原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖,因此,它們的形態(tài)學和生理特征和體內狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細胞系,它們通常更難培養(yǎng)和轉染。在經過***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細胞系具有有限的壽命(即它們是有限細胞系),且隨著傳代的進行,具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據(jù)支配地位,從而造成了細胞群內的基因型和表型接近一致的情形。相對來說,這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便,尤其是穩(wěn)定轉染的克隆傳代。給你選擇CycloFect轉染試劑的五大理由!非脂質體轉染試劑原理
轉染產品知多少:轉染試劑選擇工具收錄于話題轉染是將核酸導入真核細胞中的過程,是細胞生物學、基因表達和基因***實驗中的關鍵步驟。不同的實驗方案和技術差別巨大,我們可以利用化學方法或脂質體將核酸(DNA或RNA)高效輸送到細胞內,也可以使用電穿孔方法利用電流在細胞膜上開孔,使核酸進入細胞內。賽默飛提供了多種高質量的轉染產品,適用于各種細胞類型的轉染。如何選擇**受信賴的可用于轉染的系統(tǒng),是實驗結果的重要影響因素。慢病毒轉染試劑作用包括**常見的DNA,用于基因編輯的siRNA,能夠更快表達蛋白的mRNA,CRISPR-Cas9甚至是體內轉染。
對CHO細胞轉染效率的比較右圖:使用以上轉染試劑將編碼熒光素酶蛋白的cDNA(phRL-CMV)和綠色熒光蛋白GFP的cDNA按照生產商的提供的轉染步驟分別轉染到CHO細胞。在轉染24小時后,熒光素酶的活性使用Beckman公司的化學發(fā)光監(jiān)測器測定;GFP陽性細胞率使用BD公司的FACS檢測。左圖:LipoD293試劑(升級版)和Lipofecatmine2000(L2K),TransIT以及Fugene6的價格比較(美元/1000微升)。所有的價格是從生產制造商的網站上收集對CHO細胞轉染效率的比較右圖:使用以上轉染試劑將編碼熒
siRNA,加入HiperFect轉染試劑混勻并溫育5-10min,將混合物逐滴加入培養(yǎng)皿中混勻,培養(yǎng)細胞直到適當?shù)臅r候檢測基因沉默效果。這個快速操作流程簡便到還可以用于“反向轉染”,方便至極。當然,習慣用傳統(tǒng)方法也是可以的,只要培養(yǎng)到細胞匯合度50%—80%進行轉染就可以了。沒有禁用血清、***的困擾,HiperFect真的是將實驗簡化到了***。適合多種細胞類型:HiPerfect可高效轉染多種細胞類型,包括HeLa、HeLaS3、HEK293、NIH/3T3、Huh-7、HepG2、MCF-7、HUVEC和NHLF等。對于原代細胞,產品手冊中列出了轉染原代HUVEC、成纖維細胞、角質細胞、上皮細胞和平滑肌細胞的操作步驟,貼心用于siRNA的轉染試劑,還有通用型轉染試劑Lipofectamine?.
確定希望輸送的運載物
(如DNA、RNA或蛋白質)
根據(jù)不同實驗類型,我們可能需要將不同的運載物輸送到細胞內部,包括**常見的DNA,用于基因編輯的siRNA,能夠更快表達蛋白的mRNA,CRISPR-Cas9甚至是體內轉染。正確的了解您希望輸送的運載物是選擇可靠轉染產品的第一步。
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希望轉染的細胞類型
轉染的細胞類型可簡單分為兩大類,連續(xù)細胞系和原代細胞。
連續(xù)細胞系具有無限增殖的潛能,通常要比原代或有限細胞更易處理。但由于此類細胞經歷過基因改變而變得具有無限增殖能力,它們在培養(yǎng)過程中的表現(xiàn)可能無法必然地反映體內狀態(tài)。 但相對于連續(xù)細胞系,它們通常更難培養(yǎng)和轉染。上海腺病毒轉染試劑選購
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功能介紹 西安中團生物科技有限公司坐落于陜西省西安市碑林區(qū),是專門從事分子生物學、細胞生物學、免疫學、微生物學、臨床醫(yī)學試劑及儀器研究、銷售的高科技企業(yè)。中團生物與國內外大學、中科院及醫(yī)科院等科研機構建立了良好的合作關系。 4月30日 收錄于話題Advanced DNA RNA轉染試劑(AD600025、AD600050、AD600075、AD600150、AD600500、AD601000)
貨號:AD600025、AD600050、AD600075、AD600150、AD600500、AD601000
Advanced DNA RNA轉染試劑
適用貼壁細胞和懸浮細胞 細胞毒性低
適用細胞廣 高效轉染效率
產品名稱貨號規(guī)格數(shù)量報價Advanced DNA RNA轉染試劑AD6000250.25ML1詢價Advanced DNA RNA轉染試劑AD6000500.5ml1詢價Advanced DNA RNA轉染試劑AD6000750.75ml1詢價Advanced DNA RNA轉染試劑AD6001501.5ML1詢價Advanced DNA RNA轉染試劑AD6005005ML1詢價Advanced DNA RNA轉染試劑AD60100010ML1詢價 非脂質體轉染試劑原理