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來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2021-07-25

臨床資料 31例乳腺患者均為女性,年齡26~62歲,中位年齡49歲。病程5天~18個(gè)月。其中浸潤(rùn)性導(dǎo)管23例,浸潤(rùn)性小葉*6例,粘液2例。腫塊比較大徑1.4~6.5cm。


2.2 組織芯片質(zhì)量 自行設(shè)計(jì)和制做的組織芯片能夠滿足觀察研究的要求,但由于為手工所制,組織芯排列不夠整齊,且0.5mm直徑組織芯在HE染色和免疫組化染色過(guò)程中易發(fā)生位置滑動(dòng),并有少量脫片。


2.3 組織學(xué)檢查 乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管細(xì)胞異型性較顯現(xiàn),胞質(zhì)豐富,紅染、淡紅染或透明,核大,核仁明顯,核分裂像易見(jiàn),成不規(guī)則條索、巢狀、片狀排列,可見(jiàn)腺樣結(jié)構(gòu)。浸潤(rùn)性小葉**細(xì)胞較小,相互間粘附性差,稍松散,常呈單排列樣浸潤(rùn)于膠原纖維束間,圍繞正常導(dǎo)管呈同心圓狀排列,部分病例見(jiàn)小巢狀、腺泡狀結(jié)構(gòu)。粘液腺*見(jiàn)小簇細(xì)胞成腺狀、小巢狀散在漂浮于粘液湖中。


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目的  比較抗原修復(fù)對(duì)多聚甲醛固定腦組織冰凍切片免疫組化結(jié)果的影響。 方法  成年SD大鼠用4%多聚甲醛經(jīng)心腔灌注、固定后,分別經(jīng)15%及30%蔗糖梯度脫水后進(jìn)行冰凍切片(10μm),取相同部位切片20張,用兔抗Ach-M 2 受體多克隆抗體和小鼠抗DA-D 2 受體多克隆抗體作S-P免疫組化染色。 結(jié)果  經(jīng)抗原修復(fù)的冰凍切片組的陽(yáng)性結(jié)果比未經(jīng)抗原修復(fù)組有明顯提高。 結(jié)論  本實(shí)驗(yàn)次發(fā)現(xiàn)多聚甲醛固定的組織冰凍切片經(jīng)抗原修復(fù)可以提高免疫反應(yīng)敏感性或提升抗體效價(jià)。機(jī)制可能與多聚甲醛固定后對(duì)抗原有封閉作用有關(guān)。山東組織免疫組化公司電話融享生物公司提供免疫組化,低價(jià)格,高服務(wù),提供售后服務(wù)。

眾所周知,冰凍切片較突出的優(yōu)點(diǎn)就是能夠較完好地保存抗原的免疫活性  ,即具有抗原敏感性高的優(yōu)點(diǎn)  。因此對(duì)冰凍切片通常不進(jìn)行抗原修復(fù) ,而在作免疫組化的研究時(shí)往往需要對(duì)組織進(jìn)行固定,固定液(如多聚甲醛、福爾馬林)使組織中的許多氨基酸殘基在分子內(nèi)或分子間形成醛鍵,使得不少抗原決定簇被封閉。同時(shí),由于甲醛的聚合作用,使蛋白分子間相互交聯(lián)形成大分子網(wǎng)絡(luò),也導(dǎo)致了抗原有一定的封閉作用  ,從而降低了抗原敏感性??紤]到以上原因,我們對(duì)冰凍切片進(jìn)行高溫高壓抗原修復(fù)并作對(duì)比研究。

目的 探討不同規(guī)格組織芯片在乳腺相關(guān)基因產(chǎn)物檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值。方法 采用微波修復(fù)免疫組織化學(xué)S-P法和組織芯片技術(shù),檢測(cè)ER、PR、nm23、Her-2、p53在31例乳腺組織中的表達(dá),并與常規(guī)病理學(xué)方法進(jìn)行比較分析。結(jié)果 不同規(guī)格組織芯相比較,免疫組化結(jié)果幾乎完全一致。常規(guī)制片免疫組化陰性,而組織芯片免疫組化陽(yáng)性者包括ER2例,PR1例;常規(guī)制片免疫組化陽(yáng)性,而組織芯片免疫組化陰性者包括nm23、Her-2各1例。部分病例常規(guī)制片免疫組化和組織芯片免疫組化陽(yáng)性表達(dá)強(qiáng)度略有不同。結(jié)論 組織芯片的免疫組化結(jié)果與常規(guī)制片免疫組化比較,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,差異無(wú)顯現(xiàn)性(P>0.05)。組織芯片技術(shù)有良好應(yīng)用價(jià)值和廣闊發(fā)展前景。上海免疫組化切片 不掉片,厚薄均勻找上海融享生物科技有限公司價(jià)格更低 服務(wù)更好。

色反應(yīng)的控制  免疫酶染色應(yīng)注意控制:①成色質(zhì)濃度和溫育時(shí)間可調(diào)節(jié) ,增加成色質(zhì)的量和/或增加底物溫育時(shí)間,可增加反應(yīng)產(chǎn)物強(qiáng)度。著色太深可減少溫育反應(yīng)時(shí)間。②過(guò)氧化物酶顯色時(shí),H2O2較大濃度將使顯色反應(yīng)過(guò)快而致背景加深;過(guò)量H2O2可能88酶的活性。


  4.復(fù)染  根據(jù)所用的染色方法和呈顯顏色等,可選用適當(dāng)?shù)膹?fù)染方法。如陽(yáng)性結(jié)果呈紅或棕色,則用蘇木素將細(xì)胞核染成蘭色,以便定位檢測(cè)。也可用1%~2%甲基綠復(fù)染。


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這些常用免疫組織化學(xué)方法的原理如下:

1. 免疫熒光細(xì)胞化學(xué)技術(shù)

將已知抗體標(biāo)上熒光素,以此作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原,在熒光顯微鏡下觀察.當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后會(huì)發(fā)出一定波長(zhǎng)的熒光,從而可以確定組織中的抗原定位或定量.

2. 免疫酶細(xì)胞化學(xué)技術(shù)

是免疫組織化學(xué)研究中較好常用的技術(shù).基本原理是先以酶標(biāo)記的抗體與組織或細(xì)胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒,通過(guò)光鏡或電鏡,對(duì)細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原進(jìn)行定位或定性研究.

3. 免疫膠體金技術(shù)

就是用膠體金標(biāo)記一抗,二抗或其他的能特異性的結(jié)合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作為探針對(duì)組織或細(xì)胞內(nèi)的抗原進(jìn)行定性,定位或定量研究.由于膠體金的電子密度高,多用于免疫電鏡的單標(biāo)記或多標(biāo)記的定位研究


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