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北京GC-MS非靶向代謝組學(xué)定性分析

來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-05-23

靶向代謝組學(xué):靶向代謝組學(xué)分析主要是以標(biāo)準(zhǔn)品為參照,對特定的代謝物群進(jìn)行有針對性地、特異性地檢測與分析。通常采用的技術(shù)方案包括常規(guī)的液質(zhì)聯(lián)用(LC-MS)分析技術(shù)和選擇性反應(yīng)/多反應(yīng)監(jiān)測技術(shù)(MRM/ SRM)。常規(guī)分析法首先利用LC-MS的方法對待分析樣本進(jìn)行大規(guī)模代謝組分析,然后通過與相同分析條件下標(biāo)準(zhǔn)品的分析結(jié)果進(jìn)行比對,實(shí)現(xiàn)對樣本內(nèi)目標(biāo)代謝群的定性和定量分析。MRM/SRM技術(shù)是基于已知或假定的反應(yīng)離子信息,有針對性地選擇數(shù)據(jù)進(jìn)行質(zhì)譜信號采集,對符合規(guī)則的離子對進(jìn)行信號記錄,去除不符合規(guī)則離子信號的干擾。定量過程中,該技術(shù)首先篩選到目標(biāo)代謝物特異性的母離子,然后選擇性地對這些母離子進(jìn)行碰撞誘導(dǎo),去除其他離子的干擾,只對選定的特異MS/MS2離子進(jìn)行質(zhì)譜信號的采集,從而實(shí)現(xiàn)對目標(biāo)代謝分子更為特異、靈敏、準(zhǔn)確的分析。代謝組學(xué)主要技術(shù)手段是核磁共振。北京GC-MS非靶向代謝組學(xué)定性分析

LC-MS非靶向代謝組學(xué):LC-MS非靶向代謝組學(xué)通過液質(zhì)聯(lián)用(LC-MS)方法檢測生物體受外界刺激前后體內(nèi)大多數(shù)小分子代謝物的動態(tài)變化,重點(diǎn)尋找在實(shí)驗(yàn)組和對照組中有明顯變化的代謝物,進(jìn)而研究這些代謝物與生理病理變化的相關(guān)關(guān)系,其研究對象大都是分子量1500Da以內(nèi)的小分子物質(zhì)。LC-MS非靶向代謝組學(xué)技術(shù)優(yōu)勢:1、較高的靈敏度、分辨率;2、較寬的動態(tài)范圍;3、適合于生物樣本中復(fù)雜代謝產(chǎn)物的檢測和潛在標(biāo)志物的鑒定;4、適合對標(biāo)本中未知代謝物的探索研究。四川個(gè)性化定制靶向代謝組學(xué)分析方法代謝組學(xué)的研究介于基因、蛋白質(zhì)和細(xì)胞、組織之間。

代謝組學(xué)的研究領(lǐng)域有哪些?1、疾病機(jī)制研究;2、疾病診斷與防治;3、新藥篩選和開發(fā);4、藥物作用機(jī)制的研究;5、藥物毒性評價(jià);6、植物的細(xì)胞代謝組學(xué)研究;7、微生物代謝組學(xué)研究。代謝組學(xué)的研究方法:代謝組學(xué)的研究方法與蛋白質(zhì)組學(xué)的方法類似,通常有兩種方法。一種方法稱作代謝物指紋分析,采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)的方法,比較不同血樣中各自的代謝產(chǎn)物以確定其中所有的代謝產(chǎn)物。從本質(zhì)上來說,代謝指紋分析涉及比較不同個(gè)體中代謝產(chǎn)物的質(zhì)譜峰,了解不同化合物的結(jié)構(gòu),建立一套完備的識別這些不同化合物特征的分析方法。另一種方法是代謝輪廓分析,研究人員假定了一條特定的代謝途徑,并對此進(jìn)行更深入的研究。

代謝組學(xué)樣品收集方法及所需樣本量是什么?根據(jù)不同的檢測要求,需要配合不同的樣本量和樣本采集方法,常規(guī)的方法和單個(gè)樣本量如下:(1) 微生物和細(xì)胞樣本:細(xì)胞迅速猝滅細(xì)胞并冷凍保存;單個(gè)樣本細(xì)胞數(shù)量要求10^6。(2) 動物體液(如尿、血、組織、唾液):采樣后要迅速預(yù)處理,如加入抗凝血?jiǎng)?、防腐劑,并立即冷凍處理?80 ℃);單個(gè)樣本要求體積為10μL。(3) 植物樣本:采集后迅速冷凍(液氮),然后轉(zhuǎn)入-80℃保存,單個(gè)樣本要求質(zhì)量為50mg。代謝組學(xué)可以檢測的樣品種類有哪些呢?

代謝組學(xué)究竟是一門什么樣的研究方向?首先定義什么是代謝組學(xué)。簡單的說就是研究生物體對內(nèi)外刺激的整體代謝應(yīng)答規(guī)律。那么為什么代謝組學(xué)是基因組,轉(zhuǎn)錄組,蛋白質(zhì)組的下游。我們研究它到底有什么意義。中心法則告訴我們了遺傳信息的流向,的執(zhí)行者蛋白質(zhì)中很多酶參與了體內(nèi)的代謝過程?;驕y序數(shù)量太大,而且基因水平解釋問題往往很吃力。因?yàn)榛虻恼{(diào)控和生物學(xué)事件之間隔了一個(gè)很漫長的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程。蛋白同理,一是蛋白種類巨大,二是蛋白組學(xué)發(fā)展進(jìn)入瓶頸;發(fā)展代謝組是因?yàn)榇x物種類只有不到1w種,建立它的差異分析更加簡單,同時(shí)在價(jià)格等方面更有推廣的意義。代謝組學(xué)的研究處于生物信息流的中游。四川個(gè)性化定制靶向代謝組學(xué)分析方法

代謝組學(xué)主要研究的是作為各種代謝路徑的底物和產(chǎn)物的小分子代謝物(MW<1000)。北京GC-MS非靶向代謝組學(xué)定性分析

非靶向代謝組學(xué)分析流程:1、代謝譜分析(也稱為差異表達(dá)分析):在一組實(shí)驗(yàn)和對照樣品中,尋找豐度改變有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的感興趣代謝物;2、鑒定:進(jìn)行代謝譜分析后,測定這些代謝物的化學(xué)結(jié)構(gòu);3、解釋:研究流程的結(jié)尾的一步,解釋所發(fā)現(xiàn)的代謝物與生物過程或生物狀態(tài)之間的關(guān)聯(lián)。代謝組學(xué)主要是對生物體受到內(nèi)部(基因)或外部(飲食、環(huán)境等)刺激后所發(fā)生生物響應(yīng)進(jìn)行綜合分析的研究工具,代謝組學(xué)的研究按照研究目的的不同可分為靶向代謝組學(xué)和非靶向代謝組學(xué)。北京GC-MS非靶向代謝組學(xué)定性分析