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陣列單分子數(shù)字ELISA超敏檢測

來源: 發(fā)布時間:2025-06-06

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超敏:芯棄疾.數(shù)字ELISA,與Simoa同樣的檢測方案,將檢測結(jié)果二維化,使用成像方式,可精確量檢測區(qū)多少個微球載體上發(fā)生免疫反應(yīng),具有陽性熒光信號,理論可達(dá)fg級;使用常規(guī)ELISA試劑,測試IL-6等演示指標(biāo),也可輕松達(dá)到亞pg級(0.2-0.5pg/mL);使用顯微圖像處理方法,得到數(shù)萬個磁珠中,陽性的個數(shù)和亮度,建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到待測指標(biāo)的濃度。極低濃度時,檢測信息為數(shù)字化信號,有效提高檢測靈敏度到0.2 pg/ml級; 芯棄疾JX-8B單分子ELISA檢測產(chǎn)品,微量樣本可同時測2-4個指標(biāo);!陣列單分子數(shù)字ELISA超敏檢測

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創(chuàng)新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA

我公司推出的數(shù)字化高靈敏ELISA芯片檢測產(chǎn)品應(yīng)用場景:適合生物實驗室、醫(yī)學(xué)實驗室、科研市場、產(chǎn)品預(yù)研、產(chǎn)品開發(fā)、ELISA檢測、動物病情檢測等各種應(yīng)用場景應(yīng)用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測,可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測產(chǎn)品。

用DNA捕獲探針(5‘-NH2/C12-GTTGTCAAGATGCTA)功能化的微球CCGTTCAGAG-3‘)是按照制造商的說明制備的。這些珠子與生物素化互補(bǔ)DNA的1μM(5’-生物素-CTCT)孵育。在含有0.5MNaCl和0.01%Tween-20的TE緩沖液中過夜(16h)孵育GAACGGTAGCATCTTGACAAC-3‘。孵育后,用PBS洗滌珠子三次含0.1%Tween-20的緩沖液。將珠子樣品分裝至微孔板中100μL中每孔給予400,000個微球。從微孔板孔中吸取緩沖液,將微球重懸后與不同濃度的ofSβG孵育。 IVD數(shù)字ELISA使用效果POCT 芯片推動急診檢測向多指標(biāo)聯(lián)檢升級,15 分鐘內(nèi)出具心肌損傷等多項結(jié)果。

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芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品

每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測

數(shù)字ELISA測量蛋白質(zhì)濃度遠(yuǎn)低于傳統(tǒng)ELISA的能力源于兩種效應(yīng):1)SiMoA對酶標(biāo)記的高度敏感性;以及2)通過數(shù)字化蛋白質(zhì)檢測可以實現(xiàn)的低背景信號。任何免疫測定的靈敏度由其靈敏度決定。檢測技術(shù)到標(biāo)簽,抗體親和力,試驗背景,以及背景測量值的變異(%CV)27.SiMoA對酶非常敏感標(biāo)簽(圖2)為在數(shù)字ELISA中檢測亞飛摩爾濃度的標(biāo)記蛋白提供了基礎(chǔ)。也就是說,對于給定親和力的抗體,其靈敏度為免疫測定將由測定背景決定,SiMoA的高標(biāo)記靈敏度有助于降低這種背景。對照實驗表明,數(shù)字ELISA的背景來自于檢測抗體和酶的非特異性結(jié)合(NSB)與捕獲珠表面結(jié)合(補(bǔ)充表2)。AsSiMoA相比傳統(tǒng)檢測方法具有更高的標(biāo)記靈敏度,明顯減少了檢測抗體(~1nM)和酶標(biāo)記物(1–50pM)的需要,以檢測結(jié)合事件,與傳統(tǒng)方法相比(標(biāo)記試劑濃度~10nM)。降低的標(biāo)記物濃度減少了NSB到捕獲表面,從而導(dǎo)致背景信號明顯降低。

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將200,000個功能化DNA捕獲探針與100μL孵育含有目標(biāo)DNA的溶液(5‘-TTGACGGCGAAGACCTGGATGTATTGCTCCTCTGAACGGTAGCATCTTGACAAC-3‘孵育2小時后,移除DNA靶標(biāo)溶液,用0.2×SSC緩沖液洗滌珠子三次含有0.1%Tween-20的微球重新懸浮并與10nM混合生物素標(biāo)記的信號探針(5‘-TACATCCAGGTCTTCGCCGTCAA/生物素/-3’)對目標(biāo)DNA具有特異性,孵育1小時。然后將珠子在去除信號探針后用含0.1%吐溫-20的0.2×SSC緩沖液洗滌三次。隨后向珠子沉淀中加入10pMS阝G溶液,混勻并混合1小時。然后將珠子分離并在含0.1%吐溫-20的5×PBS緩沖液中洗滌六次。重懸于10μLofPBS中并加載到飛升微升孔陣列上。 芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,低成本單分子檢測;

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每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測

單分子酶檢測到的比較低酶分子數(shù)假設(shè)蛋白質(zhì)檢測分析的更終靈敏度為背景信號可能由非特異性相互作用產(chǎn)生。為了評估內(nèi)在敏感性,我們通過將400,000個帶有生物素的珠子與不同濃度的酶綴合物鏈霉親和素-阝-半乳糖苷酶(S阝G)混合,創(chuàng)建了具有明確酶與珠子比例的珠子群體。為了方便起見,生物素化珠子是通過將生物素化DNA與功能化的珠子雜交提供的?;パa(bǔ)DNA。[我們注意到,該實驗不應(yīng)被視為敏感的DNA檢測;該檢測的敏感性受到非特異性相互作用的限制,如補(bǔ)充圖2所示,這些相互作用發(fā)生在酶綴合物和表面結(jié)合的DNA之間。 數(shù)字 ELISA 芯片生物相容性優(yōu)異,表面處理減少蛋白吸附,保障復(fù)雜樣本檢測穩(wěn)定性。微型數(shù)字ELISA易用性

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芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA高敏檢測產(chǎn)品具有微量的優(yōu)勢:

微量:芯片上反應(yīng),流道區(qū)只有幾十微米高度,極大降低試劑、樣本用量;微量試劑檢測:更少只需10ul樣本、試劑只為常規(guī)的1/10;

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA高敏檢測產(chǎn)品具有靈活的優(yōu)勢:

靈活:可手動、可只使用8孔芯片,總成本、更小實驗成本均較低,搭配使用常用實驗室小型設(shè)備即可使用

測試結(jié)果:寬波長掃描儀結(jié)果-明場+熒光場同時看到磁珠與熒光,可觀測每個磁珠上免疫反應(yīng)的程度

先進(jìn)新型的單分子檢測方法的普及版 陣列單分子數(shù)字ELISA超敏檢測