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武漢偏光成像紡錘體Oosight Meta

來源: 發(fā)布時(shí)間:2025-05-22

如何觀察紡錘體呢?在普通光學(xué)顯微鏡下,人類卵母細(xì)胞是半透明的,無法對(duì)紡錘體的結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察和分析。傳統(tǒng)方法是用一種特異的DNA熒光染料對(duì)卵母細(xì)胞染色,在紫外光下可顯示紡錘體,這種免疫熒光方法對(duì)卵母細(xì)胞有損傷,不能應(yīng)用于臨床。為了更好的觀測(cè)紡錘體,美國(guó)海洋生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的R.Oldenbourg等利用紡錘體的雙折射特性,開發(fā)出偏振光顯微鏡?,F(xiàn)今,偏振光顯微鏡已經(jīng)發(fā)展成為一種無創(chuàng)性的觀察和分析紡錘體動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)的顯微觀測(cè)系統(tǒng),我們也叫它紡錘體觀測(cè)儀。它不僅能對(duì)雙折射性紡錘體信號(hào)的有無進(jìn)行定性分析,還能對(duì)信號(hào)的強(qiáng)弱進(jìn)行定量分析。紡錘體,作為細(xì)胞分裂的“引擎”,驅(qū)動(dòng)著生命的延續(xù)與多樣性。武漢偏光成像紡錘體Oosight Meta

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什么是紡錘體?它有多重要?紡錘體主要由微管蛋白組成,微管蛋白是一種含有α和β亞單位的異二聚體。紡錘體不是一成不變的,常常處于組裝和去組裝的動(dòng)態(tài)變化過程中,一般在細(xì)胞分裂的中、后期,紡錘體結(jié)構(gòu)較為典型。紡錘體主要有兩個(gè)作用:其一,排列與分配染色體;其二,決定細(xì)胞胞質(zhì)分裂的分裂面。紡錘體的完整性決定了染色體分裂過程在時(shí)間和空間上的準(zhǔn)確性。紡錘體就像一位聰明的大力士的雙手,在細(xì)胞分裂過程中,能精細(xì)的將等位染色體平均拉向細(xì)胞的兩極,確保分裂后的2個(gè)子細(xì)胞中的染色體數(shù)目相等。但是,如果這個(gè)大力士多了一只或幾只手,染色體的分配將紊亂,導(dǎo)致非整倍體。紡錘體損傷的增加多見于高齡婦女,或接觸某些化學(xué)物質(zhì)的卵母細(xì)胞。在細(xì)胞分裂過程中,紡錘體對(duì)卵母細(xì)胞染色體的平衡、運(yùn)動(dòng)、分配、和極體的排出非常關(guān)鍵。卵母細(xì)胞成熟過程中的兩次減數(shù)分裂形成兩次紡錘體,卵母細(xì)胞受精、雌雄原核融合后又會(huì)形成有絲分裂紡錘體。武漢MII期紡錘體卵細(xì)胞評(píng)價(jià)紡錘體的異??赡軐?dǎo)致遺傳信息的丟失或重復(fù),進(jìn)而引發(fā)遺傳性疾病。

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為了減少冷凍過程中紡錘體的損傷,研究者們嘗試在冷凍液及解凍液中添加細(xì)胞骨架保護(hù)劑,如紫杉醇(Taxol)。紫杉醇能夠穩(wěn)定微管結(jié)構(gòu),防止其在低溫下解聚。通過偏光成像技術(shù),研究者可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)紫杉醇對(duì)紡錘體的保護(hù)效果,評(píng)估其在冷凍保存過程中的作用機(jī)制。此外,還可以進(jìn)一步觀察解凍后卵母細(xì)胞的發(fā)育潛能,為臨床應(yīng)用提供可靠依據(jù)。無需對(duì)細(xì)胞進(jìn)行固定和染色,保持細(xì)胞的活性與完整性。能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)紡錘體的形態(tài)變化,評(píng)估冷凍效果。能夠捕捉到細(xì)微的紡錘體形態(tài)變化,提高評(píng)估的準(zhǔn)確性。

紡錘體觀測(cè)新技術(shù)提升“試管嬰兒”胚胎受精率什么是紡錘體觀測(cè)儀?紡錘體觀測(cè)儀是利用光線經(jīng)過雙折射性的物體時(shí)產(chǎn)生的光程差,對(duì)卵母細(xì)胞內(nèi)的紡錘體進(jìn)行動(dòng)態(tài)及無創(chuàng)觀察的顯微觀測(cè)系統(tǒng)。紡錘體觀測(cè)儀主要有什么用處?紡錘體觀測(cè)儀主要用于ICSI注射時(shí)紡錘**置觀測(cè),避免ICSI注射時(shí)對(duì)卵子的紡錘體損傷。目前的ICSI注射方法是:假定成熟的MII卵母細(xì)胞的紡錘體靠近***極體,通過定位***極**置于6點(diǎn)或12點(diǎn)方向,在垂直于***極體的3點(diǎn)鐘方向注入精子。但事實(shí)上,紡錘體的位置不是固定不變的,***極體不能精細(xì)預(yù)測(cè)所有卵母細(xì)胞紡錘體的位置,約39%的紡錘體并不能通過***極體預(yù)測(cè)。傳統(tǒng)的ICSI注射很可能損壞紡錘體,若紡錘體損傷很可能導(dǎo)致卵母細(xì)胞死亡或染色體異常。因此,在ICSI注射時(shí)對(duì)紡錘體進(jìn)行觀察,對(duì)于ICSI操作和受精結(jié)局都有非常重要的意義,可以顯著提高ICSI受精率,有大量文獻(xiàn)報(bào)道正常受精率在觀察到紡錘體的卵子中***高于未觀察到紡錘體的卵子(83.3%VS77.2%)。紡錘體儀還有什么作用?紡錘體觀測(cè)儀還可以對(duì)一代受精后的卵母細(xì)胞受精情況進(jìn)行評(píng)估,選擇未受精的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI***。紡錘體的異??赡軐?dǎo)致染色體無法正確分離,形成多倍體或單倍體細(xì)胞。

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微管蛋白的突變會(huì)影響微管的聚合和解聚,導(dǎo)致紡錘體結(jié)構(gòu)異常。例如,某些疾病中,微管蛋白的突變會(huì)導(dǎo)致紡錘體功能障礙,增加染色體非整倍性的風(fēng)險(xiǎn)。動(dòng)粒與微管結(jié)合能力下降:動(dòng)粒是染色體與紡錘體微管連接的關(guān)鍵結(jié)構(gòu),其功能障礙會(huì)影響染色體的正確捕捉和分離。例如,某些基因突變(如BUBR1突變)會(huì)影響動(dòng)粒的功能,導(dǎo)致染色體分離錯(cuò)誤。動(dòng)粒通過信號(hào)傳導(dǎo)途徑與紡錘體檢查點(diǎn)相互作用,確保染色體的正確分離。動(dòng)粒信號(hào)傳導(dǎo)異常會(huì)導(dǎo)致紡錘體檢查點(diǎn)失效,增加染色體非整倍性的風(fēng)險(xiǎn)。紡錘體在細(xì)胞分裂中的精確調(diào)控是生物體發(fā)育的基礎(chǔ)。上??寺〖忓N體Hoechst染料

紡錘體的形成需要消耗大量的能量和原材料。武漢偏光成像紡錘體Oosight Meta

秋水仙素為什么會(huì)使有絲分裂的細(xì)胞停滯于中期如果用秋水仙素處理有絲分裂的細(xì)胞,紡錘體會(huì)迅速消失,細(xì)胞停滯在有絲分裂中期,染色體無法分離成兩組。用秋水仙堿進(jìn)行誘導(dǎo),從而將細(xì)胞阻斷在細(xì)胞分裂中期,也是誘導(dǎo)細(xì)胞周期同步化的重要方法之一。真核細(xì)胞周期可分為4個(gè)時(shí)期,分別是G1期、S期、G2期和M期。在細(xì)胞周期調(diào)控中主要有3個(gè)控制點(diǎn),***個(gè)控制點(diǎn)在G1期,決定細(xì)胞能否進(jìn)入S期;第二個(gè)控制點(diǎn)在G2期,決定細(xì)胞能否進(jìn)入有絲分裂期;第三個(gè)控制點(diǎn)在M期,決定細(xì)胞是否已經(jīng)準(zhǔn)備好將復(fù)制好的染色體拉向兩極。CDK(周期蛋白依賴性蛋白激酶)對(duì)細(xì)胞周期運(yùn)行起著**性調(diào)控作用,CDK與不同時(shí)期的周期蛋白結(jié)合會(huì)在特定周期起調(diào)節(jié)作用。cyclinA、cyclinB是在M期起調(diào)節(jié)功能的兩種主要周期蛋白。細(xì)胞周期運(yùn)轉(zhuǎn)到分裂中期后,在后期促進(jìn)復(fù)合物(APC)的作用下,M期cyclinA和cyclinB通過泛素化途徑迅速降解,Cdkl活性喪失,細(xì)胞周期便從M期中期向后期轉(zhuǎn)化。APC活性變化是細(xì)胞周期由分裂中期向后期轉(zhuǎn)換的關(guān)鍵因素,其活性受到多種因素的綜合調(diào)節(jié),紡錘體組裝檢查點(diǎn)是其重要的調(diào)控因素。紡錘體組裝不完全,或所有動(dòng)粒不能被動(dòng)粒微管全部捕捉,則APC不能被***。武漢偏光成像紡錘體Oosight Meta