在生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,卵母細(xì)胞的冷凍保存技術(shù)一直是研究的熱點(diǎn)之一。尤其是針對(duì)卵母細(xì)胞內(nèi)部高度復(fù)雜且精細(xì)的紡錘體結(jié)構(gòu),其冷凍過(guò)程中的穩(wěn)定性與完整性直接關(guān)系到解凍后卵母細(xì)胞的存活率及發(fā)育潛能。紡錘體作為卵母細(xì)胞內(nèi)部的關(guān)鍵結(jié)構(gòu),由微管等高分子物質(zhì)有序排列而成,具有雙折射性。這種特性使得紡錘體在偏振光下能夠呈現(xiàn)出獨(dú)特的形態(tài)和特征,從而被Polscope等偏振光顯微鏡捕捉并觀察。雙折射性紡錘體的形態(tài)、穩(wěn)定性和完整性對(duì)于卵母細(xì)胞的正常減數(shù)分裂及胚胎發(fā)育至關(guān)重要。紡錘體形成的精確性對(duì)于維持生物體遺傳穩(wěn)定性至關(guān)重要。昆明克隆紡錘體揭示卵母細(xì)胞關(guān)鍵結(jié)構(gòu)
紡錘體在有絲分裂中發(fā)揮著至關(guān)重要的導(dǎo)航作用,其主要功能包括:排列與分裂染色體:紡錘體的完整性決定了染色體分裂的正確性。在細(xì)胞分裂中期,染色體在紡錘絲的牽引下,自動(dòng)在赤道板排列整齊。當(dāng)細(xì)胞進(jìn)入分裂后期,紡錘體微管收縮,將染色體牽引至兩極,形成兩組數(shù)目相等的姐妹染色單體。這一過(guò)程確保了遺傳信息的準(zhǔn)確傳遞,避免了染色體分離錯(cuò)誤導(dǎo)致的遺傳異常。決定胞質(zhì)分裂的分裂面:在染色體分裂的同時(shí),紡錘體中的一部分微管不隨染色體分裂到兩極,而是停弛在紡錘體中間形成紡錘中心體。紡錘中心體的中心區(qū)域?yàn)閮山M極性相反的微管交疊區(qū),稱為紡錘中心區(qū),它決定了接下來(lái)的胞質(zhì)分裂面。胞質(zhì)分裂開(kāi)始于分裂后期的較晚期,一般結(jié)束于分裂末期后1-2小時(shí),此期間兩個(gè)子細(xì)胞由中心顆粒體連接。紡錘體通過(guò)精確控制胞質(zhì)分裂面的位置,確保了細(xì)胞分裂的對(duì)稱性和穩(wěn)定性。香港雙折射性紡錘體改善分級(jí)紡錘體微管與染色體上的動(dòng)粒結(jié)合,形成穩(wěn)定的連接。
紡錘體功能分解在細(xì)胞分裂中,其主要作用有兩個(gè)部分。其一為排列與分裂染色體。紡錘體的完整性決定了染色體分裂的正確性。紡錘體的正常生成是染色體排列的必要條件。紡錘體生成完畢后一般會(huì)有5-20分鐘的延遲,以供細(xì)胞調(diào)整著絲點(diǎn)上微管束的極性,以及決定是否所有的著絲點(diǎn)都附著正確。此后細(xì)胞進(jìn)入分裂后期,染色體分裂為兩組數(shù)目相等的姐妹染色單體。同樣,紡錘體的完整性決定這個(gè)分裂過(guò)程在時(shí)間和空間上的準(zhǔn)確性。紡錘體另一功能為決定胞質(zhì)分裂的分裂面。染色體分裂的同時(shí),紡錘體中的一部分微管不隨染色體分裂到兩極,而停弛在紡錘體**,形成紡錘**體(centralspindle)。在紡錘中體的**為兩組極性相反的微管交疊的區(qū)域,稱為紡錘**區(qū)(spindlemidzone).此**區(qū)就是接下來(lái)的胞質(zhì)分裂面。胞質(zhì)分裂開(kāi)始于分裂后期的較晚期。胞質(zhì)分裂一般結(jié)束于分裂末期后1-2小時(shí),此期間兩個(gè)子細(xì)胞由中心顆粒體(midbody)連接。一般認(rèn)為紡錘體的分解發(fā)生在細(xì)胞分裂末期。
冷凍與解凍過(guò)程中涉及多個(gè)環(huán)節(jié),包括溫度控制、時(shí)間控制、冷凍保護(hù)劑的添加與去除等。這些環(huán)節(jié)中的任何一步操作不當(dāng)都可能導(dǎo)致紡錘體損傷。因此,需要不斷優(yōu)化冷凍與解凍技術(shù),以減少對(duì)紡錘體的不良影響。近年來(lái),研究者們通過(guò)不斷嘗試和優(yōu)化冷凍保護(hù)劑的配方,取得了進(jìn)展。例如,甘油、二甲基亞砜(DMSO)等滲透性保護(hù)劑被用于哺乳動(dòng)物卵母細(xì)胞的冷凍保存中,它們能夠迅速降低細(xì)胞內(nèi)水分含量,減少冰晶形成。同時(shí),一些非滲透性保護(hù)劑如蔗糖、海藻糖等也被發(fā)現(xiàn)對(duì)紡錘體具有一定的保護(hù)作用。紡錘體的異??赡芘c人類衰老和疾病的發(fā)生有關(guān)。
對(duì)于因疾病、年齡或其他原因可能失去生育能力的女性來(lái)說(shuō),MI期紡錘體卵冷凍技術(shù)提供了一種有效的生育能力保存方式。通過(guò)冷凍保存MI期卵母細(xì)胞并在適當(dāng)?shù)臅r(shí)候進(jìn)行解凍和受精操作,可以實(shí)現(xiàn)生育愿望的延續(xù)。在輔助生殖技術(shù)中,MI期紡錘體卵冷凍技術(shù)可以用于提高試管嬰兒的成功率。通過(guò)選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的MI期卵母細(xì)胞進(jìn)行冷凍保存并在需要時(shí)進(jìn)行解凍和受精操作,可以篩選出更具發(fā)育潛能的胚胎進(jìn)行移植。MI期紡錘體卵冷凍技術(shù)還可以與遺傳病篩查技術(shù)相結(jié)合,通過(guò)檢測(cè)卵母細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)來(lái)篩選出健康的胚胎進(jìn)行移植。這有助于降低遺傳病在后代中的發(fā)病率,提高出生人口的質(zhì)量。紡錘體微管的排列方向決定了染色體分離的方向。上??寺〖忓N體胚胎植入
紡錘體微管的穩(wěn)定性受到細(xì)胞內(nèi)外多種信號(hào)的調(diào)節(jié)。昆明克隆紡錘體揭示卵母細(xì)胞關(guān)鍵結(jié)構(gòu)
胞質(zhì)膜在動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞分裂結(jié)束時(shí),母細(xì)胞在一個(gè)被稱為“胞質(zhì)分裂”的過(guò)程中分裂成兩個(gè)子細(xì)胞和分區(qū)隔離的染色體。有絲分裂紡錘體控制胞質(zhì)膜上的“胞質(zhì)分裂”事件,但連接這兩個(gè)宏觀結(jié)構(gòu)的機(jī)制一直不清楚。MarkPetronczki及其同事提供了一個(gè)結(jié)構(gòu)和功能分析結(jié)果,他們發(fā)現(xiàn)**紡錘體蛋白(紡錘體中間區(qū)域和中間體中的一個(gè)蛋白復(fù)合物)是有絲分裂紡錘體與胞質(zhì)膜間所缺失的聯(lián)系環(huán)節(jié),這個(gè)聯(lián)系環(huán)節(jié)確?!鞍|(zhì)分裂”過(guò)程的***結(jié)果。本文作者還發(fā)現(xiàn),**紡錘體蛋白的MgcRac***亞單元中的一個(gè)區(qū)域?yàn)橐粋€(gè)“系繩”,它連接到胞質(zhì)膜中的磷酸肌醇脂質(zhì)上。[4]昆明克隆紡錘體揭示卵母細(xì)胞關(guān)鍵結(jié)構(gòu)