細胞培養(yǎng)基的種類按照細胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史,細胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養(yǎng)基、合成細胞培養(yǎng)基、無血清細胞培養(yǎng)基、限定化學成分細胞培養(yǎng)基等幾大種類。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細胞滲透壓平衡,保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng)。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's與Hank's的一個主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細胞膜的重要組成成份,參與細胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細胞結(jié)團。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液,前者緩沖能力較弱,適合于密閉培養(yǎng);后者緩沖能力較強,適合于5%CO2的培養(yǎng)條件。表1-1幾種常用的BSS配方。Leibovitz’s L-15培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)由磷酸鹽和游離堿基氨基酸組成,代替了傳統(tǒng)的碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)。黑龍江華晨陽細胞培養(yǎng)基批發(fā)
MEMα是一種改良的MEM培養(yǎng)基,與MEM培養(yǎng)基相比MEMα培養(yǎng)基營養(yǎng)更為豐富,在MEM的基礎(chǔ)上又添加了NEAA、**酸鈉、硫酸鋅、VB12、生物素、抗壞血酸等成分,廣泛應(yīng)用于各種哺乳動物懸浮和貼壁細胞的培養(yǎng)。不含核苷和脫氧核苷的MEMα培養(yǎng)基常常用作DG44和其他DHFR-缺陷型細胞的篩選培養(yǎng)基。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(Alanyl-glutamine,Ala-Glu),又名丙氨酰谷氨酰胺、丙谷二肽,是一種高級細胞培養(yǎng)添加劑,可直接替代細胞培養(yǎng)基中的L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)素,但其在溶液中不穩(wěn)定,會自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨對細胞有害;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩(wěn)定,不會自發(fā)的降解。細胞利用其機制是:在細胞培養(yǎng)時,細胞會逐漸向培養(yǎng)液中釋放一種肽酶,將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后細胞會將這兩種水解產(chǎn)物吸收利用。細胞利用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養(yǎng)策略相似,連續(xù)的將低濃度水平的L-谷氨酰胺加入到培養(yǎng)液中,從而提高了L-谷氨酰胺的利用率,且不會生成多余的氨,更利于細胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨??梢源娴饶柕腖-谷氨酰胺,適用于所有的細胞,幾乎無需適應(yīng)。 貴州RPMI-1640細胞培養(yǎng)基廠家直銷Eagle培養(yǎng)基由Harry Eagle在Eagle基本培養(yǎng)基(BEM)的基礎(chǔ)上發(fā)展而來的。
RPMI-1640細胞培養(yǎng)基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀念研究所(RoswellParkMemorialInstitute,RPMI)開發(fā)出來的,RPMI是該研究所開發(fā)的一類細胞培養(yǎng)基,1640是培養(yǎng)基代號。RPMI-1640是改進型的McCoy‘s5A培養(yǎng)基,使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng),與大多數(shù)哺乳動物細胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養(yǎng)基是為淋巴細胞培養(yǎng)專門設(shè)計的,現(xiàn)在已應(yīng)用于各種正常細胞培養(yǎng),包括HeLa細胞、Jurkat細胞、MCF-7細胞、PC12細胞、PBMC細胞、星形膠質(zhì)細胞,是培養(yǎng)基之一。RPMIRPMI1640培養(yǎng)基相比其他培養(yǎng)基之所以具有獨特的效果,是因為其中含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。RPMI1640培養(yǎng)基含有生物素、維生素B12以及PABA,這些成分是Eagle’sMEM和DMEM所不具備的。針對細胞培養(yǎng)應(yīng)用,我們提供多種組分的RPMI1640改良培養(yǎng)基。
DMEM 培養(yǎng)基在細胞毒性測試中發(fā)揮著重要作用。在評估藥物、化合物或化妝品對細胞的毒性影響時,將細胞置于 DMEM 培養(yǎng)基中,再加入待測試物質(zhì)??蒲腥藛T通過觀察細胞在含測試物質(zhì)的 DMEM 培養(yǎng)基中的生長狀態(tài)、形態(tài)變化、增殖能力以及細胞死亡情況等指標,判斷測試物質(zhì)的細胞毒性強弱。比如,在新藥研發(fā)初期,利用 DMEM 培養(yǎng)基進行細胞毒性測試,可初步篩選出細胞毒性較低的藥物候選物,減少后期研發(fā)風險,為新藥研發(fā)的安全性提供重要保障。HeLa 細胞、Jurkat 細胞、 MCF-7 細胞、PC12 細胞、PBMC 細胞、星形膠質(zhì)細胞和ai細胞,是使用的培養(yǎng)基之一。
可在血清含量低時用,適用于克隆化培養(yǎng)。F12適用于CHO細胞,也是無血清細胞培養(yǎng)基中常用的基礎(chǔ)細胞培養(yǎng)基。DMEM/F12細胞培養(yǎng)基將DMEM和F12按照1:1比例混合,混合后營養(yǎng)成份豐富,血清使用量也減少。常作為開發(fā)無血清細胞培養(yǎng)基時的基礎(chǔ)細胞培養(yǎng)基。與天然培養(yǎng)基相比,有些天然的未知成分尚無法用已知的化學成分所替代,因此,細胞培養(yǎng)中使用合成培養(yǎng)基時必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分,以克服合成培養(yǎng)基的不足。普遍的做法是添加5~10%的血清,這樣才能維持細胞活力,促進細胞增殖。針對不同的動物細胞,現(xiàn)已開發(fā)了多種商業(yè)化、個性化的低血清細胞培養(yǎng)基配方,營養(yǎng)成份更加豐富,血清使用量可降低至1~3%,由此可減少了血清等動物來源成份對生物制品安全性的影響。無血清細胞培養(yǎng)基(serumfreemedium,SFM)經(jīng)歷了天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基后,無血清培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)成為當今細胞培養(yǎng)領(lǐng)域的一大趨勢。采用無血清培養(yǎng)可降低生產(chǎn)成本,簡化分離純化步驟,避免病毒污染造成的危害。無血清培養(yǎng)基,一般是在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,加入成份完全明確的或部分明確的血清替代成份,達到既能滿足動物細胞培養(yǎng)的要求,又能有效克服使用血清所帶來問題的目的。MEM α培養(yǎng)基是一種改良的MEM培養(yǎng)基,廣泛應(yīng)用于各種哺乳動物懸浮和貼壁細胞的培養(yǎng)。河南實驗細胞培養(yǎng)基供應(yīng)商
DMEM/F12培養(yǎng)基是在DMEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,添加F12培養(yǎng)基中更為豐富的營養(yǎng)成分。黑龍江華晨陽細胞培養(yǎng)基批發(fā)
在細胞培養(yǎng)實驗里,DMEM 培養(yǎng)基的使用過程需嚴謹規(guī)范。收到培養(yǎng)基后,應(yīng)及時存放于 2-8°C 的環(huán)境中,低溫可有效減緩培養(yǎng)基內(nèi)成分的降解速度,確保其營養(yǎng)成分的穩(wěn)定性。在使用前,需將培養(yǎng)基預(yù)熱至 37°C,模擬人體體溫環(huán)境,讓細胞在適宜溫度下開啟生長旅程。同時,由于 DMEM 培養(yǎng)基多采用碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng),需將培養(yǎng)環(huán)境的 CO?濃度維持在 5 - 10%,以此精細調(diào)控培養(yǎng)基的 pH 值處于 7.2 - 7.4 的生理適宜區(qū)間,為細胞打造穩(wěn)定且舒適的 “居住空間”,促進細胞健康生長。黑龍江華晨陽細胞培養(yǎng)基批發(fā)
深圳市華晨陽科技有限公司是一家集基因檢測、分子診斷、干細胞研發(fā)生產(chǎn)銷售于一體的國家高新技術(shù)企業(yè)。公司擁有20多項**,部分專利已經(jīng)轉(zhuǎn)化應(yīng)用于市場。公司于2016在深圳沙井恒昌榮高新產(chǎn)業(yè)園建立新的GMP廠房及研發(fā)實驗室。產(chǎn)品主要應(yīng)用于基因檢測、醫(yī)院、醫(yī)療機構(gòu)、生物制藥、出入境檢驗檢疫、診斷試劑、公安刑偵法醫(yī)等。近年來,公司不斷加大自主研發(fā)投入,積極引進人才和技術(shù),并與國內(nèi)外多家科研院所以及醫(yī)院有著緊密合作,促進產(chǎn)學研成果轉(zhuǎn)化。
公司通過中國CFDA,美國FDA,歐盟CE,以及SGS,TUV實地認證,擁有進出口權(quán),本著“質(zhì)量至上,求實創(chuàng)新,質(zhì)量服務(wù),合作共贏”產(chǎn)品遠銷全球,并獲得廣大客戶一致認可。
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