wěn)定性和可靠性。在保存過(guò)程中,RV肉湯的干粉培養(yǎng)基應(yīng)存放在干燥、陰涼的地方,避免受潮和陽(yáng)光直射。受潮可能導(dǎo)致培養(yǎng)基成分結(jié)塊,影響其溶解度和均勻性。制備好的液體培養(yǎng)基則需在2-8℃下避光保存,以防止細(xì)菌污染和成分降解。在使用前,需檢查培養(yǎng)基的顏色和澄清度。如果培養(yǎng)基出現(xiàn)渾濁或顏色變化,可能表明培養(yǎng)基受到污染或成分降解,此時(shí)應(yīng)停止使用。在使用過(guò)程中,操作人員需注意個(gè)人防護(hù)。由于RV肉湯中含有孔雀綠等成分,操作時(shí)應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行,佩戴口罩、手套和護(hù)目鏡,以避免吸入或接觸培養(yǎng)基成分。此外,RV肉湯的使用量和接種量也需嚴(yán)格控制。DTA培養(yǎng)基DTA瓊脂培養(yǎng)基亞硫酸鉍瓊脂培養(yǎng)基成分配比,營(yíng)養(yǎng)豐富,支持沙門氏菌快速生長(zhǎng)37℃培養(yǎng)24-48小時(shí)即可觀察到典型菌落。
支原體培養(yǎng)基基礎(chǔ)(含精氨酸)是一種專門用于培養(yǎng)支原體的微生物培養(yǎng)基,其特點(diǎn)主要包括:1.**成分**:該培養(yǎng)基包含月示胨、蛋白胨、牛肉浸粉、牛心浸粉、氯化鈉、葡萄糖、酵母浸粉、苯酚紅和L-精氨酸等成分。這些成分為支原體提供氮源、維生素、礦物質(zhì),以及碳源和必要的生長(zhǎng)因子。其中,L-精氨酸是可水解的氨基酸,苯酚紅作為pH指示劑。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通??刂圃?.6-7.8(25℃),以保證支原體的生長(zhǎng)環(huán)境。3.**培養(yǎng)基配制**:使用時(shí),需要稱取培養(yǎng)基基礎(chǔ)33克,溶解于1000mL蒸餾水中,經(jīng)過(guò)121℃高壓滅菌15分鐘后冷卻至室溫。然后無(wú)菌操作加入馬血清100mL、青霉素80萬(wàn)單位和1%醋酸鉈10mL,混勻后分裝無(wú)菌試管,放置-20℃保存。4.**應(yīng)用**:適用于培養(yǎng)支原體的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,尤其適合于利用精氨酸的支原體,如口腔支原體等。支原體可以利用培養(yǎng)基中的精氨酸,使培養(yǎng)基pH值升高,遇指示劑酚紅使培養(yǎng)基變紅,從而可以判斷支原體的生長(zhǎng)情況。5.**靈敏度檢查**:通過(guò)變色單位試驗(yàn)法(CCU)進(jìn)行靈敏度檢查,以確保培養(yǎng)基能夠有效地檢測(cè)到支原體的存在。
Baird-Parker瓊脂培養(yǎng)基是一種高度特異性的選擇性培養(yǎng)基,專為金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)的分離和鑒定而設(shè)計(jì)。其成分包括胰蛋白胨、酵母提取物、甘氨酸、亞碲酸鉀和卵黃乳液。這些成分通過(guò)協(xié)同作用實(shí)現(xiàn)選擇性抑制非目標(biāo)菌群,同時(shí)促進(jìn)目標(biāo)菌的典型形態(tài)表達(dá)。例如,亞碲酸鉀作為抑制劑可有效抑制革蘭氏陰性菌和部分革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(zhǎng),而甘氨酸則通過(guò)調(diào)節(jié)滲透壓增強(qiáng)金黃色葡萄球菌的耐受力。卵黃乳液中的卵磷脂和脂肪酶底物為菌落特征性反應(yīng)(如溶血圈和脂肪酶活性)提供顯色與生化指示功能。該培養(yǎng)基的高選擇性源于其的配方比例:亞碲酸鉀濃度(0.1g/L)在抑制競(jìng)爭(zhēng)菌的同時(shí)不影響目標(biāo)菌活性,而作為能量補(bǔ)充劑提升復(fù)蘇受損菌株的效率。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明,Baird-Parker瓊脂對(duì)金黃色葡萄球菌的回收率超過(guò)95%,而對(duì)大腸桿菌(Escherichiacoli)和腸球菌(Enterococcus)的抑制率分別達(dá)99.2%和98.7%。這種高效選擇性使其在復(fù)雜樣本(如食品、臨床分泌物)的檢測(cè)中展現(xiàn)出性能,尤其適用于低豐度目標(biāo)菌的富集培養(yǎng)。腸道菌增菌肉湯(EE肉湯)培養(yǎng)基緩沖體系穩(wěn)定pH值維持在7.2±0.2,為微生物生長(zhǎng)提供適宜環(huán)境,實(shí)驗(yàn)重復(fù)性高。
在微生物鑒定領(lǐng)域,三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基(TSI)一直是不可或缺的重要工具。TSI培養(yǎng)基以其獨(dú)特的配方的性能,廣泛應(yīng)用于腸道菌群的分離、鑒定以及細(xì)菌代謝特性的研究。其成分包括乳糖、蔗糖和葡萄糖三種糖類,以及鐵離子和酚紅指示劑。這種組合使得TSI能夠反映細(xì)菌對(duì)不同糖類的發(fā)酵能力以及硫化氫的產(chǎn)生情況,從而為微生物的分類和鑒定提供關(guān)鍵依據(jù)。TSI培養(yǎng)基的配方設(shè)計(jì)充分考慮了微生物代謝的多樣性。乳糖、蔗糖和葡萄糖的添加,使得培養(yǎng)基能夠同時(shí)檢測(cè)細(xì)菌對(duì)這三種糖的發(fā)酵能力。例如,大腸桿菌能夠發(fā)酵乳糖和葡萄糖,產(chǎn)生酸性代謝產(chǎn)物,使酚紅指示劑變黃,同時(shí)不產(chǎn)生硫化氫;而沙門氏菌則可以發(fā)酵葡萄糖,但不發(fā)酵乳糖,且產(chǎn)生硫化氫,使培養(yǎng)基底部變黑。這種差異化的反應(yīng)模式為快速區(qū)分腸道菌群提供了可能。此外,TSI培養(yǎng)基的酚紅指示劑能夠靈敏地檢測(cè)pH值的變化,進(jìn)一步增強(qiáng)了其在代謝檢測(cè)中的準(zhǔn)確性。在實(shí)際應(yīng)用中,TSI培養(yǎng)基的性能表現(xiàn)尤為突出。其瓊脂含量適中,既保證了培養(yǎng)基的穩(wěn)定性,又便于細(xì)菌的生長(zhǎng)和擴(kuò)散。葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基中添加磷酸氫二鉀和硫酸鎂,維持滲透壓平衡,提供必需離子,確保微生物生長(zhǎng)環(huán)境穩(wěn)定。改良羅氏培養(yǎng)基基礎(chǔ)
結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂適用于大腸菌群的固體平板檢測(cè),符合GB、SN等標(biāo)準(zhǔn),廣泛應(yīng)用于食品、水質(zhì)檢測(cè)等領(lǐng)域。L-半胱氨酸鹽酸溶液
腦心浸出液肉湯(BrainHeartInfusionBroth,簡(jiǎn)稱BHI)是一種使用的微生物培養(yǎng)基,其特點(diǎn)如下:1.**營(yíng)養(yǎng)豐富**:BHI培養(yǎng)基含有牛心浸粉、胰蛋白胨、葡萄糖、氯化鈉和磷酸氫二鈉等成分,為多種微生物提供碳源、氮源、維生素和生長(zhǎng)因子。這種培養(yǎng)基特別適合培養(yǎng)苛養(yǎng)型致病微生物,如鏈球菌、腦膜炎球菌、肺炎球菌等。2.**pH穩(wěn)定**:BHI培養(yǎng)基的pH值通??刂圃?.4±0.2(25℃),這為微生物的生長(zhǎng)提供了適宜的酸堿環(huán)境。3.**非選擇性**:BHI培養(yǎng)基是非選擇性的,意味著它能夠支持細(xì)菌、霉菌和酵母菌等多種微生物的生長(zhǎng)。4.**應(yīng)用廣**:BHI培養(yǎng)基可用于從臨床標(biāo)本中進(jìn)行需氧細(xì)菌的初步分離,也可用于培養(yǎng)單增李斯特菌、葡萄球菌等,以及進(jìn)行血漿凝固酶試驗(yàn)和藥敏實(shí)驗(yàn)。5.**制備方法**:將BHI培養(yǎng)基的干粉加入到蒸餾水中,加熱煮沸以完全溶解,然后在121°C條件下高壓蒸汽滅菌15分鐘。6.**儲(chǔ)存條件**:BHI培養(yǎng)基通常在避光、干燥的條件下保存,未開(kāi)封的保質(zhì)期可達(dá)三年。7.**質(zhì)量控制**:使用特定的質(zhì)控菌株進(jìn)行生長(zhǎng)測(cè)試,確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合標(biāo)準(zhǔn),如糞腸球菌ATCC29212、金黃色葡萄球菌ATCC6538等。L-半胱氨酸鹽酸溶液