細(xì)胞凍存液是如何保護細(xì)胞的:細(xì)胞這一微小的生命體和地球的其它生命相似,機體的主要成份是由液態(tài)的H2O組成,但是其結(jié)構(gòu)微小復(fù)雜,內(nèi)部任何的物理損傷對于它都是致命的。水在低于零度的條件下會結(jié)冰。如果將細(xì)胞懸浮在純水中,隨著溫度的降低,細(xì)胞內(nèi)外的水份都會結(jié)冰,所形成的冰晶會造成細(xì)胞膜和細(xì)胞器的破壞而引起細(xì)胞死亡,這種因細(xì)胞內(nèi)部結(jié)冰而導(dǎo)致的細(xì)胞損傷稱為細(xì)胞內(nèi)冰晶的損傷。如果將細(xì)胞懸浮在溶液中,隨著溫度的降低,細(xì)胞外部的水分會首先結(jié)冰,從而使得未結(jié)冰的溶液中電解質(zhì)濃度升高。如果將細(xì)胞暴露在這樣高溶質(zhì)的溶液中且時間過長,細(xì)胞膜上脂質(zhì)分子會受到損壞,細(xì)胞便發(fā)生滲漏,在復(fù)溫時,大量水分會因此進入細(xì)胞內(nèi),造成細(xì)胞死亡。這種因保存溶液中溶質(zhì)濃度升高而導(dǎo)致的細(xì)胞損傷稱為溶質(zhì)損傷或稱溶液損傷。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品特色:獨特配方有效提高細(xì)胞凍存存活率及復(fù)蘇率。南京濟南無血清細(xì)胞凍存液
細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以較大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細(xì)胞造成損傷。細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實驗順利進行的重要技術(shù)手段。在細(xì)胞建株和建系中,及時凍存原始細(xì)胞是十分重要的。在雜交瘤單克隆抗體的制備過程中,雜交瘤細(xì)胞、每次克隆化得到的亞克隆細(xì)胞的凍存保種常常是必不可少的實驗操作。因為在沒有建立一個穩(wěn)定的細(xì)胞系或穩(wěn)定分泌抗體的細(xì)胞系的時候,細(xì)胞的培養(yǎng)過程中隨時可能因細(xì)胞的污染、分泌抗體能力的喪失或遺傳變異等等導(dǎo)致實驗失敗,如果沒有原始細(xì)胞的凍存,則因為上述的意外而前功盡棄。蕪湖開封無血清細(xì)胞凍存液細(xì)胞凍存可以分為程序降溫凍存與非程序降溫凍存。
無血清細(xì)胞凍存液使用方法:選擇凍存處于對數(shù)生長期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。1)按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中。2)按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計算所需凍存細(xì)胞數(shù)。(參考:5×105至5×106cells/ml)。3)取相當(dāng)于所需細(xì)胞數(shù)的細(xì)胞懸浮液量,置于離心管中,離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,4℃,3~5min)。移去離心管中的上清液。4)加入適量的無血清型細(xì)胞凍存液于離心管中,使細(xì)胞濃度為5×105至5×106cells/ml。緩慢地混合均勻,制成細(xì)胞混合液。5)將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示完全的冷凍保存管中。6)直接將含細(xì)胞混合液的凍存管放入-80℃以下冰箱,長期冷凍保存。
無血清細(xì)胞凍存液是一種無血清細(xì)胞凍存液,通用于各種動物細(xì)胞株(tumour細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞),凍存細(xì)胞可在-80℃長期保存(>5年)。CELLSAVING配方成分明確,不含動物來源性蛋白,不含血清,可減少各類細(xì)菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細(xì)胞的安全。細(xì)胞凍存液操作簡便,無需程序降溫,可在-80度或液氮中長期保存。相比于傳統(tǒng)凍存液,埃澤思生物推出的此款凍存液可以明顯增加細(xì)胞活力,穩(wěn)定保持細(xì)胞特性,以及細(xì)胞多能性,并且可以穩(wěn)定保持細(xì)胞的正常核型和增殖能力。細(xì)胞凍存液已經(jīng)經(jīng)過動物直接注射實驗檢測,包括靜脈注射,皮下注射途徑,無明顯細(xì)胞毒性,動物安全性非常高。無血清細(xì)胞凍存液存儲條件:為避免重復(fù)凍融過程可能導(dǎo)致的凍存液品質(zhì)下降和性能降低。
如何提高細(xì)胞凍存成功率:無菌!無菌!無菌!要折騰嬌貴的細(xì)胞寶寶,必須要在無菌超凈環(huán)境下才行。超凈工作臺,所有的儀器用品提前滅菌,培養(yǎng)箱什么的定期用酒精擦干凈。微生物污染對細(xì)胞的影響經(jīng)常是開始的時候沒發(fā)現(xiàn),發(fā)現(xiàn)的時候已經(jīng)結(jié)束了,所以千萬要小心。除了操作中的各種小細(xì)節(jié),還有一個實驗雷區(qū),就是配制細(xì)胞凍存液。常見的凍存液配制要遵循培養(yǎng)基+血清+DMSO的成分要求,根據(jù)細(xì)胞實際判斷成分配比,還建議使用程控儀,注意配制溫度,一個不小心就又會影響細(xì)胞的存活效果。無血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢:無血清細(xì)胞凍存液是不含血清和動物源成分。太原正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液銷售廠家
無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品特色:可微量,原位凍存,例如雜交瘤細(xì)胞的凍存,省時高效。南京濟南無血清細(xì)胞凍存液
無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品用途:1.無血清細(xì)胞凍存液可用于造血干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞等干細(xì)胞的儲存。2.無血清細(xì)胞凍存液可用于T淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞的存儲。3.無血清細(xì)胞凍存液可用于其他類型哺乳動物細(xì)胞的儲存。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品原理:無血清細(xì)胞凍存液,含多種保護劑成分。一些保護劑,易于穿透細(xì)胞,避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細(xì)胞,同時另一些保護劑不能穿透細(xì)胞,但可以在冰晶形成之前,優(yōu)先結(jié)合細(xì)胞外的水分子,降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度,減少陽離子進入細(xì)胞的數(shù)量,無血清細(xì)胞凍存液,為多種保護劑組合,在細(xì)胞內(nèi)外進行雙重保護,較大提高了細(xì)胞復(fù)蘇存活率。南京濟南無血清細(xì)胞凍存液